Scientific research results in pandemic conditions (COVID-19)
256
Nodira Rakhmatova, junior Researcher, Doctor of Philosophy on biology
Center of Genomics and Bioinformatics the Academy of Sciences Republic
of Uzbekistan, Republic of Uzbekistan, Tashkent.
Azadakhan Imamkhodjaeva, senior Researcher, Candidate of Biological
Sciences Center of Genomics and Bioinformatics the Academy of Sciences
Republic of Uzbekistan, Republic of Uzbekistan, Tashkent.
Khurshida Ubaydullaeva, senior Researcher, Doctor of Biological Sciences
Center of Genomics and Bioinformatics the Academy of Sciences Republic
of Uzbekistan, Republic of Uzbekistan, Tashkent
Mukhtor Darmanov,senior Researcher, Doctor of Philosophy on biology
Center of Genomics and Bioinformatics the Academy of Sciences Republic
of Uzbekistan, Republic of Uzbekistan, Tashkent
Sardor Narmatov, loborant, Center of Genomics and Bioinformatics the
Academy of Sciences Republic of Uzbekistan, Republic of Uzbekistan,
Tashkent.
LAUROCERASUS OFFICINALIS'S IN VITRO MICROCLONAL REPRODUCTION
N. Rakhmatova, A. Imamkhodjaeva, Kh. Ubaydullaeva, M. Darmanov,
S. Narmatov
Abstract: A well-developed in vitro method of apical meristem often
shoots in artificial microclonal propagation medium is used. Significant
prospects for faster and healthier propagation of valuable ornamental
plants and the production of high-quality planting material are opened by
the in vitro method of microclonal propagation, which can reduce the time
required for growing standard seedlings by 2-3 years depending on the type
of plant.
Keywords: Laurocerasus officinalis, in vitro, reproduction, apical,
meristem.
Laurocerasus officinalis вечнозеленое дерево благодаря своим
декоративным и почвоукрепляющим свойствам культивируется в
странах Центральной Азии. Её высаживают в парках, аллеях, скверах, в
огородах как живую изгородь. Богатый химический состав клеток
способствовало широкому применению этого растение в современной
народной медицине Листья лавровишни содержат эфирное масло (до
0,5 %), в состав которого входят бензальдегид (82.08 %), 2-гексенал
(0.63 %), бензойная кислота (1.12 %), манделонитрил (15.40 %), а
также метил эстер гексадеканоической кислоты, октан, n-хенеикосан
– [1]. Кроме этого в листьях определяются тритерпеноиды, урсоловая
кислота, принизан, амигдалин, прулаузин, фенолкарбоновые кислоты,
стероиды, стигмастерин, холестерин, дубильные вещества, катехины,
флавоноиды, протоантоцианы, витамин С, фитонциды хлорогеновая
Scientific research results in pandemic conditions (COVID-19)
257
кислота, Oкумарическая кислота, кверцетин 3-глюкозид, лютеолин 7-
глюкозид, апигенин 7-глюкозид, кемпферол 3-глюкозид, нарингенин,
ванильная, кофейная кислоты, рутин – [2]. Даже в стареющих листьях
лавровишни имеются производные бензойной кислоты пруназина
ацид -6'-бензоат, пруназин амид, глюкоза-1-бензоат. А семена плодов
лавровишни содержат не высыхающее масло – [3], в состав которого
входят
олеическая
кислота
(62.42-64.18%),
линоленовая
и
пальмитиновые кислоты. В литературе есть данные, что лавровишня
содержит соли K, Ca, Fe, Mn, Zn, Ba, Sn, концентрирует соли Zn, Ba, Sn –
[4]. В современной народной медицине лавровишневая вода и масло
применяются наряду с горьким настоем листьев лавровишни как
противоопухолевое средство при раке легких, как сердечное,
седативное и противосудорожное средство. Растение очень особенно
популярно в современной народной медицине, так как выделяет
большое количество фитонцидов, которые оказались губительными
для многих насекомых, особенно для комнатной мухи, лесных клещей
и даже грызунов. Фитонциды молодых листьев токсичны и для
бактерий, для дизентерийной палочки. Даже маленькая палочка
лавровишни отпугивает насекомых [5].
Таким образом, этот вид обладает бактерицидными свойствами,
очищая окружающую среду от микробов, бактерий и улучшает
микроклимат, и таким образом обладает высокими санитарно-
гигиеническими
свойствами.
Растения,
обладающие
такими
разнообразными характеристиками, не только должны украшать
наши города и селения, но в качестве естественных защитных
биологических
средств
должны
быть
рекомендованы
для
высаживания
в
качестве
средств
борьбы
с
вредителями
сельскохозяйственных
культур.
Для
этой
цели
возникает
необходимость ускоренного размножения данной культуры и
разработки наиболее эффективных методов их размножения.
Один из таких методов - метод размножения апикального
меристемой (
in vitro), то есть микроклональное размножение.
Значительные перспективы для более быстрого и здорового
размножения ценных декоративных растений и производства
высококачественного посадочного материала открывает метод
микроклонального размножения
in vitro, который позволяет
сократить сроки выращивания стандартных саженцев на 2-3 года в
зависимости от вида растений.
На процессы регенерации и размножения
in vitro для получения
растений методом микроклональное размножение влияет ряд
факторов.
1. Генотип родительского растения и их состояние;
Scientific research results in pandemic conditions (COVID-19)
258
2. Состояние имплантата;
3. Особенности введения имплантата в стерильную культуру;
4. Условия выращивания
Микроклональное размножение в культуре тканей и клеток,
имеет ряд преимуществ по сравнению с традиционным методом
вегетативного размножения растений. Это высокий коэффициент
размножения, сокращение времени посадки, ускорение процесса
селекции, уничтожение патогенных микроорганизмов и, возможно,
вирусов, однородность полученных растений, сохранение парниковых
площадей местных растений круглогодичное выращивание растений,
и, наконец, особенно важно, что растения, которые трудно размножать
простым способом, можно размножать растений практически таким
образом. В настоящее время одним из наиболее эффективных
способов получения здоровых саженцев лекарственных видов
является их выращивание в особых лабораторных условиях (
in vitro).
Опыты по микроклональное размножение растений
in vitro,
проводили по методикам [7, 8, 9, 10]. Нами использован
оптимизированный метод выращивания эксплантатов в жидких и
твердых средах, состоящих из питательных веществ (среда Мурасига
и Скуга, Фоссарда, Муллена и Энига). Основными этапами
микроклональное размножение были следующие действия:
1. Промывка черенков, из которых будет произведено
размножение, 1,5-2 часа в проточной воде.
2. Промывка в нейтральном моющем растворе - 30-40 минут.
3. Затем промывка в дистиллированной воде - 30-40 минут.
4. Стерилизация в 0,01% растворе тимеросала.
5. Стерилизация материала в ламинарном боксе в 30% растворе
этилового спирта - 2-5 минут.
6. Промывка в стерильной воде в условиях ламинарного бокса - 5-
10 минут. Получение ткани, расположенной в верхней апикальной
части побега
L. officinalis., размещение её на питательную среду.
Регенеративная особенность меристемы почки определялась
появлением в них каллуса и апикальных корней через 15-20 дней
после пересадки эксплантата в питательную среду. Сохранность
меристем (через 5-10 дней после пересадки в культуральную среду)
определялось отсутствием признаков эксплантата в них. Степень
развития имплантатов визуально определяли по морфологическому
ризогенезу
в
каждом
отдельном
пассаже
(медленный,
удовлетворительный, хороший).
Scientific research results in pandemic conditions (COVID-19)
259
Рисунок.
Laurocerasus officinalis 4-месячный состояние в условиях
in vitro
На регенеративные свойства эксплантаты сильно влияют такие
факторы, как возраст материнского растения и длина растущей почки.
В нашем исследовании было установлено, что верхние (первые,
вторые
и
третьи)
почки,
расположенные
ниже
верхушки
полуодревесневших побегов, независимо от возраста материнского
растения, обладают высокой регенеративной способностью при
микроклональном размножении. В почках, расположенных в нижней
части побегов, эта особенность намного слабее. Однако, самая высокая
укореняемость наблюдался у молодых растений.
Растения
in vitro перспективны, они не только защищены от
болезней, но и могут долгое время храниться при температуре чуть
выше нуля. При низких температурах культуры растут настолько
медленно, что интервал между пересадками увеличивается от 6
месяцев до нескольких лет.
Списко литературы:
1.
КАРОМАТОВ
И.Д.
ЛАВРОВИШНЯ
ЛЕКАРСТВЕННАЯ
//Электронный научный журнал «Биология и интегративная
медицина» 2017 №1 (январь).
2. Halilova H., Ercisli S. Several Physico-Chemical Characteristics of
Cherry Laurel (Laurocerasos Officinalis Roem.) Fruits -Biotechnology &
Biotechnological Equipment 2010, 24, 3, 1970-1973.
3. Erciyes A.T., Tuter-Erim M., Kabasakal O.S., Dandik L. Seed Oil
Characteristics of Onopordum tauricum Willd. And
Prunus laurocerasus L. -
European Journal of Lipid Science and Technology 1995, 97, 10, 387–388.
4. Ловкова М.Я., Рабинович А.М. и др. Почему растения лечат М.,
Наука 1990.
5. Пилипенко Ф.С. Laurocerasus. / Ф.С. Пилипенко. –Деревья и
кустарники СССР. – М.;Л.: Изд-во АН СССР, 1954. – Т. III. – С. 773–782.
6. Rehder, A. Manual of cultivated trees and shrubs. Hardy in North
America / A. Rehder. – New York, 1974. – 996 p.
7. Катаева И.В., Бутенко Р.Г. Микроклональное размножение
растений, 1983. - С. 96-99.
Scientific research results in pandemic conditions (COVID-19)
260
8. Деменко В.И. Микроклональное размножение плодовых и
ягодных культур. Методические указания. – Москва: МСХА, 1997. – 20
с.
9. Кравченко Л.В. Система производства посадочного материала
винограда высших категорий качества. Автореф.дисс.док.с.-х.наук. –
Краснодар, 2006. – С. 6-45.
10. Зленко В.А., Котиков У. Методы
in vitro для размножения
оздоровленного посадочного материала винограда. – М., 2008. - №3. –
С. 38-39.
Azadakhan Sabirovna, Candidate of Economic Science,
Centre of Genomics and Bionformatics, Uzbekistan,
Shahnoza Kadirovа, senior reserchers, Centre of Genomics and
Bionformatics, Uzbekistan,
THE BIOTECHNOLOGICAL COTTON AND A NPT II SELECTABLE MARKER
GENE
A. Sabirovna, Sh. Kadirovа
Abstract. The article discusses the behavior of the selective marker gene
npt II
, providing resistance to kanamycin in the biotechnology population
cotton variety Porloq-1 in connection with the experimenter is faced with
when creating biotechnological plants.
Keywords: biotechnological cotton plant, DNA, primers, PCR, selective
marker genes (SMG), npt II, verification.
Npt II ген будучи бактериальным по происхождению, был выделен
из
из
транспозона
Tn5
E.coli
и
кодирует
фермент
неомицинфосфотрансферазу
II
(амино-гликозид-3’-
фосфотрансферазу II, АРН(З’)II), активность которого придает ей
признак устойчивости к родственным антибиотикам: канамицину,
неомицину и гинетицину [1]. Данный ген активно используется в
генной инженерии при создании векторных (генетических)
конструкций для трансформации. Клетки, в геном которых включают
этот ген, приобретая устойчивость, способны выживать при
инкубации в канамициновой среде. В своем составе такие
внехромосомные экспрессирующиеся (или челночные) векторы
имеют сайты инициации репликации и обязательно селективный ген
[2].
