10
ВЛИЯНИЕ БУТИФОСА НА АКТИВНОСТЬ ЭНТЕРАЛЬНЫХ
ФЕРМЕНТОВ КРЫСЯТ
Ахраров Х.Х.
Ташкентский педиатрический медицинский институт
Кафедра Фармакологии и физиологии
Пищевые вещества в желудке подвергаются небольшой химической
переработке. Их гидролиз осуществляется в основном в тонкой кишке, где
происходит
всасывание
образующихся
продуктов.
Расщепление
высокомолекулярных соединений на более мелкие осколки в полости
тонкой кишки обеспечивают панкреатические ферменты. Заключительные
стадии гидролиза осуществляются кишечными ферментами на
поверхности мембран энтероцитов (5) и, частично, внутриклеточно. В
настоящее время насчитывается более двух десятков энтеральных
ферментов (8). Но наиболее часто для характеристики физиологического
состояния тонкой кишки в тех или иных условиях изучают энтерокиназу,
пептидазы, моноглицеридлипазу, щелочную
фосфатазу, дисахаридазы и
амилазу –
ферменты, участвующие в расщеплении основных ингредиентов
пищи –
белков, жиров и углеводов.
Слизистая оболочка кишечника является метаболически очень
активным образованием (9). Полное ее обновление у различных животных
происходит за 36
-
144 часа (9). Поэтому ядохимикаты, в механизме действия
которых на организм теплокровных основным является вмешательство в
обменные процессы (6,7), должны оказывать заметное влияние на функции
тонкой кишки.
В ряде работ изучалось влияние фосфорорганических соединений на
гидролитическую функцию тонкой кишки. Так, хлорофос, вводимый
в желудок собак ежедневно в дозе 23 мг/кг (
1
/
15
ЛД
50
) в течение 45 дней,
в начале эксперимента угнетает активность ферментов в кишечном соке.
Раньше других и более выражено снижается активность липазы.
В дальнейшем активность ферментов возрастает, но в разной степени:
величина активности энтерокиназы не достигает исходной, а липазы –
превышает ее (3,4). При введении крысам в течение трех месяцев несколько
большей дозы хлорофоса (
1
/
10
ЛД
50
) отмечалось снижение дипептидазной
активности и повышение инвертазной активности тонкой кишки (1,
2).
Целью
исследований
явилось
изучение
изменений
ферментообразовательной
функции тонкой кишки при введении бутифоса
в малых дозах и при сравнительно больших дозах.
11
Материалы и методы
.
В экспериментах, проведенных на крысах, в
качестве функционального состояния тонкой кишки исследовалась масса
соскоба всей слизистой оболочки тонкой кишки, и активность основных
ферментов в ее гомогенате: моноглицеридлипаза –
по методу А.М.
Уголева,
М.Ю.
Черняховской, глицил
-
валин
-
дипептидаза по методу А.М.
Уголева,
Н.М.
Тимофеевой, щелочная фосфатаза по
Bodanzky
, амилаза –
по методу
А.М.
Уголева, инвертаза –
по А.М.
Уголеву и Н.Н.
Иезуитовой. Для опытов
использовали очищенный препарат ГХЦГ, содержащий 96%
гамма –
изомера. Активность ферментов (моноглицеридлипазы, глицил
-
валин
-
дипептидазы, щелочной фосфатазы, амилазы, инвертазы) рассчитывалась
на 1г сырой массы соскоба («удельная активность») и массу всей слизистой
(«суммарная» активность).
Полученные результаты.
Нами было проведено подробное изучение
воздействия на активность энтеральных ферментов широко используемого в
сельском хозяйстве фосфорорганического пестицида –
бутифоса.
Однократное введение бутифоса в дозе
1
/
3
ЛД
50
не влияло на массу
энтероцитов. Масса соскоба слизистой оболочки тонкой кишки крыс,
получавших препарат, составляла 2,05 ±0,04 г, у контрольных животных –
2,13 ±0,02 г.
Очень резко изменялась активность моноглицеридлипазы. У крыс,
забитых через 24 часа после введения бутифоса в дозе
1
/
3
ЛД
50
, активность
этого фермента была в 8,9 раза меньше, чем у контрольных животных.
Суммарная моноглицеридлипазная активность слизистой оболочки всей
кишки уменьшалась в 9,2 раза.
Активность и общий запас в слизистой кишки подопытных крыс
других исследуемых
ферментов заметных изменений не претерпевали.
При длительном введении бутифоса крысам в дозе
1
/
20
ЛД
50
резких
изменений массы слизистой оболочки тонкой кишки не наблюдалось. К
концу первого месяца опыта она несколько увеличивалась, на шестом
месяце уменьшалась на 18,6%, к десятому –
вновь незначительно
возрастала.
Наиболее существенные сдвиги при введении бутифоса в дозе
1
/
20
ЛД
50
, как и предполагали по результатам предыдущей серии опытов, были
выявлены в отношении моноглицеридлипазы. Так, через 15 дней от начала
введения препарата активность этого фермента снизилась в 3 раза.
Примерно в такой же степени уменьшался общий запас фермента во всей
слизистой кишки, так как незначительное изменение массы слизистой
почти не сказалось на этом показателе. Через 1 месяц, уровень
липолитической активности у подопытных животных был в 3,7 раза ниже,
чем у контрольных. К
2-
х месячному сроку произошло максимальное (в 4,5
раза) снижение липолитической активности. К 4
-
му, 6
-
му и 10
-
му месяцам
12
опыта
удельная
активность
и
общий
запас
в
слизистой
моноглицеридлипазы у подопытных групп животных были снижены в
среднем на 50
-70%.
Глицил
-
валин
-
дипептидазная
активность
изменялась
преимущественно в сторону снижения. Через 1 месяц от начала введения
препарата дипептидазная активность снизилась на 17%. Общий запас этого
энзима вследствие некоторого увеличения массы слизистой кишечника
подопытных животных не изменился. Ко 2
-
му и 4
-
му месяцам показатели
дипептидазной активности подопытных животных не отличались от
таковых у контрольных. К концу опытов (6
-
й и 10
-
й месяцы) уменьшение
удельной и суммарной активности стало выраженным (в среднем на 45%).
Через 1 месяц от начала опытов активность инвертазы была снижена
на 19%, общий ее запас в слизистой кишечника подопытных животных из
-
за некоторого увеличения к этому сроку массы слизистой не изменился.
Через 2, 4 и 6 месяцев затравки показатели инвертазной активности у
подопытных и контрольных животных не разнились. К 10
-
му месяцу
введения бутифоса удельная и суммарная активности инвертазы
снизились примерно на 40%.
Активность щелочной фосфатазы в начале исследований (15 и
30 дней) имела тенденцию
к повышению. Причем, суммарный запас
данного фермента к концу 1
-
го месяца увеличился более, чем на половину
вследствие некоторого возрастания удельной активности и массы
слизистой оболочки кишки. Повышение показателей активности щелочной
фосфатазы соответственно на 43% и 30% было отмечено и на 4
-
м месяце
затравки. В остальные сроки названные показатели у подопытных
животных имели тенденцию к снижению.
Амилолитическая активность несколько повышалась через 15 дней
от начала введения бутифоса в дозе ½ ЛД
50
.
К месячному сроку удельная и
суммарная активность амилазы снижалась в среднем на 45%. Через 2 и
4 месяца показатели активности этого фермента у контрольных и
подопытных животных почти не отличались. К 6
-
му месяцу эксперимента
отмечалось
повторное
снижение
показателей
амилолитической
активности примерно на 20%. К 10
-
му месяцу введения бутифоса, как и в
начале опытов, амилолитическая активность слизистой кишечника
подопытных и контрольных животных была одинаковой.
Через месяц после прекращения введения бутифоса в дозе
1
/
20
ЛД
50
,
в первые три месяца опыта достоверных изменений массы энтероцитов не
отмечалось, хотя наблюдалась тенденция к ее снижению. В конце 4
-
го и
6-
го месяцев исследования масса соскоба слизистой оболочки подопытных
и
контрольных
крыс
становилась
одинаковой.
Наиболее
отчетливое влияние этой дозы бутифоса сказывалось на активности
моноглицеридлипазы
.
13
Через 15 дней от начала введения пестицида, активность фермента
снижалась в 2,6 раза, а к концу первого месяца –
в 3,3 раза. Затем разница
между активностью моноглицеридлипазы в гомогенате слизистой оболочки
тонкой кишки подопытных и контрольных крыс становилась меньше, но до
конца исследований она все
-
таки оставалась достоверной. Общий запас этого
фермента в слизистой кишечника во все сроки
исследования уменьшался
примерно в такой же степени, как и удельная его активность.
Глицил
-
валин
-
дипептидазная
активность
претерпевала
волнообразные изменения, достоверные лишь в сторону снижения. Так, к
концу первого месяца опыта бутифос вызывал снижение
удельной и
суммарной активностей в среднем на 15%, ко 2
-
му и 4
-
му месяцам
названные показатели восстанавливались, а к 6
-
му и 10
-
му –
вновь
снижались (примерно на 25%).
Заметные изменения в показателях инвертазной активности
появились лишь в поздние сроки опытов. Индуцирующее влияние
бутифоса проявилось через 4 месяца, когда инвертазная активность
возрасла на 49%. Общий запас в слизистой данного энзима из
-
за снижения
массы слизистой оболочки не изменился. К 6
-
му месяцу опытов показатели
инвертазной активности превышали контрольный уровень на 46% и 34%,
а к 10
-
му резко снизились и стали ниже таковых у контрольных животных
на 20% и 19% соответственно.
При затравке крыс бутифосом в течение одного и 2
-
х месяцев
наметилась тенденция к повышению активности щелочной фосфатазы
относительно контроля. К концу 4
-
го месяца ее активность превысила
контрольный уровень на 54%. В дальнейшем активность фермента
снижалась, и к 6
-
му и 10
-
му месяцам стала такой же, как у интактных крыс.
Амилолитическая активность гомогената слизистой оболочки тонкой
кишки, состоящей из активности собственно кишечной гамма
-
амилазы и
сорбированной на поверхности энтероцитов панкреатической альфа
-
амилазы, на 15
-
й день опыта имела тенденцию к снижению. К месячному
сроку эксперимента активность амилазы возрасла на 25%. Поскольку в этот
период масса слизистой оболочки кишечника подопытных и контрольных
животных была одинаковой, возрастание общего запаса амилазы было
примерно таким же, как и сдвиг ее активности, отнесенной к единице массы
слизистой оболочки (27%). Ко 2
-
му и 4
-
му месяцам опыта различий между
показателями амилолитической активности у контрольных и подопытных
животных не стало. На 6
-
м месяце эксперимента активность амилазы вновь
возрасла на 11%, а к концу 10
-
му снизилась до контрольного уровня.
Через месяц после прекращения введения пестицида, активность всех
ферментов и масса слизистой оболочки тонкой кишки у подопытных
животных практически не отличались от таковых у контрольных.
14
Выводы.
На основании приведенных данных можно заключить, что
наиболее характерным и постоянным при воздействии бутифоса, является
угнетение активности кишечной моноглицеридлипазы, так как для ФОС
характерно ингибирующее влияние на эстеразы, к которым относится и
изучавшаяся
нами
моноглицеридлипаза.
Активность
остальных
исследуемых кишечных ферментов при длительном введении бутифоса
меняется волнообразно.
Библиографические ссылки:
1.
Аизова
О.Н.. Норбаев
И.Н., Энекабқлов
Т.Д. Патоморфологические
изменения в желудке при хроническом отравлении гексахлораном в
эксперименте. Сб.
тез.
докл.
57-
й научной конференции (секция анатомов,
гистологов, эмбриологов). Самарканд, 1970, –
С
. 56
–
58.
2.
Каценович
Л.А., Нуритдинова
Н.Ф., Исмаилова
К.А. К вопросу о
комбинированном действии некоторых пестицидов на состояние здоровья
работающих. –
В сб.: Материалы научно
-
практической конференции по
проблемам гигиены в условиях Узбекистана. Ташкент, 1989.
–
С
. 218
–
225.
3.
Маковская
Е.Н.
Патологическая
анатомия
отравления
ядохимикатами. М.,1979, –
С
. 82
–
107.
4.
Платонова
В.И. Функциональное состояние желудка у лиц,
подвергающихся воздействию некоторых хлорорганических ядохимикатов.
Автореф.
канд.
дис., Киев, 1989.
5.
Фудель
-
Осипова
С.И. О некоторых подходах к изучению действия
токсических веществ на организм. –
В сб.: Гигиена и токсикология
пестицидов и клиника отравлений. Киев, 1989, –
С
. 178
–
189.
6.
Шлыгин
Г.К. Ферменты кишечника в норме и патологии. М., 1967.
7.
Уголев
А.М. Физиология и патология пристеночного (контактного)
пищеварения. Л
., 1967.
8. David A., Joseph L., Regulation on small intestinal protein metabolism.
Gastroenterology, 2003, v.64,
–
№3, –
PP. 446
–
471.
9. Leblond C., Stevens C., The contact renewal of the intestinal epithelium in
the albino rat. Anat.Res.,2003, v.100,
–
№3
.
10.
Зияева
LU.,
Мирзаахмедова
К
.,
Калдибаева
А
.,
Акрамовна
М
., &
Ахадова
3.
(2016). Доклиническое изучение антиатеросклеротического
препарата фирутас на патоморфологические изменения органов животных
при длительном введении,
in Library, 76(3), 77-
78. извлечено от
https://inlibrary.uz/index.php/archive/article/view/17315.
11.
Мирзаахмедова, К. (2022). Влияние соединений иммуномодулина
и фитина на показатели переокисления липидов при экспериментальном
токсическом гепатите,
in Library, 22(1), 181-
183. извлечено от
15
12.
Каримова
Г. (2020). Гепатопротективная активность дармонала
при токсическом гепатите,
in Library, 20(1), 86-
91. извлечено от
https://inlibrary.uz/index.php/archive/article/view/17377
13.
Каримов
Р., Зияева
LU
., & Мирзаахмедова
К. (2020). Влияние
фитата кобальта, фитата магния и силибора
на состав липидов сыворотки
крови при экспериментальном гепатите,
in Library, 20(1'), 122-127.
извлечено от
https://inlibrary.uz/index.php/archive/article/view/17299
14.
Аскаръянц
В., Расулова
С., Турдиева
3., & Геворгян
Г. (2022). Анализ
расстройства
взаимодействия
желудочно
-
кишечного
тракта
и
центральной нервной системы,
in Library, 22(4), 67-
71. извлечено от
https://inlibrary.uz/index.php/archive/article/view/17403
15.
Айходжаева
Д., & Ахраров
X
. (2018). Особенности влияния
гипертермии на экзокринную секреция поджелудочной железы растущих
крыс,
in Library, 18(3), 28-
30. извлечено от
https://inlibrary.uz/index.php/
archive/article/view/17472
16.
Бабаджанова
Ф., Камилова
X
., Эркаева
С., & Равшанова
С. (2021).
Парасимпатическая нервная система и ее влияние на пищеварительную
систему,
in Library, 27(4), 151-
157. извлечено от
https://inlibrary.uz/
index.php/archive/article/view/17695
