Биология ва тиббиёт муаммолари 2017, №4 (97) 7
КЛИНИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
УДК: 616.36-002:616.9-575.91-(575,1)
МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЕ МАРКЕРЫ И ОСОБЕННОСТИ ТЕЧЕНИЯ
ХРОНИЧЕСКОЙ HCV-ИНФЕКЦИИ В УЗБЕКИСТАНЕ
С.Б. АЗИМОВА
НИИ Гематологии и Переливания крови, Республика Узбекистан, г. Ташкент
ЎЗБЕКИСТОНДА СРУНКАЛИ HCV-ИНФЕКЦИЯСИНИНГ МОЛЕКУЛЯР-ГЕНЕТИК
МАРКЕРЛАРИ ВА КЛИНИК КЕЧИШИНИНГ ЎЗИГА ХОС ХУСУСИЯТЛАРИ
С.Б. АЗИМОВА
Гематология ва Қон қуйиш илмий текшириш институти, Ўзбекистон Республикаси, Тошкент
MOLECULAR-GENETIC MARKERS AND FEATURES OF THE COURSE OF CHRONIC HCV
INFECTION IN UZBEKISTAN
S.B. AZIMOVA
Research Institute of Hematology and Blood Transfusion, Republic of Uzbekistan, Tashkent
Сурункали гепатит С ва жигар циррози бўлган беморларда TNF-α ва CTLA-4 генларининг
генотипик турларини қиёсий таҳлил қилиш ва уларнинг касаллик кечишига таъсирини ўрганиш
тадқиқотнинг мақсади бўлди. TNF-α гени генотипларининг касаллик кечишига таъсирини ўрганиш
мақсадида ўтказилган таҳлил шуни кўрсатдики, G/A+A/A генотипларини биргаликда ташувчиларда
сурункали вирусли гепатит С ривожланиш хавфи юқори бўлади, яъни ўрта ва юқори фаолликда кечиши
мумкин. Олинган маълумотлар қўйидагиларни кўрсатади, «G» аллель ташувчиларда ва CTLA-4
генларининг А49G полиморфизми А/G+G/G генотиплари қўшма бўлганда сурункали вирусли гепатит С
ривожланиш хавфи нафақат камаяди, балки яллиғланиш интенсивлиги камайиб жигарда бириктирувчи
тўқима ўсиши камаяди касаллик кечиши яхшиланади.
Калит сўзлар:
гепатит С, ген полиморфизми.
The aim of the study was a comparative analysis of the genotypic variants of the TNF-α and CTLA-4
genes in patients with chronic hepatitis C and liver cirrhosis and their effect on the course of the disease. The
analysis of the influence of the genotypes of the TNF-α gene on the course of the disease indicates an increased
risk of CVD with both moderate and highly active course of the disease in carriers of the combination of geno-
types G / A + A / A. The obtained data allow us to conclude that the carriage of the allele "G" and the combina-
tion of the A / G + G / G genotypes of the -49GG polymorph of the CTLA-4 gene are associated not only with a
decrease in the risk of development of HCVF, but also with a lower intensity of inflammation and fibrosis in the
liver and a high probability favorable course of the disease.
Key words:
hepatitis C, gene polymorphism
Актуальность.
Проблема вирусных гепати-
тов сохраняет актуальность уже на протяжении
многих десятилетий. Со временем хронический
вирусный гепатит (ХВГС) может стать инвалиди-
зирующим заболеванием, которое длительно про-
грессирует и имеет социальные последствия с
развитием преждевременной нетрудоспособности
[3, 4]. Проблема распространения и лечения хро-
нического вирусного гепатита С продолжает
оставаться одной из значимых проблем внутрен-
ней медицины. Именно HCV-инфекция является
основной причиной формирования всей группы
хронических болезней печени - хронического ге-
патита, цирроза, гепатокарциномы [1, 2]. При
этом изучение данного вопроса носит не только
медицинский, но и социально-экономический ха-
рактер. Считают, что хронический гепатит С все-
гда потенциально опасен, однако патогенез дан-
ного заболевания до конца не выяснен. Для этого
потребуются поиск новых подходов и проведение
новых фундаментальных исследований.
Целью исследования
явилось сравнитель-
ный анализ генотипических вариантов генов
TNF-α и CTLA-4 у больных с хроническим гепа-
титом С и циррозом печени и их влияние на тече-
ние заболевания.
Материал и методы.
В основную группу
исследования вошли 107 больных с ХВГС, по-
лучавшие лечение в НИИ Вирусологии МЗ РУз.
Для оценки ассоциации полиморфных маркеров
генов TNF-
и CTLA-4 больных с ХВГС раздели-
ли на три подгруппы. К первой подгруппе отнесе-
ны больные с умеренной степенью активности
ХГС (n=33). Вторую подгруппу составили боль-
ные с высокой степенью активности ХГС (n=37).
В третью подгруппу вошли больные с циррозом
печени (n=37). Критериями для включения в ис-
следование служили клинико-биохимическая и
Молекулярно-генетические маркеры и особенности течения хронической HCV-инфекции в …
8 2017, №4 (97) Проблемы биологии и медицины
инструментальная верификация диагноза с
определением и стадии и тяжести заболевания, а
также выявление РНК вируса гепатита С тест-
системой AmpliSens
®
HCV-FRT выявленная c
помощью полимеразной цепной реакции
(ПЦР) на приборе RotorGene 6000.
В качестве группы сравнения использовался
популяционный контроль, который был представ-
лен образцами ДНК (n=81) условно-здоровых до-
норов (без ХГС) из банка ДНК НИИ гематологии
и переливания крови МЗ РУз.
Материалом
для
молекулярно-
генетического исследования служила перифери-
ческая кровь обследуемых лиц. Выделение ДНК
проводили по стандартной методике с некоторы-
ми модификациями и с использованием реактивов
компании «Интерлабсервис» (Россия). Идентифи-
кация аллелей полиморфизма генов проводилась с
использованием полимеразной цепной реакции.
Результаты исследований и обсуждение.
При сравнительном анализе генотипических вари-
антов маркера TNF-α – G308A, выявлено накоп-
ление А/G и А/А генотипов в группе больных с
ХВГС и зарегистрированы различия в распреде-
лении этих генотипов между больными и инди-
видуумами контрольной группы. Суммарная ча-
стота генотипов G/A+A/A в основной и контроль-
ной группах составила 24,3% и 9,9%, соответ-
ственно. Вычисленный суммарный вклад этих
генотипов в развитие ХВГС оказался высокодо-
стоверным, при этом отношение шансов состави-
ло OR=3.0 (Х
2
=6.4; Р=0.01; OR=3.0; 95%CI 1.248-
6.875), что свидетельствует о 3-х кратном увели-
чении риска развития ХВГС у носителей данного
сочетания генотипов.
Также значимые различия по суммарной
частоте генотипов, содержащих мутантный ал-
лель «А», были обнаружены между контрольной
группой (9,9%) и пациентами I и II подгрупп
(30,3% и 25,3%, соответственно). При этом риск
развития ХВГС в умеренно активной форме у но-
сителей этих генотипов оказался в 4 раза выше
(Х
2
=7.3; Р=0.007; OR=4.0; 95%CI 1.401-11.24), а
высокоактивного ХВГС – в 3 раза выше (Х
2
=4.3;
Р=0.04; OR=3.0; 95%CI 1.029-8.358) по сравне-
нию с представителями общепопуляционной вы-
борки, не содержащих данного сочетания геноти-
пов. Суммарная доля генотипов G/A+A/A в под-
группе больных с циррозом печени также оказа-
лась выше, чем в контрольной выборке (18,9%
против 9,9%, соответственно). Однако, несмотря
на то, что значение соотношения шансов, отра-
жающее степень риска развития цирроза при дан-
ном генотипе, оказалось выше единицы (OR=2.1),
такое различие не достигло уровня статистиче-
ской значимости (Х
2
=1.9; Р=0.2; OR=2.1; 95%CI
0.7089-6.395).
Полученные нами данные свидетельствуют
о повышенном риске развития ХВГС как с уме-
ренным, так и с высокоактивным течением забо-
левания у носителей сочетания генотипов
G/A+A/A, однако они не подтверждают связи
между носительством данного сочетания геноти-
пов и развитием ХВГС с исходом в цирроз. Для
оценки влияния генотипов G/A+A/A на тяжесть
течения ХВГС и развитие неблагоприятного ис-
хода, нами также было проведено сравнение ча-
стоты данного сочетания между различными под-
группами. При этом оказалось, что частота соче-
тания генотипов G/A+A/A линейно снижается по
мере увеличения активности патологического
процесса в печени и развития цирроза, однако
разница показателя между исследуемыми под-
группами оказалась недостоверной (p>0,05).
Наиболее вероятной причиной наблюдаемого фе-
номена является то, что, как упоминалось выше, в
результате экспрессии гена TNF-α с такими гено-
типами будет вырабатываться меньшее количе-
ство фактора некроза опухолей с нормальной ак-
тивностью, и, следовательно, будет ослаблено его
влияние, как активатора процесса фиброгенеза.
Подтверждением этому явился и тот факт, что в
подгруппе больных с умеренной степенью актив-
ности ХВГС было выявлено значительное преоб-
ладание гомозиготного генотипа A/A (12.1% про-
тив 2.5%) по сравнению с группой контроля. У
подгрупп пациентов с высокоактивным ХВГС и
циррозом печени разница частоты встречаемости
генотипа А/А с таковой в здоровой популяции
была статистически незначима (р>0.05).
В ходе исследования также исследовали
суммарную частоту генотипов гена CTLA-4, со-
держащих мутантный аллель (А/G+G/G) для бо-
лее полного представления роли данного аллеля.
Было показано, что в основной и контрольной
группах суммарная частота А/G+G/G составила
74,8% и 67,9%, соответственно. Однако даже
суммарный вклад генотипов, несущих мутантный
аллель «G», в развитие ХВГС оказался недосто-
верным (Х
2
=1.1; Р=0.3; OR=1.4; 95%CI 0.7396-
2.653), что свидетельствует об отсутствии увели-
чения риска развития ХВГС у носителей данного
сочетания генотипов.
Различия по суммарной частоте генотипов,
содержащих мутантный аллель «G», также оказа-
лись недостоверными между контрольной груп-
пой (67,9%) и пациентами II и III подгрупп (70,3%
и 67,6%, соответственно). И только у пациентов с
умеренно активным ХВГС разница данного пока-
зателя с контролем (87,8% против 67,9%) оказа-
лась статистически значимой. Следует отметить,
что достоверная разница суммарной частоты ге-
нотипов, содержащих мутантный аллель, отмеча-
лась и между больными с умеренно активным
ХВГС и больными с циррозом печени. Данный
С.Б. Азимова
Биология ва тиббиёт муаммолари 2017, №4 (97) 9
факт является еще одним подтверждением связи
накопления мутантного аллеля «G» полиморфиз-
ма –А49G гена CTLA-4 с низкой активностью
воспалительного процесса и фиброзообразования
в печени.
Вывод.
Проведенный анализ влияния гено-
типов гена TNF-α на течение заболевания свиде-
тельствует о повышенном риске развития ХВГС
как с умеренным, так и с высокоактивным тече-
нием заболевания у носителей сочетания геноти-
пов G/A+A/A. Полученные данные позволяют
заключить, что носительство аллеля «G» и соче-
тание генотипов А/G+G/G полиморфизма –А49G
гена CTLA-4 ассоциируются не только с умень-
шением риска развития ХВГС, но также с мень-
шей интенсивностью воспаления и фиброобразо-
вания в печени и высокой вероятностью благо-
приятного течения заболевания.
Литература:
1.
Онищенко Г.Г., Шахильдян И.В., Михайлов
М.И. Вирусные гепатиты в России // Мир вирус-
ных гепатитов. - 2003. - №7. - С. 9-11.
2.
Павлов Ч.С., Бакулин И.Г. Вирус гепатита В –
основной этиологический фактор хронического
гепатита, цирроза печени и гепатоцеллюлярной
// РМЖ. – 2007. - №4. - С. 32.
3.
Ивашкин В.Т., Павлов Ч.С. Фиброз печени. -
М: ГЭОТАР-Медиа, 2011. - 168 с.
4.
Лучшев В.И., Санин Б.И., Жаров С.М. Вирус-
ный гепатит С – глобальная проблема нашего
времени // Российский медицинский журнал. –
2004. - №3. – С. 40-45.
МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЕ
МАРКЕРЫ И ОСОБЕННОСТИ ТЕЧЕНИЯ
ХРОНИЧЕСКОЙ HCV-ИНФЕКЦИИ В
УЗБЕКИСТАНЕ
С.Б. АЗИМОВА
НИИ Гематологии и Переливания крови,
Республика Узбекистан, г. Ташкент
Целью исследования явилось сравнитель-
ный анализ генотипических вариантов генов
TNF-α и CTLA-4 у больных с хроническим гепа-
титом С и циррозом печени и их влияние на тече-
ние заболевания. Проведенный анализ влияния
генотипов гена TNF-α на течение заболевания
свидетельствует о повышенном риске развития
ХВГС как с умеренным, так и с высокоактивным
течением заболевания у носителей сочетания ге-
нотипов G/A+A/A. Полученные данные позволя-
ют заключить, что носительство аллеля «G» и со-
четание генотипов А/G+G/G полиморфизма –
А49G гена CTLA-4 ассоциируются не только с
уменьшением риска развития ХВГС, но также с
меньшей интенсивностью воспаления и фиброоб-
разования в печени и высокой вероятностью бла-
гоприятного течения заболевания.
Ключевые слова:
гепатит С, полиморфизм
генов.
