179
УДК638.144.52-54
ПОЛИАЛКИЛЕНГУАНИДИН-ХЛОРИД КАК КОНСЕРВАНТ ДЛЯ
УГЛЕВОДНЫХ КОРМОВ В ПОДКОРМКЕ ДЛЯ ПЧЕЛ
Климко Татьяна Ивановна
E-mail:
аспирант очной формы обучения, отдел болезней птиц, пчел и физико-
химических исследований РУП «Институт экспериментальной ветеринарии
им. С.Н.Вышелесского»
Зинина Наталья Владимировна
кандидат биологических наук, старший научный сотрудник, отдел болезней
птиц, пчел и физико-химических исследований РУП «Институт
экспериментальной ветеринарии им. С.Н.Вышелесского»
Гуринович Ольга Леонидовна
магистр биологических наук, научный сотрудник, отдел болезней птиц, пчел и
физико-химических исследований РУП «Институт экспериментальной
ветеринарии им. С.Н.Вышелесского»
Минск, Беларусь
Resume:
Carbohydrate feeding for bees is a must in the autumn-winter period.
With long-term presence of liquid feed in the form of sugar syrup, they become sour,
microflora changes, which is not permissible when feeding insects. For long-term
storage of cooked carbohydrate feed, preservatives must be used. This work presents
the results of studying the use of polyalkylene guanidines as a preservative for long-
term storage of carbohydrate feed. Studies have been conducted on the toxicity of this
drug when using it.
Ключевые слова:
полигексаметиленгуанидина гидрохлорид, консервант,
алкилен- и оксиалкиленгуанидиновые антисептики, углеводные корма,
токсичность.
В весенне-летний период используют подкормки с целью заменить
естественный поддерживающий медосбор или вызвать повышенную активность
пчел, или же дать пчелам лекарственные вещества. Подкормка оказывает на
семью пчел двойное воздействие: она улучшает питание пчел и одновременно
возбуждает семью, увеличивает вылеты пчел, особенно полеты пчел-разведчиц,
которые начинают искать источники медосбора. Подкармливать пчел медом
приходится в редких случаях, так как целесообразнее оставлять кормовой мед в
сотах (не откачивать) и при необходимости подставлять медовые соты в гнезда
пчел. Обычно пчел подкармливают сахарным сиропом (3).
При длительном нахождении жидких кормов в виде сахарного сиропа
происходит их закисание, изменение микрофлоры, что является не допустимым
при кормлении насекомых. Для продолжительного хранения приготовленного
углеводного корма были проведены исследования полигексаметиленгуанидин
хлорида (ПГМГ-хлорид). Это новый класс алкилен- и оксиалкиленгуанидиновых
180
антисептиков. ПГМГ-хлорид представляет собой водорастворимые полимеры с
широким спектром биоцидного действия, высокой стабильностью и низкой
токсичностью. Разработаны в институте эколого-технологических проблем
г.Москва. (1)
Гуанидиновые соединения широко распространены в природе и находят
применение в качестве физиологически активных веществ: лекарств,
антисептиков, фунгицидов, пестицидов. Данные соединения обладают высокой
активностью против возбудителей бактериальных, вирусных и грибковых
инфекций. Рекомендуется для борьбы с плесенью. (2)
Целью
данной
работы
являлось
изучение
использования
полиалкиленгуанидиновых
оснований
в
качестве
консерванта
для
продолжительного хранения углеводных кормов, а также определение
токсичности ПГМГ-хлорид для медоносных пчел в лабораторных условиях и
определение класса токсичности ПГМГ-хлорид.
Методы исследования
Для изучения эффективности ПГМГ-хлорида в качестве консерванта
для
углеводных кормов в подкормке для пчел мы провели серию опытов. В качестве
углеводного корма использовали сироп с добавлением различных концентраций
ПГМГ-хлорида: 1%, 0,5% и 0,1%. (по 5 пробирок). Эффективность консерванта
определяли в отношении дрожжей
Saccharomyces cerevisiae
. Подсчет КОЕ
проводили согласно ГОСТ 10444.12-88. В каждую стерильную пробирку с
углеводным кормом, содержащую различные концентрации ПГМГ-хлорида,
вносили суспензию, содержащую штамм
Saccharomyces cerevisiae
, обеспечивая
концентрацию клеток 10
6
КОЕ в 1 мл, и перемешивали. Объем инокулята
составлял 1% от объема образца.
Контаминированные и контрольные образцы с 1%, 0,5% и 0,1%
содержанием препарата выдерживали при различных температурных режимах
(+35
0
С, +20
0
C, +4
0
C) в защищенном от света месте в течение 21 суток. Оценку
органолептических показателей (цвет, запах, консистенция, степень
кристаллизации) проводили через 7, 14 и 21 дней. Сравнительный анализ
проводили между контрольными и опытными (контаминированными дрожжами
Saccharomyces cerevisiae
) пробами. Оценку действия консерванта осуществляли
по шкале баллов: 0 баллов – отсутствие изменений, 1балл – слабо выраженные
изменения, 2 балла – видимые изменения, 3 балла – выпадение осадка. В
процессе хранения проводили измерения pH образцов углеводного корма.
Для проведения перорального исследования токсичности ПГМГ-хлорида
содержались пчелы в энтомологических садках по 10 пчел в каждом на голодной
диете в течение 2 часов перед скармливанием препарата. Всего в опыте
использовано 6 групп пчел по 3 энтомологических садка на каждую дозу
препарата (5 опытных групп и 1 контрольная).
Пчелам опытных групп задавали ПГМГ-хлорид в смеси с сахарным
сиропом в диапазоне от 10 мкг до 100 мкг на особь. Контрольная группа пчел
получала чистый сахарный сироп.
ПГМГ-хлорида в смеси с сахарным сиропом в заданных концентрациях
скармливался в течение 6 часов. После скармливания пчелы всех опытных групп
получали чистый сахарный сироп. Продолжительность наблюдений составляла
48 – 72 часа.
181
Пчелы содержались в лабораторном воздушном термостате при
температуре 25 ± 2 ºС и влажности 50-70%. Оценку осуществляли по выявлению
погибших и «пострадавших» пчел. Пчела записывается как мертвая, когда
остается полностью неподвижной.
Для определения острой контактной токсичности препарата проводили
обездвиживание пчел двуокисью углерода. При этом использовали минимальное
количество СО
2
и минимальную экспозицию, обеспечивающие необходимую
анестезию насекомых. Препарат применяли путем топикального нанесения.
Всего в опыте по определению острой контактной токсичности использовано 6
групп пчел по 3 энтомологических садка (по 10 пчел в каждом) на каждую дозу
препарата 5 опытных групп и 1 контрольная.
Нетоксичными для пчел считаются те вещества, которые в течение 24
часов опыта не приводят к необратимым нарушениям их жизнеспособности при
воздействии дозы более 100 мкг/пчелу.
Статистическая обработка результатов исследований проведена методом
пробит-анализа в программе «Probit Analysis».
Результаты исследования
При изучении эффективности ПГМГ-хлорида в качестве консерванта
для
углеводных кормов в подкормке для пчел, в течение всего периода наблюдений
в опытных и контрольных образцах не было отмечено изменений цвета и запаха.
Изменение консистенции углеводного корма и наличие осадка появились в
некоторых пробах только на 14 сутки. На 21 сутки данные изменения проявились
во всех пробах, кроме 1% при 35
0
С.
Таблица 1 – изменение органолептических показателей углеводного корма
с добавлением ПГМГ-хлорида при хранении
t
хранения
7 сутки
14 сутки
21 сутки
1%
0,5%
К
1%
0,5%
К
1%
0,5%
К
t +35
0
0
0
0
1
1
0
3
3
t + 20
0
0
0
0
0
1
2
3
3
t+4
0
0
0
0
0
2
3
3
3
Таблица № 2
.
Изменение органолептических показателей углеводного корма с
добавлением ПГМГ-хлорида и дрожжей
t
хранени
я
7 сутки
14 сутки
21 сутки
1%+Д 0,5%+Д
К/Д
1%+Д 0,5%+д
К/Д
1%+Д 0,5%+Д
К/Д
t +35
0
0
0
0
1
1
0
3
3
t + 20
0
0
0
0
1
2
3
3
3
t+4
0
0
0
0
2
2
3
3
3
182
Сравнительный анализ результатов показал, что добавление ПГМГ-
хлорида в корм обеспечивает стабильность в течение 14 дней при концентрации
1% во всех образцах и 0,5% в образцах не контаминированных дрожжами. Через
21 день без изменения оставались образцы с 1% содержанием ПГМГ-хлорида.
Кислотность образцов в процессе хранения не изменялась и сохранялась
на уровне 7,87 – 8,38.
Острый пероральный таксономический анализ ПГМГ-хлорида в опытных
группах пчел с дозой в 100 мкг/пчел, показал действие данного основания на
вторые и третьи сутки где гибель составила от 3,3 до 6%, контрольная группа
осталась без изменений.
Острый контактный таксономический анализ ПГМГ-хлорида в опытных
группах пчел с дозой в 100 мкг/пчел, показал действие данного основания на
вторые сутки где гибель составила от 3,3 до 6%, контрольная группа осталась без
изменений.
В соответствии с Руководством ОЭСР (4,5) для пчел, как
представительного тестового вида полезных насекомых, определяют
контактную и оральную токсичность. Значения среднесмертельных доз и
концентраций получены посредством статистических методов анализа рабочих
результатов с корректировкой на смертность пчел в контроле по формуле Аббота
(Abbott, 1925). По острой оральной токсичности ПГМГ-гидрохлорид относится
к 5 классу токсичности – практически не токсичный.
Выводы
Результаты исследования показывают возможность использования ПГМГ-
хлорида в качестве консерванта для пчел, применение в пчеловодстве для
длительного сохранения углеводных кормов. Исследования на токсичность
оральным путем доказывают его малотоксичность.
Планируется дальнейшее изучение полигексаметиленгуанидиновых
оснований как безопасную добавку для длительного хранения углеводного
корма, эффективного и безопасного средства широкого биоцидного действия.
Список использованной литературы:
1. М.М.Наумов, Л.А.Жукова, З.Д.Ихласова и др. Под ред. М.М. Наумова.
Полимерные биоциды-полигуаниды в ветеринарии. Курск: Изд-во Курск. гос.
ак., 2010.-84с.
2. Н.М. Наумов, М.М. Наумов, Г.Ф. Рыжкова, И.А. Брусенцев. Физиолого-
биохимические аспекты профилактического применения микрокапсул
полигуанидина телятам при нарушении пищеварения– Курск: Изд-во Курская
гос. ак., 2019. -212 с.
3. Таранов Г. Ф. Корма и кормление пчел.– 2-е изд., перераб. и доп.–М.:
Россельхозиздат, 1986.– 160 с.
4. OECD Guidelines for the Testing of Chemicals. Guideline 214. Honeybees,
Acute Contact Toxicity Test. OECD, Paris, 1998, 7 p.
5. OECD Guidelines for the Testing of Chemicals. Guideline 213. Honeybees,
Acute Oral Toxicity Test. OECD, Paris, 1998, 8 p.