Scientific research results in pandemic conditions (COVID-19)
260
8. Деменко В.И. Микроклональное размножение плодовых и
ягодных культур. Методические указания. – Москва: МСХА, 1997. – 20
с.
9. Кравченко Л.В. Система производства посадочного материала
винограда высших категорий качества. Автореф.дисс.док.с.-х.наук. –
Краснодар, 2006. – С. 6-45.
10. Зленко В.А., Котиков У. Методы
in vitro для размножения
оздоровленного посадочного материала винограда. – М., 2008. - №3. –
С. 38-39.
Azadakhan Sabirovna, Candidate of Economic Science,
Centre of Genomics and Bionformatics, Uzbekistan,
Shahnoza Kadirovа, senior reserchers, Centre of Genomics and
Bionformatics, Uzbekistan,
THE BIOTECHNOLOGICAL COTTON AND A NPT II SELECTABLE MARKER
GENE
A. Sabirovna, Sh. Kadirovа
Abstract. The article discusses the behavior of the selective marker gene
npt II
, providing resistance to kanamycin in the biotechnology population
cotton variety Porloq-1 in connection with the experimenter is faced with
when creating biotechnological plants.
Keywords: biotechnological cotton plant, DNA, primers, PCR, selective
marker genes (SMG), npt II, verification.
Npt II ген будучи бактериальным по происхождению, был выделен
из
из
транспозона
Tn5
E.coli
и
кодирует
фермент
неомицинфосфотрансферазу
II
(амино-гликозид-3’-
фосфотрансферазу II, АРН(З’)II), активность которого придает ей
признак устойчивости к родственным антибиотикам: канамицину,
неомицину и гинетицину [1]. Данный ген активно используется в
генной инженерии при создании векторных (генетических)
конструкций для трансформации. Клетки, в геном которых включают
этот ген, приобретая устойчивость, способны выживать при
инкубации в канамициновой среде. В своем составе такие
внехромосомные экспрессирующиеся (или челночные) векторы
имеют сайты инициации репликации и обязательно селективный ген
[2].
Scientific research results in pandemic conditions (COVID-19)
261
Непредсказуемые изменения в экспрессии перенесенных генов - одна
из проблем, с которыми сталкивается экспериментатор при создании и
исследовании трансгенных растений. Как выяснили исследователи,
работавшие с трансформацией, в условиях стабильной экспрессии
перенесенных генов их проявление среди потомков соответствовало
доминантной мутации при полном доминировании и наследование
подчинялось классическим законам Менделя. В случае нарушений
экспрессии ими наблюдено как отклонения от ожидаемых расщеплений,
так и полная потеря экспрессии перенесенных генов [3,4]. Описаны
случаи нестабильной экспрессии чужеродных генов, где их проявление
выражается в виде мозаицизма, как чередование участков растительных
тканей с активным и неактивным трансгеном. Авторами изучалась
стабильность экспрессии и наследования чужеродной ДНК в геноме
трансгенных растений [5].
Проблема
поведения
селективного
маркерного
гена
заинтересовала нас в связи с целью получить популяцию
биобезопасных биотехнологических сортов – одной из актуальных
сегодня тем, связанных с коммерческими культурами, особенно
выходящими на мировой рынок. B нашу задачу входило выявить
генотипы,
не
несущих
ген
канамицинустойчивости,
у
биотехнологических сортов хлопчатника, а также по мере
возможности определить характер проявления селективного
маркерного гена в поколениях хлопчатника сорта Порлок-1.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Объектом исследования послужил хлопчатник серии Порлок-1,
полученный техникой РНК-интерференции (PHYA1 RNAi).
Для молекулярно-генетического скрининга были использованы
следующие методы:
- экстракция геномной ДНК из листьев хлопчатника методом СТАБ;
- ПЦР (полимеразная цепная реакция);
- гель-электрофорез (в 0,9% и 1,5 % агарозном геле).
Очищенную растительную ДНК использовали в качестве матрицы
при постановке ПЦР при инкубировании с сайт-специфическими
праймерами. Были использованы праймеры для 35S, PDK и kan участков
ДНК.
Продукты
амплификации
анализировали
с
помощью
электрофореза в 1,5%-ном агарозном геле.
Результаты и обсуждение
В результате ПЦР-скрининга на наличие в геноме векторной
конструкции, выполненного парой праймеров 35S–F и PDK-R для
хлопчатника сорта Порлок-1 были получены позитивные результаты. В
ходе ПЦР были синтезированы продукты амплификации, что
подтверждает присутствие в геноме растительных образцов векторной
Scientific research results in pandemic conditions (COVID-19)
262
конструкции pHellsgate-8::PHYA1, или ее фрагмента. Затем, эти же
образцы ДНК использовали в ПЦР с праймерной парой, специфичной для
гена
npt II. И на данном этапе мониторинга нам были интересны образцы,
в которых реакция амплификации не состоялась. Имевшие негативные
результаты амплификации с праймером на ген устойчивости к
канамицину образцы были высеяны в грунт, и растительный материал
был использован для мониторинга на наследование
npt II.
Таким образом, при скрининге геномов следующего года генерации
из 214 растений хлопчатника семей № 21, № 23, № 35 и № 96, нами
выявлено в общем счёте 134 образца, которые имели негативный ответ
при постановке ПЦР с сайт-специфичными праймерами (kan) для гена,
обеспечивающего устойчивость к канамицину (
npt II).
Как обсуждается в мировой литературе наследование привнесенных
чужеродных генов, несмотря на то, что интегрированные в геном
растения- реципиента фрагменты экзогенной ДНК (в нашем случае ген
устойчивости к канамицину) становились его облигатным компонентом,
сохранялись в последующих поколениях как неотъемлемая часть генома
[6, 7].Однако к настоящему времени накоплено достаточно много
примеров отклонений от менделевского наследования, обусловленных
инактивированием гетерологичных генов[8].
Список литературы:
1.
NarendraTuteja, Shiv Verma, SebastinRaveendar,RanjanSahoo,
BheemaLingeshwara Reddy. Recent advances in development of marker-
free transgenic plants:Regulation and biosafety concern// Journal of
Biosciences.
March
2012.
Р.
167–197.
https://www.researchgate.net/publication/220000891
2.
http://chem21.info/info/200493/
3.
Budar F., Thia-Toong, Montagu van M. Agrobacterium-mediated gene
transfer results mainly in transgenic plants transmitting T-DNA as a single
Mendelian factor//Genetics. 1986. V. 114. P. 303-313.
4.
DerolesS.C., Gardner R.C.Expression and inheritance of kanamycin
resistanxce in a large number of transgenic petunias generated by
Agrobacterium mediated transformation.//Plant.Mol.Biol. 1988. 11: 355-
364
5.
Potrykus Ingo, Jerzy Paszkowski, Michael W. Saul, JirinaPetruska ,
Raymond D. Shillito . Molecular and general genetics of a hybrid foreign gene
introduced into tobacco by direct gene transfer// Molecular and General
Genetics MGG. (1985)Vol. 199, P.169–177.
6.
AbdurakhmonovI.Y., BurievZ.T., S. Saha, JenkinsJ.N., AbdukarimovA.,
PepperA.E. Cotton PHYA1 RNAi enhances major fibre quality and agronomic
Scientific research results in pandemic conditions (COVID-19)
263
traits of cotton (
Gossypium hirsutum L.) // Nature Communications. 2013. 5:
3062. DOI: 10.1038/ncomms4062|www.nature.com/naturecommunications.
7.
Heberle-Bors E., Charvat B., Thompson D., Scherthaner J.P., Barta A.,
Matzke A.J.M., Matzke A.M. Genetic analysis of T-DNA insertion into tobacco
genome // Plant Cell Rep. 1988. V. 7. P. 571-574.
8.
Christou P., Swain W.F., Yang N.S., McCabe D.E. Inheritance and
expression of foreign genes in transgenic soybean plants // Proc. NatlAcad. Sci.
USA. 1989. V. 86. P. 7500-7504.
9.
Deineko E., Zagorskaya A., Filipenko E. et al. Instability of
npt II gene
expression in the progeny of transgenic tobacco plants (Nicotiana tabacum L.
and N. plumbaginifolia L.) // Biotechnology and biotechnological equipment.
1996. N. 4. P. 89-92.
Oliya Muhammadiyeva, Senior lecturer Doctor of Philosophical
Sciences(PhD) Termez State University Faculty of History, Department of
Philosophy
THE IMPACT OF THE CORONAVIRUS PANDEMIC ON FAMILY AND SOCIAL
RELATIONSHIPS
O. Muhammadiyeva
Abstract. This article describes the current impact of the coronavirus
pandemic and quarantine conditions on family relationships, on some
human values and their consequences in our country and around the world.
Keywords. A family, pandemic, coronavirus, quarantine, sexual abuse,
human values, worldview, spiritual threat, cultural life.
В нынешние дни земля-мать будто отдыхает. В то время, когда в
некоторых развитых странах растет популярность, моральные
ценности человека обесцениваются, а семья отодвигается как
историческая единица людей, в нашей стране важно уделяется
внимание семье. После обретения независимости нашей страны две
социальные
структуры
-
махалля
и
семья
-
приобрели
конституционный статус. Сегодня Узбекистан неуклонно развивается
по пути построения демократического, правового государства и
гражданского общества. Семья, которая является основной ячейкой
общества, играет важную роль в достижении этой великой цели. В
нашей стране создана сильная законодательная система, которая
является основой для развития интитута семьи в нашей стране и
развития семьи в нашем обществе. Нормативно-правовая база