МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ
РЕСПУБЛИКИ УЗБЕКИСТАН
ТАШКЕНТСКАЯ МЕДИЦИНСКАЯ АКАДЕМИЯ
На правах рукописи
УДК 617.7+616.9+615.2.03+616.21/.22+616.28
АБДУРАХМАНОВА Умида Мухаммадовна
КЛИНИКО-ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ОЦЕНКА
ЭФФЕКТИВНОСТИ МАЗИ БЕНЗКЕТОЗОН
ПРИ ЛЕЧЕНИИ ГЕРПЕТИЧЕСКИХ КЕРАТИТОВ
14.00.08 – Глазные болезни
АВТОРЕФЕРАТ
диссертации на соискание ученой степени
кандидата медицинских наук
Ташкент - 2011
2
Работа выполнена на кафедре глазных болезней Ташкентской медицин-
ской академии.
Научный руководитель:
доктор медицинских наук, профессор
БАХРИТДИНОВА Фазилат Арифовна
Официальные оппоненты:
доктор медицинских наук, профессор
ЮСУПОВ Амин Азизович
доктор медицинских наук, профессор
МУСАБАЕВ Эркин Исакович
Ведущая организация
Андижанский Государственный Медицин-
ский институт
Защита диссертации состоится «___»___________2011 г. в _______ час
на заседании Специализированного совета Д.087.01.02 при Ташкентской ме-
дицинской академии по адресу: 100047, г. Ташкент, ул. Пахлавона Махмуда,
103
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Ташкентской меди-
цинской академии.
Автореферат разослан «____»_________________2011 г.
Ученый секретарь
Специализированного совета,
доктор медицинских наук, проф.
У. С. ХАСАНОВ
3
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ДИССЕРТАЦИИ
Актуальность работы.
Инфекционные заболевания глаз остаются од-
ной из важных причин понижения зрения, слепоты и гибели глаза. Ведущее
место среди инфекционной патологии органа зрения человека и прочные по-
зиции в общей структуре заболеваемости глаз занимают герпесвирусные за-
болевания (Майчук Ю. Ф., 2003; Марков И. С., 2002).
Трудности разработки специфических средств лечения офтальмогерпеса
определяются также биологическими особенностями и генетическим меха-
низмом паразитирования вируса простого герпеса, как облигатных внутри-
клеточных паразитов, способных к эволюции, мутационной изменчивости и,
как следствие, к возникновению новых резистентных штаммов. (Pereira S. R.,
Câmara F. P., 2007).
Несмотря на значительные успехи, достигнутые в последние годы в соз-
дании современных противовирусных препаратов, проблема терапии и про-
филактики офтальмогерпеса на сегодняшний день все еще остается одной из
ведущих острых проблем офтальмологии и далека от своего окончательного
решения (Kasparov A. A., Vorob'eva O. K., 2003). В связи с этим создание но-
вых эффективных противогерпетических лекарственных средств и разработ-
ка методов лечения представляется весьма актуальной задачей и имеет важ-
ное значение в профилактике герпетической инфекции, направленной на
усиление противовирусного и противовоспалительного действия, на профи-
лактику тяжелых осложнений и их последствий, на минимализацию побоч-
ных эффектов общего и местного характера. Комбинированное применение
средств с различным механизмом действия снижает и предотвращает вероят-
ность появления резистентных мутантов вирусов герпеса (Ченцова О. Б.,
Харченко Л. Н., 2001).
Степень изученности проблемы
. Необходимо отметить, что в патоге-
незе герпетических кератитов важную роль играют воспалительные явления,
которые приводят к нарушению целостности роговицы, ослаблению антиок-
сидантной и иммунной системы.
Многие противовирусные средства, включая интерферон, не произво-
дятся в виде глазных лекарственных форм или являются экономически не-
доступными для некоторых слоев населения.
В настоящее время в Узбекистане разрабатываются и производятся свои
оригинальные офтальмологические препараты. В частности, в Узбекском на-
учно-исследовательском химико-фармацевтическом институте (УзНИХФИ)
и офтальмологических клиниках ТМА наряду с другими препаратами разра-
ботана 0,5% бензкетозоновая мазь. Проведено экспериментальное и клиниче-
ское исследование при ожогах глаз (Одилова Г. Р., 2009), а также клиниче-
ское исследование при бактериальных поражениях глаз (приказ № 403 от
12.09.2007, регистрационное удостоверение №06-07) (Джамалова Ш. А.,
2008). При этом препарат показал высокую противовоспалительную, регене-
раторную, антиоксидантную, а также болеутоляющую активность.
4
С учетом использования бензкетозоновой мази как противовоспали-
тельное средство при лечении вирусных кератитов у больных, не использо-
вавших по той или иной причине противовирусные препараты, свидетельст-
вовали об эффективности проводимого лечения, это позволило нам, с учетом
химического состава, предположить, что препарат обладает и противовирус-
ными свойствами. Это поставило перед нами задачу изучения противови-
русного действия препарата бензкетозон при лечении офтальмогерпеса.
Связь диссертационной работы с тематическими планами НИР.
Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-
исследовательских работ кафедры глазных болезней Ташкентской медицин-
ской академии «Комплексные клинико-функциональные исследования неко-
торых видов офтальмопатологий с разработкой и внедрением новых лекарст-
венных форм и методов лечения в офтальмологическую практику» (Гос. ре-
гистрация № 01.070069).
Цель исследования
: Изучение противовирусной активности глазной
0,5% мази бензкетозон в лечении различных форм герпетического кератита в
клинике и эксперименте.
Задачи исследования:
1. Исследовать специфическую противовирусную активность мази
бензкетозон на модели экспериментального герпетического кератита у кро-
ликов.
2. Разработать схему комплексного лечения различных форм герпетиче-
ского кератита с применением бензкетозоновой мази.
3. Изучить сравнительную клиническую эффективность бензкетозоно-
вой мази и интерферона в терапии герпетического кератита.
4. Оценить соответствие симптомов клинического выздоровления пока-
зателям уровня цитокинов ФНО-альфа и ИФН-альфа в слезной жидкости
больных герпетическим кератитом в процессе предложенного лечения.
Объект и предмет исследования.
Клинико-лабораторное исследование
эффективности препарата бензкетозон проведено в эксперименте на 21 кро-
лике и на 60 больных с герпетическим кератитом.
Методы исследований.
Экспериментальные (морфологические и мор-
фометрические), клинические, иммунологические.
Основные положения, выносимые на защиту:
1. Изучение эффективности бензкетозоной мази на модели эксперимен-
тального кератита выявило не только специфическую противовирусную ак-
тивность препарата, но и его преимущество в сравнении с интерфероном, в
связи с дополнительными противовоспалительными и регенерирующими
свойствами бензкетозоновой мази.
2. Разработанная схема комплексного лечения, с использованием бенз-
кетозоновой мази в качестве противовирусной монотерапии при эпителиаль-
ном кератите и в сочетании с препаратами группы ацикловира при древовид-
5
ном и метагерпетическом кератите, превосходит эффект традиционного ле-
чения.
3. Показатели ФНО-альфа и ИФН-альфа являются объективными пока-
зателями клинического течения герпетического кератита и контроля эффек-
тивности терапии.
Научная новизна.
Впервые изучена и выявлена специфическая проти-
вовирусная активность препарата бензкетозон в эксперименте и клинике.
Научно обоснована целесообразность использования препарата бензке-
тозон в клинике, что обусловлено разнообразием фармакологических свойств
препарата.
Впервые проведена сравнительная оценка специфической противови-
русной активности препаратов интерферон и отечественного препарата бенз-
кетозон при лечении различных форм герпетического кератита.
Научная и практическая значимость результатов исследования.
В
практику лечения вирусных заболеваний внедрена схема лечения с примене-
нием препарата бензкетозон. Бензкетозон обладает наряду c противовоспали-
тельным, регенерирующими свойствами, также и противовирусным действи-
ем. Бензкетозон выпускается в форме глазной мази, удобной для применения
в офтальмологической практике, в отличии от интерферона.
Реализация результатов.
Результаты работы внедрены в лечебную
практику глазных отделений 2-и и 3-ей клиник Ташкентской Медицинской
Академии, глазного отделения Клинической больницы скорой медицинской
помощи, Республиканского специализированного центра микрохирургии
глаза, в клинике «LASER-OPTIКA».
Апробация работы.
Основные положения диссертационной работы до-
ложены и обсуждены на научном конгрессе офтальмологов «Актуальные во-
просы клиники, диагностики и лечения глазных болезней» (Алматы, 2006),
на I Съезде офтальмологов Азербайджана «Актуальные вопросы в офтальмо-
логии» (Баку, 2007), на VIII Международном симпозиуме терапевтической и
фармакологической офтальмологии (Италия, Рим, 2009), на научно-
практической конференции аспирантов, соискателей и резидентов «Дни мо-
лодых ученых» (Ташкент, 2009,2010), на кафедральной и межкафедральной
апробациях с участием кафедр клинической фармакологии, гистологии с ме-
дицинской биологией, микробиологии и офтальмологии ТМА (2010), на на-
учном семинаре ТМА.
Опубликованность результатов.
По теме диссертации опубликовано
11 печатных работ: 4 журнальные статьи, 6 тезисов, разработано рационали-
заторское предложение.
Структура и объем диссертации.
Диссертация изложена на русском
языке в традиционном стиле и составляет 120 страниц компьютерного набо-
ра. Состоит из введения, обзора литературы, материала и методов исследова-
ния, результатов собственных исследований, заключения, выводов и практи-
ческих рекомендаций. Диссертация иллюстрирована 19 таблицами, 18 рисун-
6
ками. Список литературы содержит 220 литературных источника, из них 75
иностранных автора.
ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ
Во
введении
показана актуальность изучения действия бензкетозоновой
мази при лечении герпетических кератитов.
В
главе 1
анализируется современное состояние изучаемой проблемы
по данным литературы. Проводится анализ распространенности герпетиче-
ских заболеваний глаз, описываются современные методы их диагностики и
лечения.
Глава 2 «Материал и методы исследования».
Экспериментальные ис-
следования проведены в отделе «Морфология» ЦНИЛ Ташкентской меди-
цинской академии (под руководством д.м.н., проф. Исроилова Р.И.)* на 21
половозрелых кроликах породы шиншила, весом 2,5-3,0 кг.
Всем животным за 3 дня до и в процессе эксперимента для профилакти-
ки вторичной инфекции закапывали дезинфицирующей капли (тобрамицин
по 2 капли 3 раза в день). Для моделирования травматического кератита жи-
вотным, после предварительной анестезии (0,5% раствором дикаина) на ро-
говице кроликов (3 кролика – 6 глаз) по всей её поверхности делали насечки
скарификатором в виде решётки. Эти животные составили I контрольную
группу.
Для модели экспериментального герпетического кератита кроликов был
использован штамм вируса простого герпеса I типа “Коптев”, любезно пред-
ложенный для воспроизведения экспериментальной модели герпетического
кератита кроликов, коллегами ФГУ «МНИИ глазных болезней им. Гельм-
гольца Росздрава». Для заражения кроликов использовали 10% суспензию в
физиологическом растворе после её центрифугирования при 2000 об/мин. в
течение 20 мин. После предварительной анестезии (0,5% раствором дикаина)
по всей поверхности роговицы кроликов делали насечки скарификатором в
виде решётки. Затем в нижний конъюнктивальный мешок глаза вносили ви-
руссодержащую суспензию (0,1-0,2 мл) и осторожно втирали её в роговицу.
Заражали оба глаза животного. На 3-4 сутки после заражения, когда разви-
валась картина типичного кератита, формировали равноценные по клиниче-
ским признакам 3 группы животных по 6 кроликов (12 глаз) в каждой (две
контрольные – II и III, и одна основная).
Проведено две серии исследования. В первой серии исследования прове-
дено морфологическое исследование роговицы кроликов c травматическим по-
вреждением и с экспериментальным герпетическим кератитом. Животным I
контрольной группы, где воспроизводили механическую травму роговицы,
также животным II контрольной группы с экспериментальным герпетическим
кератитом, специфическое лечение не проводилось, кроме закапывания тобра-
мицина. В III контрольной группе животные получали инстилляции интерферо-
*- Выражаю благодарность за помощь проведения наших исследований.
7
на и тобрамицина, а животным основной группы вместо интерферона заклады-
вали 0,5% мазь бензкетозона.
Во второй серии исследования животным с экспериментальным кератитом
применяли лечение, аналогичное первой серии, и проводилось морфометриче-
ское исследование роговицы в процессе лечения.
Клиническое обследование больных проводили у 60 больных (60 глаз) с
герпетическим кератитом в возрасте 18-55 лет в глазных отделениях II и III
клиник ТМА, из них мужчин - 37, а женщин 23.
Обследованные больные были распределены на 2 группы: основную и
контрольную, в зависимости от получаемого лечения. Распределение боль-
ных в зависимости от пола, возраста, формы и степени тяжести кератита бы-
ло однородным, во всех случаях процесс был односторонним.
Таблица 1
Распределение больных в зависимости от форм кератита
Формы керати-
тов
Контрольная
группа
Основная
группа
Всего
n
%
n
%
n
%
Эпителиаль-
ный
7
29,2±9,3
11
30,6±7,7
18
30,0±5,9
Древовидный
12 50,0±10,2 17
47,2±8,3
29
48,3±6,5
Метагерпети-
ческий
5
20,8±8,3
8
22,2±6,9
13
21,7±5,3
Всего
24
40,0±6,3
36
60,0±6,3
60
100,0
Контрольная группа - 24 (40,0%) больных (24 глаз) получала традицион-
ное лечение, включающее:
1) интерферон (в виде инстилляций по 2 капли 6-8 раз в сутки
;
2) закладывание в конъюнктивальный мешок мази ацикловир (3 раза в
день, при древовидной и метагерпетической формах)
;
3) инстилляции тобрамицина 3 раза в день (с целью профилактики вто-
ричной инфекции)
;
4) легкие мидриатики,
5) инстилляции 0,1% клодифена 4 раза в день,
6) закапывание глазного геля солкосерила (по 1 капле 4 раза в день).
Основной группе больных (36 глаз) вместо интерферона назначали
0,5%ную бензкетозоновую мазь (закладывание в конъюнктивальный мешок
3-4 раза в день).
Всем больным контрольной и основной группы назначалось общее ле-
чение в виде витаминов группы В (витамин В комплекс по 2,0 в/м), циклофе-
рона (12,5% по схеме) и антигистаминных препаратов (лораталь по 1 таблет-
ке 1 раз в сутки). Лечение проводилось в течение в течение 7-14 дней в зави-
симости от тяжести процесса.
8
Всем пациентам в ходе офтальмологического обследования были прове-
дены следующие стандартные методы диагностики: сбор жалоб больных для
определения следующих субъективных симптомов заболевания (покрасне-
ние, жжение и зуд, чувство инородного тела в глазах, светобоязнь, слезоте-
чение, блефароспазм, отделяемое и его характер.); сбор анамнеза для выяс-
нения давности заболевания, проводимого лечения и его результатов; наруж-
ный осмотр глаза и прилегающих тканей при естественном освещении; визо-
метрия проектором для исследования остроты зрения М110 (Carl Zeiss Jena);
определяли остроту зрения до и после лечения, с коррекцией при аметропии;
осмотр фокальным освещением с помощью лупы 13,0 Д от ОР-3 (ЛОМО);
биомикроскопия с помощью щелевой лампы с фото насадкой М211 (Carl
Zeiss Jena); офтальмоскопия глазного дна прямым электрическим офтальмо-
скопом ОР- 2 (ЛОМО).
Степень тяжести воспаления определяли с помощью количественного
метода оценки степени интенсивности клинических признаков по 3-балльной
системе (Майчук Ю. Ф. и Вахова Е. С., 1994; МНИИ ГБ им. Гельмгольца).
Каждый признак заболевания оценивали как: тяжелая – 3 балла; средняя – 2
балла; легкая – 1 балл и отсутствие признака – 0 баллов и по их сумме опре-
деляли степень интенсивности воспалительного процесса.
Верификация заболевания проводилась по данным анамнеза, клини-
ческой картины, результатов крови на TORCH инфекцию и данным имму-
нологических исследований слезной жидкости.
Определение уровня провоспалительных цитокинов (ФНО-α) и противо-
воспалительных интерферонов (ИФН-α) проводилось в Институте иммуно-
логии методом иммуноферментного анализа с использованием коммерческих
тест-систем «Вектор-Бест», Россия (Новосибирск 2008-2009гг), у 10 относи-
тельно здоровых лиц и 21 больных (21 глаз) с древовидным кератитом. Тест-
системы основаны на сэндвич–методе твердофазного иммуноферментного
анализа с применением пероксидазы хрена в качестве индикаторного фер-
мента. Количественная оценка результатов проводилась с использованием
программы на Excel 2006, отражающих зависимость оптической плотности
от концентрации для стандартного антигена. Чувствительность метода при
использовании данных тест-систем – 2-30 пг/мл. Материал для иммунологи-
ческих исследований собирали в первые дни обращения, т.е. до назначения
терапии.
В главе 3 представлены результаты экспериментальных исследований 21
кроликов.
Первая серия. Морфологическая характеристика травматического по-
вреждения роговицы. Результаты морфологического исследования показали,
что при механической травме поверхности роговицы первоначально образу-
ется дефект покровного многослойного эпителия, базальной мембраны и
подлежащей части соединительнотканного слоя. В первые дни опыта в ответ
на травматическое повреждение роговицы за счет появления в очаге повреж-
9
дения биологически активных факторов ответной реакции, в подлежащей
ткани роговицы происходит накопление кислых гликозамингликанов, кото-
рые повышают гидрофильность и проницаемость тканевых элементов, как
роговицы, так и сосудов находящихся в окружающей ткани конъюнктивы.
Происходит диапедезное кровоизлияние в очаг травматического поврежде-
ния. К 7- дню развивается отек межклеточного вещества, разрыхление и
дезорганизация волокнистых структур.
Таким образом, исходя из результатов морфологического исследования
можно сделать заключение о том, что при механической травмы роговицы
развивается отек межклеточного вещества, разрыхление и дезорганизация
волокнистых структур. К этим изменениям присоединяются клеточные реак-
ции в виде пролиферации как местных гистиоцитарных клеток, так и мигри-
рующих из крови моноцитарно-лимфоидных элементов.
Морфологическая характеристика герпетического кератита без ле-
чения.
Воспроизведение герпетического кератита показало, что с первого
дня эксперимента на поверхности роговицы появляются очаги воспалитель-
но-деструктивного процесса в виде помутнения, вакуолизации и отторжения
покровного эпителия.
Подтверждение вирусной этиологии кератита яви-
лись такие специфические гистологические изменения как: вакуолизацией
цитоплазмы эпителиоцитов, появлением в ней вирусных частиц, c после-
дующей деструкцией ядерных структур.
Эти альтеративные изменения со-
провождались развитием дезорганизации базальной мембраны и соедини-
тельнотканного слоя роговицы с быстрейшей васкуляризацией и нарастанием
воспалительного инфильтрата из полинуклеарных и мононуклеарных лейко-
цитов.
Морфологическая характеристика герпетического кератита с леченым
интерфероном. В ранние сроки у животных 3 контрольной группы по срав-
нению со 2 контрольной видимых изменений не отмечалось. Покровный
многослойный эпителий оставался на большом протяжении некротизирован-
ным и отторженным от собственного соединительнотканного слоя роговицы.
Со стороны эпителиоцитов сохранялись морфологические изменения, харак-
терные для вирусного поражения. Цитоплазма многослойного эпителия была
вакуолизирована, разрушена, ядра в состоянии кариолизиса и кариопикноза.
На дне и в окружности дефекта отмечалось наличие небольшого слоя воспа-
лительно-некротического детрита. Сохранившиеся части покровного эпите-
лия были утолщены за счет отека и разрыхления клеточных элементов. Не-
обходимо отметить, тот факт, что при герпетическом поражении на вакуоли-
зированном покровном эпителии гистохимически отмечались появления
ШИК положительного вещества (рис. 1).
10
Рис.1. Появление ШИК положи-
тельного вещества в эпителии ро-
говицы, 3-й день. Окраска: ШИК
реакция.
Ув.: ок. 10, об. 40
Рис. 2. Утолщение покровного эпи-
телия с небольшим акантозом,
склерозирование собственного
слоя, 10-й день. Окраска: гематок-
силином и эозином. Ув.: ок. 10, об.
40
На 10 день лечения отмечалась неполная эпителизация поверхности де-
фекта и сохранение некоторых отечных явлений и воспалительных инфильт-
ратов в собственно соединительнотканном слое роговицы. Новообразовав-
шийся покровный эпителий представлен несколькими слоями гиперхромных
эпителиоцитов, поверхностные слои которого были разрыхлены, местами от-
торжены в виде лейкоплакии. В собственном соединительнотканном слое со-
хранялись наличие некоторых воспалительных инфильтратов и васкуляриза-
ция (рис. 2).
Морфологическая характеристика герпетического кератита с лече-
нием бензкетозоном.
У животных основной группы отмечалось уже с 3 дня
существенное улучшение морфологической картины герпетического пора-
жения роговицы. В отличие от предыдущих групп на дне и в окружности
воспалительного очага отмечалось затихание отечно-деструктивных и воспа-
лительных процессов. При этом размеры дефекта значительно уменьшались
за счет быстрейшей эпителизации и ускоренного развития восстановитель-
ной регенерации покровного эпителия по окружности герпетических пора-
жений и репаративной регенерации собственного соединительнотканного
слоя (рис. 3).
К 10ому дню лечения бензкетозоном наблюдалось полное заживление
герпетической язвы и полное восстановление структурных элементов, как
покровного эпителия, так и собственного соединительнотканного слоя рого-
вицы. Со стороны поверхностных слоев покровного многослойного эпителия
роговицы отмечалось некоторое уплотнение и укрупнение эпителиоцитов.
Базальный слой состоял из одного слоя округлой или овальной формы эпите-
11
лиоцитов, которые плотно прилежали к базальной мембране. В ткани склеры
отмечалось уплотнение поверхностного слоя за счет умеренной пролифера-
ции соединительнотканных клеток и появления единичных лимфоидных кле-
ток (рис. 4).
Таким образом, из приведенных данных следует отметить, что лечение
герпетического поражения роговицы 0,5% мазью бензкетозона сопровожда-
ется первоначально затиханием отечно-деструктивных явлений в зоне по-
вреждения, быстрейшим исчезновением воспалительного инфильтрата и ус-
коренным развитием как восстановительной регенерации покровного эпите-
лия, так и репаративной регенерации собственного соединительнотканного
слоя роговицы. Вместе с тем, эти данные свидетельствуют о том, что более
выраженное лечебное действие мази бензкетозона при герпетическом кера-
тите глаза по сравнению с известными средствами подтверждается и на
уровне структурной организации его тканей.
Рис. 3. Нормализация всех слоев
как покровного эпителия, так и
собственного слоя, 3-й день. Окра-
ска: гематоксилином и эозином.
Ув.: ок. 10, об. 40
Рис. 4. Восстановление покровного
многослойного эпителия и собст-
венного соединительнотканного
слоя роговицы, 10-день. Окраска: Г
и Э. Ув: ок. 10, об.40.
Вторая серия. Морфометрическое исследование роговицы при гер-
петическом кератите.
Нами был проведен стереологический анализ ткани
роговицы глаза на гистологических препаратах окрашенных гематоксилином
и эозином в следующих сериях:
1) герпетический кератит без лечения,
2) лечение герпетического кератита интерфероном и тобрамицином.
3) лечение герпетического кератита мазью бензкетозон и тобрамицином.
Выполняли раздельно расчет числа узловых точек, соответствующих:
кератинизации - Ркер,
деструктивным изменениям - Рди,
воспалительной инфильтрации - Рви,
12
тканевым элементам роговицы - Ртэр.
По полученным данным количества точек каждого структурного компо-
нента вычислялась объемная доля исследуемых структурных компонентов:
Vкер; Vди; Vви; Vтэр. Этот показатель представлял собой величину, показы-
вающую, какую долю объема ткани занимает исследуемые структурные ком-
поненты в единице объема ткани.
Следует отметить, что проводимое количественное исследование, вы-
полненное методом «точечного счета» при помощи окулярной сетки Г. Г.
Автандилова (1984) выявило характерную динамику объемных соотношений
кератинизации, деструктивных изменений и воспалительной инфильтрации,
развивающихся в ткани роговицы в динамике развития герпетического кера-
тита, которые включают в себя сложные комбинации механизмов воспали-
тельной реакции, нарушения обменных процессов, перестройки собственных
тканевых элементов роговицы и появление клинико-морфологических при-
знаков данного заболевания. Полученные морфометрические данные, могут
быть использованы в качестве дополнительных, уточняющих критериев для
установления сроков развития деструктивно-воспалительных изменений при
герпетическом кератите и после проведения лечения. Результаты системного
морфометрического анализа позволили выявить морфологические критерии
эффективного воздействия нового препарата бензкетозона. Из наших данных
видно, что при герпетическом кератите без лечения в ткани роговицы объем-
ная доля кератинизации на 3 день эксперимента занимала 5,7%, которая в по-
следующие сроки постепенно увеличивалась и к 10-ому дню составляла
13,4%, что свидетельствует о развитии на поверхностной эпителиальной тка-
ни роговицы процесса некроза и лейкоплакии. В соединительнотканной ос-
нове роговицы выявляются деструктивные изменения в виде отека, мукоид-
ного набухания и фибриноидного некроза, объемная доля которых на 3 день
опыта занимала в среднем 6,9%, к 7-ому дню заболевания поднималась мак-
симума – 19,0%. Вышеуказанные некротически-деструктивные изменения
сопровождались появлением воспалительной инфильтрации, объемная доля
данного процесса в динамике развития герпетического кератита значительно
увеличивались и к 10-ому дню доходила до 15,7%.
При лечении герпетического кератита интерфероном и тобрамицином
объемная доля деструктивно-воспалительных изменений по сравнению с не-
леченой группой в динамике незначительно уменьшалась. Объемная доля ке-
ратинизации по сравнению с предыдущей серией к 10-ому дню заболевания в
среднем уменьшалась на 1,7%, деструктивные изменения – на 2%, воспали-
тельная инфильтрация – на 6%, что показывало немалоэффективности лече-
ния интерфероном.
Морфометрическое исследование деструктивно-воспалительных изме-
нений в ткани роговицы после лечения бензкетозоном и тобрамицином пока-
зали, что с 3 дня эксперимента объемная доля кератинизации (2,60%), дест-
руктивных изменений (4,1%) и воспалительной инфильтрации (2,7%) оказа-
13
лась минимальной. Процесс кератинизации лишь нарастал к 7 дню и в сред-
нем занимал 5,00%, на 10 день опыта уменьшался до минимума – 2,8%. Ди-
намика деструктивных изменений также оказалась аналогичной, на 3 день
показатели составили 4,06%, на 7 день – 8,13% и на 10 день – 4,06%. В отли-
чие от этих деструктивных изменений, объемная доля воспалительной ин-
фильтрации в динамике осталась высокой, но по сравнению с первой серией
опытов значительно уступала и к 10 дню составила в среднем 7,81% (табл. 3).
В главе 4
представлена оценка клинико-функциональных и иммуноло-
гических результатов лечения 60 пациентов с различными формами герпети-
ческих кератитов в зависимости от проведенной терапии.
Оценка степени тяжести в группе с кератитами также проводилась до, в
процессе и после лечения. Индекс тяжести до лечения в контрольной группе
составил 19,4±0,20, в основной – 19,4±0,16 балла.
Показатели исходной остроты зрения у больных в контрольной группе
колебались от 0,08 до 0,7, что свидетельствует о различной степени пораже-
ния роговицы.
Индекс тяжести воспаления на 3-й день в основной группе составил
9,3±0,50 (в контрольной группе балл на 3-й день составлял 15,6±0,30), на 7-й
– 4,0±0,28 балла (в контрольной – 7,1±0,34), к 10-му дню – 0 баллов (в кон-
трольной – 1,5±0,18), а на 14 день у всех больных основной группы и Кон-
трольной группы признаки воспаления отсутствовали (табл. 2).
В основной группе у больных с эпителиальной и древовидной формой
кератита, на следующие сутки от начала лечения уменьшалась интенсив-
ность роговичного синдрома, проявляющейся уменьшением светобоязни,
слезотечения, болей цилиарного характера, больные чувствовали значитель-
ное облегчение (табл. 3). Уменьшение интенсивности перикорнеальной и со-
судистой инъекции глазного яблока при эпителиальном кератите происходи-
ло в среднем на 3-и, а при древовидном кератите – на 4-5-е сутки от начала
лечения. Рассасывание инфильтрата и эпителизация дефекта роговицы при
эпителиальной форме кератита наступали на 2-3-и, при древовидном – на 3-
4-е сутки лечения. С началом эпителизации роговицы также отмечалось вос-
становление ее чувствительности уже на 3-и сутки при эпителиальном и на 4-
е – при древовидном кератите, в контрольной группе исчезновение выше
указанных симптомов происходило медленнее. Так, роговичный синдром ис-
чезал к 4-м, перикорнеальная инъекция – к 7-8 м, эпителизация и восстанов-
ление чувствительности – к 6-7 суткам. Срок лечения больных с эпителиаль-
ным кератитом в основной группе составил 6-7, в контрольной 9-10 койко-
дней. Длительность лечения больных древовидным кератитом в основной
группе составила 8-9 койко-дней, против 10-11 дней группы контроля.
В группах c метагерпетическими формами кератитов течение заболева-
ния в виду более глубокого поражения роговицы затягивалось. Так, в основ-
ной группе больных роговичный синдром уменьшался на 3-4 –е, перикорне-
альная инъекция, рассасывание инфильтрата, эпителизация и восстановление
14
15
чувствительности роговицы наступали на 5-6-е сутки от начала лечения. У
больных же контрольной группы вышеуказанные явления наблюдались на 6-
7-е и 8-9-е сутки, соответственно (табл.5).
Таким образом, данные объективных исследований свидетельствуют о
выраженной противовирусной эффективности бензкетозоновой мази, ис-
пользование которой приводит к снижению индекса тяжести воспаления, а
также к сокращению сроков лечения в 1,5-1,7 раз.
Острота зрения.
В результате проведенного курса лечения также улуч-
шались функциональные параметры глаз, изменения остроты зрения в про-
цессе различных методов лечения при эпителиальном и древовидном керати-
те.
У больных обеих групп с эпителиальной и древовидной формой керати-
та отмечалась положительная динамика остроты зрения. Так, повышение ОЗ
на 0,3-0,4 и > 0,4 у больных с эпителиальным кератитом в основной группе
отмечалось в равных количествах глаз и составило соответственно 55,4%, то-
гда как в контрольной группе этот показатель был равен 27,8%. У больных с
древовидным кератитом в основной группе ОЗ, в основном, повышалась на
0,3-0,4 и составила 34,4%, повышение ОЗ > 0,4 отмечалось в 17,3% случаев,
группе контроля эти показатели составили, соответственно 17,3 и 10,3%.
При метагерпетических кератитах в одном случае отмечалось повыше-
ние остроты зрения > 0,4, отсутствие динамики ОЗ выявлено у одного боль-
ного (20,0%) контрольной группы. Динамика ОЗ в основной группе была по-
ложительной во всех случаях: ОЗ > 0,1 в основной группе больных отмеча-
лось в 61,5%, а в контрольной группе – всего лишь в 30,8% случаев. Повы-
шение ОЗ на 0,1-0,2 в этой группе отмечалось в 4 глазах (50,0%) (в контроль-
ной – в 4 глазах (80,0%)), а максимальное повышение ОЗ на 0,3-0,4 - в 3 гла-
зах (37,5%), тогда как такой динамики остроты зрения в контрольной группе
не наблюдалось.
Результаты исследования цитокинов в слезной жидкости в процессе
лечения
Анализ полученных результатов показал, что в группе больных герпети-
ческим кератитом наблюдается достоверное повышение ФНО-α в слезной
жидкости относительно данных здоровой группы. Так, выявлено, что уро-
вень ФНО-α в группе больных с герпетическим кератитом составил
46,15±6,25, тогда как в группе здоровых данный показатель составил
20,68±3,3. То есть у больных герпетическим кератитом уровень ФНО-α в сле-
зе был повышен в 2,23 раза против аналогичных данных у здоровых людей.
Далее нами проанализированы результаты по изучению концентрации
ИФН – альфа в слезе больных герпетическим кератитом. Следует отметить,
что клиническое течение и исход вирусных заболеваний глаз может быть
обусловлен состоянием интерферонового статуса, который в основном пред-
ставлен интерфероном-альфа и интерфероном-гамма. Нами изучен уровень
16
ИФН – альфа, относящийся к 1 типу интерферонов и являющийся мощным
противовирусным цитокином.
Полученные нами результаты свидетельствуют о том, что уровень ИФН
– альфа в слезной жидкости больных герпетическим кератитом составил
72,43±4,40, тогда как в группе здоровых, данный показатель был равен
45,78±3,2, значит уровень интерферона – альфа был достоверно повышен в
1,6 (Р
<
).
Таким образом, полученные данные выявили, что уровень ФНО–α и
ИФН-α в слезной жидкости повышен в 2,23 и 1,6 раза относительно показа-
телей здоровой группы. Как видно при кератите в слезе выявляются повы-
шенные концентрации провоспалительных цитокинов по сравнению с нор-
мой и свидетельствуют о преимущественной информативности при герпети-
ческом кератите показателей уровня ФНО-α и ИФН-α, как показателей про-
тивовирусной и противовоспалительной защиты организма.
Анализ результатов иммунологических исследования уровня ФНО-α и
ИФН-α в слезной жидкости в процессе 2-х видов лечения выявил:
Так, в группе больных после лечения бензкетозоном ИФН-альфа был
равен 43,4±3,60, в группе больных после лечения интерфероном - 66,8±2,20
против 45,78±3,2 здоровой группы. Как видно, в группе больных с герпети-
ческим кератитом после лечения бензкетозоном уровень ИФН-альфа был по-
давлен в 1,06 раза относительно нормы, когда как в группе больных после
лечения интерфероном лишь в 1,5 раза. При сравнении уровня ИФН-альфа
между группами больных выявлена достоверная разница, так, в группе паци-
ентов с герпетическим кератитом после лечения бензкетозоном уровень
ИФН-альфа в слезной жидкости составил 43,4±3,60, тогда как в группе срав-
нения 66,8±2,20. Как видно в группе больных с герпетическим кератитом по-
сле лечения бензкетозоном, концентрация ИФН-альфа была значительно по-
давлена, причем в 1,54 раза больше, чем в сравнении с данными больных
контрольной группы (табл. 4).
Таблица 4
Сравнительная характерстика некоторых провоспалительных цитоки-
нов в слезе больных с древовидным герпетическим кератитом после
лечения
Исследованные цито-
кины
Основная
группа
Контрольная
группа
Здоровая
группа
ИФН-α
До лечения
72,43±4,40***
72,43±4,40***
45,78±3,2
После лечения
43,4±3,60^
66,8±2,20***
ФНО-α
До лечения
46,15±6,25***
46,15±6,25**
20,68±3,3
После лечения
34,2±1,58***
42,6±1,75***
Примечание: * - различия относительно данных здоровой группы значимы (**
- Р<0,01, *** - P<0,001); ^ - различия относительно данных груп-
пы контроля до лечения значимы (^ - Р<0,05)
17
Исследования показали, что уровень ФНО-альфа в составе слезной жид-
кости на фоне лечения колебался. Как видно, уровень ФНО-альфа в основной
группе значительно снизился в сравнении с данными контрольной группы.
Так, ФНО-альфа после лечения бензкетозоном составил 34,2±1,58, тогда как
после лечения интерфероном - 42,6±1,75. Следовательно, наиболее выражен-
ное подавление провоспалительного цитокина ФНО-альфа было характерно
для группы больных герпетическим кератитом в процессе лечения бензкето-
зоном.
Таким образом, выявлены разнонаправленные изменения в содержании
ИФН-альфа и ФНО-альфа в слезной жидкости до и после различных вариан-
тов лечения, установлено, что в процессе проведенного лечения, уровень
ИФН-альфа и ФНО-альфа снизился в обеих группах пациентов, однако в ос-
новной группе снижение было более значительным. Особенно это касается
уровня ИФН-альфа в слезной жидкости, который в основной группе пациен-
тов после лечения бензкетозоном снизился до нормальных цифр (P<0,001).
Уровень ФНО-альфа в основной группе значительно снизился в сравнении
аналогичным показателем контрольной группы, но все же значений харак-
терных для здоровых лиц не достиг. Таким образом, тест с определением
ФНО-альфа в сравнении с тестом определения ИФН-альфа в слезной жидко-
сти при герпетическом, является более чувствительным и информативным
маркером выздоровления пациентов вирусными заболеваниями глаз.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Результаты исследования позволили сформулировать следующие в
ыво-
ды:
1. На основании морфологических исследований роговой оболочки в
эксперименте, изучена и доказана специфическая противовирусная актив-
ность препарата бензкетозон при герпетическом кератите.
2. Разработанная схема лечения с использованием бензкетозона в каче-
стве противовирусной монотерапии при лечении эпителиального кератита
позволила ускорить процессы восстановления роговицы в отличие от тради-
ционного (Р<0,05).
3. Установлено, что применение бензкетозоновой мази в комплексе с
препаратами группы ацикловир в лечении древовидного и метагерпетическо-
го кератита, усиливает терапевтическую эффективность проводимого лече-
ния в 1,4 раз в сравнении с лечением интерфероном.
4. В отличие от традиционного, предложенное лечение приводит в пря-
мое соответствие показатели клинического выздоровления и уровень цито-
кинов в слезной жидкости, что подтверждает не только противовирусное, но
и дополнительное противовоспалительное действие препарата бензкетозон.
Практические рекомендации
1. В стандарт лечения офтальмогерпеса рекомендовано включить пре-
парат бензкетозон, обладающий не только противовоспалительными, регене-
рирующими свойствами, но также и противовирусными свойствами.
18
2. При поверхностном эпителиальном кератите рекомендовано приме-
нять бензкетозон в качестве противовирусной монотерапии. В случаях дре-
вовидного и метагерпетического кератита дополнительно в лечение включа-
ются препараты группы ацикловир (оксолиновая мазь, завиракс, валтрекс,
вирган), так как совместное применение этих противовирусных препаратов
различного механизма действия, усиливает и потенцирует их влияние на
процесс.
3. Препарат бензкетозон обладает не только противовирусным, но также
дополнительно противовоспалительным и регенерирующим свойствами, в
связи, с чем целесообразно применение препарата в случаях, когда вирусный
этиологический фактор не установлен, и предположительно кератит вызван
воздействием mix инфекции.
4. При выявлении или подозрении на офтальмогерпес, для оценки эф-
фективности терапии дополнительно к общеофтальмологическим методам
диагностики, целесообразно исследовать в слезной жидкости содержание ци-
токинов ФНО-альфа и ИФН-альфа, являющиеся чувствительными к герпес
инфекции.
СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ
1. Нарзикулова К. И., Назирова С. Х., Абдурахманова У. М., Эгамбер-
диева С. М. Оптимизация лечения вирусных заболеваний глаз. // Актуальные
вопросы диагностики и лечения глазных болезней: Матер.межд. конф. ассоц.
офтальмологов тюркоязычных государств. - Алматы, 2006. - С. 86-88.
2. Бахритдинова Ф. А., Джамалова Ш. А., Абдурахманова У. М. Изуче-
ние эффективности нового отечественного офтальмологического препарата
противовоспалительного действия. // // Актуальные вопросы диагностики и
лечения глазных болезней: Матер.межд. конф. ассоц. офтальмол. тюркоязыч-
ных государств. - Алматы, 2006. - С. 345-347.
3. Бахритдинова Ф. А., Азимов А. У., Джамалова Ш. А., Абдурахманова
У. М. Влияние бензкетозоновой мази на некоторые биохимические показате-
ли слезной жидкости больных с воспалительными заболеваниями глаз. //
Инфекция, иммунитет и фармакология. - Ташкент, 2007. - № 2. - С. 91-94.
4. Бахритдинова Ф. А., Джамалова Ш. А., Нарзикулова К. И., Абдурах-
манова У. М. Изучение эффективности нового отечественного препарата
бензкетозон при лечении герпетических кератитов. // Актуальные вопросы в
офтальмологии: Матер. I съезда офтальмол. Азербайджана. - Баку, 2007. -
С.27-29.
5. Абдурахманова У. М. Оценка эффективности новой мази Бензкетозон
при герпетических кератитах в эксперименте. // Проблемы офтальмологии. -
Уфа, 2008. - №2. - С. 31-33.
6. Бахритдинова Ф. А., Нарзикулова К. И., Абдурахманова У. М. Этио-
патогенез, диагностика и современные методы лечения вирусных заболева-
ний глаз // Патология. - Ташкент, 2008. - № 3. - С. 3-7.
19
7. Абдурахманова У. М. Эффективность препарата бензкетозон в ком-
плексном лечении больных с герпетическим кератитом. // Научно-практичес-
кая конференция аспирантов, соискателей и студентов. - Ташкент, 2009. - С.
153-154.
8. Bakhritdinova F., Abdurakhmanova U. The Efficacy of New Native
Preparation Benzketozon in Treatment of Patients with Herpetic Keratitis. // The
8
th
International Symposium on Ocular Pharmacology and Therapeutics, Rome,
Italy. - 2009. - P.129.
9. Бахритдинова Ф. А., Абдурахманова У. М., Эгамбердиева С. М. Им-
мунологические исследования слезной жидкости у больных с герпетическим
кератитом. // Журнал клинической и медицинской медицины. – Ташкент,
2010. - №2. – С. 50-52.
10. Абдурахманова У. М. Иммунологические исследования слезной
жидкости у больных с герпетическим кератитом до и после лечения бензке-
тозоновой мази. // Научно-практическая конференция аспирантов, соискате-
лей и студентов. - Ташкент, 2010. - С. 103.
11. Абдурахманова У. М. Способ комплексного лечения герпетических
кератитов с применением препарата бензкетозон. // Рационализаторское
предложение (свидетельство № 584 от 25.06.2010 г., приказ №584 от
24.09.2010).
20
Тиббиёт фанлари номзоди илмий даражасига талабгор Абдурахманова Уми-
да Мухаммадовнанинг 14.00.08 – кўз касалликлари ихтисослиги бўйича
«Герпетик кератитларни даволашда бензкетозон малхами самарадорли-
гини клинико-экспериментал баҳолаш»
мавзусидаги диссертациясининг
РЕЗЮМЕ
Калит сўзлар:
герпетик кератит, даволаш.
Тадқиқот объектлари:
Герпетик кератитли 60 та бемор (60 куз).
Ишнинг мақсади:
Турли шаклдаги герпетик кератитни даволашда 0,5%
бензкетозон малхамини вирусга карши фаоллигини клиника ва эксперимен-
тда ўрганиш.
Тадқиқот усули:
экспериментал, клиник-функционал, иммунологик.
Олинган натижалар ва уларнинг янгилиги:
эксперимент ва клиника-
да бензкетозон препаратининг специфик вирусга қарши фаоллиги ўрганилди
ва аниқланди.
Бензкетозон препаратни турли фармокологик хусусиятларига асосланиб,
уни клиникада қўлланилишини мақсадга муофиқлиги илмий асосланди.
Интерферон препаратини ва маҳаллий ишлаб чиқарилаган бензкетозон
препаратини турли шаклдаги герпетик кератитлардни даволашда специфик
вирусга қарши фаоллигига илк бор қиёсий баҳолаш ўтказилди.
Амалий аҳамияти
: Кўрув аъзосининг вирусли касалликларини даволаш
амалиётига бензкетозон дори востиаси киритилган даволаш схемаси кири-
тилди. Бензкетозон нафақат вирусга қарши, шунингдек яллиғланишга қарши
ва регенератив хусусиятларга эга. Бензкетозон кўз малҳами шаклида ишлаб
чиқарилган бўлиб интерферондан фарқли офтальмологик амалиётга қўллаш
қулайдир.
Тадбиқ этиш даражаси ва иқтисодий самарадорлиги:
Диссертация
ишининг натижалари ТТА 2- ва 3- клиникалари кўз касалликлари бўлимлари,
ТТЁКК ва РИКММ амалиётида қўлланилган.
Қўлланиш соҳаси:
офтальмология.
21
РЕЗЮМЕ
диссертации
Абдурахмановой Умиды Мухаммадовны
на тему «
Клинико-
экспериментальная оценка эффективности мази бензкетозон при лече-
нии герпетических кератитов
» на соискание ученой степени кандидата ме-
дицинских наук по специальности 14.00.08 – Глазные болезни
Ключевые слова:
герпетический кератит, лечение.
Объект исследования:
60 больных (60 глаз) с герпетическим керати-
том.
Цель работы:
Изучение противовирусной активности глазной 0,5% ма-
зи бензкетозон в лечении различных форм герпетического кератита в клини-
ке и эксперименте.
Методы исследования:
экспериментальные, клтнико-функциональные,
и иммунологические.
Полученные результаты и их новизна:
изучена и выявлена специфи-
ческая противовирусная активность препарата бензкетозон в эксперименте и
клинике.
Научно обоснована целесообразность использования препарата бензке-
тозон в клинике, что обусловлено разнообразием фармакологических свойств
препарата.
Впервые проведено сравнительная оценка специфической противови-
русной активности препаратов интерферон и отечественного препарата бенз-
кетозон при лечении различных форм герпетического кератита.
Практическая значимость:
В практику лечения вирусных заболеваний
внедрена схема лечения с применением препарата бензкетозон. Бензкетозон
обладает не только противовирусным, но также противовоспалительным и
регенерирующими свойствами. Бензкетозон выпускается в форме глазной
мази удобных для применения в офтальмологической практике, в отличии от
интерферона.
Степень внедрения и экономическая эффективность:
результаты ра-
боты внедрены в лечебную практику глазных отделений 2-й и 3-й клиник
ТМА и глазного отделения РСЦМГ, глазного отделения КБСМП и глазного
отделения РОНЦ.
Область применения:
офтальмология.
22
Resume
Thesis of by Abdurakhmanova Umida Mukhamedovna on the scientific de-
gree competition of the doctor of science (philosophy) in eye diseases, specialty
14.00.08-the eye diseases subject “Clinical- experimental estimation of Benz-
ketazone ointment in treatment of herpetic keratitis”.
Key words:
herpetic keratitis, treatment.
Subject of research:
60 patients (60 eyes) with herpetic keratits.
Purpose of work
: to study antiviral activity of 0,5% benzketazone ointment in
treatment of herpetic keratitis in clinic and experiment.
Methods of research:
experimental, clinical-functional and immunological.
The results obtained and their novelty:
It has been studied and determined the
antiviral activity of Benzketazone in experiment and clinic. The experience of
benzketazone using in clinic, to be stipulated by various pharmacological proper-
ties of drug, has been substantiated scientifically. For the first time the comparative
estimation of specific antiviral activity of interferone and native drug Benzketa-
zone in treatment of different forms of herpetic keratitis was made.
Practical value:
the scheme of treatment with using of Benzketazone has been
implemented in the practice of viral diseases treatment. Benzketazone has not only
antiviral but also anti imflammatory and regenerative qualities. Benzketazone is
issued in the form of eye ointment easy-to-use in ophthalmological practice in con-
trast to interferone.
Degree of embed and economic effectivity:
The results of the scientific work
have been involved in medical practice of eye-diseases departments of the 1
st
and
2
nd
clinics of TMA, the eye-diseases departments of Tashkent clinic of emergency,
RSCEM and ROSE.
Field of application:
Ophthalmology
