Ягсп нигера* л, 2011,
% 5.
Самарканд
94
Орипов Ф. С.
МОРФОЛОГИЯ ЭНДОКРИНОЦИТОВ ТОЩЕЙ КИШКИ КРОЛЬЧАТ В
ПЕРИОД РАННЕГО ПОСТНАТАЛЬНОГО ОНТОГЕНЕЗА ПРИ РАЗЛИЧНЫХ
СПОСОБАХ ГИСТОЛОГИЧЕСКОЙ ОБРАБОТКИ МАТЕРИАЛА В НОРМЕ И
В ЭКСПЕРИМЕНТЕ
Кафедра гистологии (зав. - проф. Т.Д. Дехканов), СамМИ (рекгор - проф. А.М. Шамсиев)
Введение.
Одним из продуцентов биогенных
аминов, которые играет важную роль при регуляции
функций
внутренних
органов,
является
эндокриноциты (апудоциты, клетки дисперсной
эндокринной системы). Располагаясь одиночно в
составе эпителия этих органов, они вырабатывают
биогенные амины и пептидные гормоны, которые
участвуют в паракринной и эндокринной регуляции
функций
(7,8),
а
также
в
межорганных
взаимодействиях
различных
отделов
пищеварительного тракта, как в норме, так и при
экспериментальных
воздействиях
(1,2,3,6).
Изменения этих клеток при различной патологии
кишечника и других органов привлекают внимание
исследователей последнего десятилетия (4,5), так как
функциональная активность этих клеток неразрывно
связана с деятельностью органа, в стенке которого
они локализованы. С этой точки зрения изучение
морфологии апудоцитов тощей кишки крольчат в
раннем постнатальном периоде в норме и при
воздействии пестицидов на организм крольчихи в
период беременности является актуальным.
Цель исследования:
изучить морфологию
эндокриноцитов тощей кишки крольчат в разные
периоды
раннего
постнатального
онтогенеза
родившихся от здоровых и отравленных в период
беременности пестицидом крольчих при различной
гистологической обработке материала
Материал и методы.
Изучена тощая кишка у 9
контрольных крольчат родившихся от практически
здоровых крольчих и 12 крольчат родившихся от
крольчих отравленных пестицидом во время
беременности.
Экспериментальное
отравление
крольчих проводили путём введения водной
эмульсии пестицида зондом в желудок. Контрольные
и экспериментальные животные находились в
одинаковых условиях. Животные умерщвлены под
наркозом путём перерезки бедренной артерии.
Материал для исследования брали сразу после забоя
животного и фиксировали в 12% нейтральном фор-
малине. Формалин нейтрализовали насыщенным
раствором гетраборнокислого натрия. Материал
брали из начального, среднего и концевого отделов
тощей кишки. Для анализа типологической
принадлежности клеток открытого и закрытого типов
при различных способах фиксации часть органа
фиксировали в натянутом на пенопласт состоянии, а
другую часть оставляли не растянутой. Из этих мате-
риалов срезы разной толщины. Обработка материала
и заливка в парафин проведена по общепринятой
методике. Парафиновые срезы, для выявления
эндокриноцитов обработаны по методу Гримелиуса.
Криостатные срезы из фиксированного в формалине
материала,
им-
прегнированы
азотнокислым
серебром по Бильшовскому - Гроссу. Для
люминесцентногистохимического
изучения
использованы
криостатные
срезы
из
нефиксированного материала. Они обработаны
раствором глиоксиловой кислоты. Препараты
изучались под люминесцентным микроскопом
ЛЮМАМ-И2 с использованием фильтров ФС 1-4 и
ФС 1-6. Плотность расположения эндокриноцитов
определяли точечным методом, используя окулярную
сетку с 256 узловыми точками. Полученный
цифровой материал обработан общепринятыми
методами вариационной статистики.
Результаты:
в составе эпителия слизистой
оболочки в стенке тощей кишки крольчат
контрольной группы
обнаружены все типы
апудоцитов: эндокринные клетки открытого и
закрытого типов, и эндокринные клетки, содержащие
флюорогенные
амины.
Морфология
и
морфометрические показатели этих эндокриноцитов
зависят от того, в какой фазе секреторного цикла они
попали в препарат, то есть от количества локализации
импрегнируе- мого секреторного материала в
цитоплазме. Если цитоплазма заполнена секреторным
материалом, то эндокринная клетка видна “во весь
рост". Если клетка попала в препарат после полной
дегрануляции, то ее силуэты еле заметны.
Эндокриноциты открытого типа сравнительно
больше располагаются в ворсинках кишечника (70-
80%). В составе эпителия крипт больше эндокринных
клеток закрытого типа (60-65%). Преимущественная
форма клеток открытого типа на препарате конусо-
видная. При этом, они почти всегда на своем
апикальном конце образуют утолщение в виде конца
барабанной палочки. Это образование нередко
выступает на поверхности эпителия. На один
поперечный срез крипты и ворсинка приходится от 1-
2 до 3-5 эндокриноцитов.
вестник врача, 2011, '№ 3, Самарканд
95
По нашему мнению, об их истинном размере и
форме эндокриноцитов можно судить, изучая те
клетки, цитоплазма которых заполнена секретом и на
препарате четко видны ядра. Клетки, попавшие на
препарат после дегрануляции или содержащие в
цитоплазме небольшое количество секреторного
материала, еле заметны.
Часто на препаратах видны только те участки
цитоплазмы
клеток,
которые
содержат
аргирофильный
импрегнируемый
или
флюо-
ресцирующий материал, а остальные участки почти
не заметны. Нередко на препарате виден фрагмент
эндокринной клетки срезанный ножом микротома
(рис.1). Изучая такие клетки, можно ошибочно судить
об их форме и типологической принадлежности.
Наши полученные данные при сравнительном
изучении
препаратов,
приготовленных
из
фиксированного в натянутом состоянии материала и
без натягивания, свидетельствуют о том, что на
препаратах, приготовленных из фиксированного в
натянутом состоянии материала, доля клеток откры-
того типа значительно больше по сравнению с
препаратами этого же органа животного, который
фиксировали в ненатянутом состоянии. Такие же
данные получены при изучении соотношения
эндокринных клеток открытого и закрытого типов в
срезах разной толщины. В тонких срезах,
импрегнированных по Гримелиусу, доля клеток
открытого типа значительно меньше, чем в толстых
срезах этого же органа, импрегнированных по
Бильшовскому - Гроссу. Все это свидетельствует о
том, что при анализе с помощью светооптических
микроскопов иногда фрагменты эндокринных клеток
открытого типа можно воспринимать как клеток
закрытого типа.
Изучение морфологии эндокринных клеток
тощей кишки крольчат, родившихся от крольчих,
отравленных во время беременности, показало, что у
них плотность расположения эндокриноцитов как в
ворсинках, так и в криптах кишки значительно
меньше по сравнению с показателями контрольных
крольчат. У них также сравнительно меньше
эндокриноциты содержащих флюорогенные амины.
Измерение размеров эндокриноцитов контрольных и
экспериментальных крольчат показало, что между
контольными и экспериментальными крольчатами
достоверной разницы нет. В толстых срезах всех
отделов тощей кишки крольчат достоверно возрастает
доля клеток открытого типа. Среднее количество
эндокриноцитов открытого и закрытого типов при
различной толщине срезов у контрольных и экс-
периментальных крольчат показано в таблице № 1.
Сравнение среднего количества эндокринных
клеток на единицу площади показало, что во всех
отделах тощей кишки количество эндокринных
клеток значительно различается, их сравнительно
больше в начальном и конечном отделах тощей кишки
по сравнению со средним. Как показано на таблице 1
количество эндокриноцитов открытого типов сравни-
тельно больше при изучении толстых импрег-
нированных препаратов и при блоке экструзии их
секреторного материала.
Рис. 1. А. Эндокриноциты открытого типа в толстом срезе (А) и эндокриноцит открытого
типа и фрагмент эндокриноцита в тонком срезе стенки тощей кишки крольчат 30 суточного
возраста. А. Импрегнация по Бильшовскому-Гросс, Б. Импрегнация по Гримелиусу, об. 20,
ок.10.
<Вестнш(врача, 2011, № 3, Самарканд
96
Таблица № 1
Количество эндокринных клеток открытого и закрытого типов на относительно тонких и
толстых гистологических препаратах у контрольных животных (кролики, 30 суток) и их изме-
нение при экспериментальном отравлении
Контрольные животные
Экспериментальные животные
Тонкий срез
Толстый срез
Тонкий срез
Толстый срез
Открытый Закрытый
Открытый Закрытый
Открытый Закрытый
Открытый Закрытый
тип
тип
тип
тип
тип
тип
тип
тип
4,2±0,2
6±0,4
6,8±0,3
3,6±0,2
3,1 ±0,3
5,2±0,4
5,7±0,4
4,0±0,3
Обсуждение полученных данных.
Эн-
докринные клетки стенки тощей кишки крольчат
обладают
структурным
и
типологическим
полиморфизмом
в
зависимости
от
способа
гистологической обработки материала. При фиксации
материала в натянутом состоянии они значительно
выпрямляются (становятся перпендикулярными по
отношение к продольной оси крипт) и попадают на
послойные
срезы
органа
полностью.
Экспериментальное отравление вызывает блок
экструзии эндокрино- цитов и почти все клетки видны
"во весь рост”. При этом доля клеток открытого типа
значительно возрастает. Такое же явление на-
блюдается и при изучении этих клеток на срезах
разной толщины. В более толстых срезах доля
эндокринных клеток открытого типа значительно
оольше, чем при тонких срезах. Именно с этим, по
нашему' мнению, связаны разноречивые данные в
отношении
количественного
соотношения
эндокриноцитов открытого и закрытого типов в
составе стенки различных частей пищеварительной
трубки.
Следовательно,
соотношение
клеток
открытого и закрытого типов в какой-то мере зависит
от толщины срезов, способов фиксации и гисто-
логической обработки материала. Это необходимо
учитывать
при
оценке
типологической
принадлежности
эндокриноцитов
и
приспосо-
бительных изменений при различных функ-
циональных состояниях органа а также при оценке
результатов экспериментальных исследований.
Литература
1.
Драй Р.В. Изменение эндокринного аппарата эпителия ободочной кишки крысы при воздействии высо-
коинтенсивного импульсного магнитного поля// Морфология 2008, Том. 136, № 4, стр. 52-53.
2.
Қостюкевич С.В. Эндокриноциты эпителия слизистой оболочки толстой кишки свиньи //Морфология 2003,
Том 123, № 1, стр.59-64.
3.
Костюкевич С.В. Гистотопография и плотность расположения эндокринных клеток эпителия слизистой
оболочки толстой кишки плода человека. // Морфология 2004, Том 126, № 5 стр. 52-55.
4.
Осадчук О.М., Осадчук М.А., Кветной И.М., Ивашкин В.Т. Клеточное обновление эпителиоцитов и диф-
фузная эндокринная система кишечника при синдроме раздраженного кишечника: клинико-эндоскопическое и
иммуноморфологическое исследование. //Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии и колопроктоло- гии.
2003, № 6, стр. 44-49.
5.
Осадчук М.А., Кулиджанов А.Ю. Мелатонинпродуцирующие и NO-синтазоположительные клетки желудка
и процессы клеточного обновления при язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки. // Клиническая
медицина 2005, № 9, стр.34-37.
6.
Пузырев А.А., Иванова В.Ф. Эндокринная гастроэнтеропанкреатическая система позвоночных животных и
человека. Фундаментальные и прикладные аспекты. / Вопросы морфологии XXI века. Санкт-Петербург, 2008, стр.
254-258.
7.
Facer Р., Bishop А.Е., Cole G.A. et all. Developmental profile of chromogranin, hormonal peptides, and 5-
hydroxytriptamine in gastrointestinal endocrine cells. Gastroenterology. 1989, V. 97, P. 46-57.
8.
Pearse A.G.E. The diffuse neuroendocrine system: peptides, amines, placates the APUD theory // J. Prog. Brain. Res.
1986, Vol 68, P. 25-31.
