Республиканская научно
-
практическая конференция
с международным участием
«Современные аспекты развития фундаментальных
наук и вопросы их преподавания»
102
АНАЛИЗ ЭКСПРЕССИИ ГЕНОВ ЛИПОЛИТИЧЕСКИХ
ФЕРМЕНТОВ ЖЕЛУДКА
Мухамедова С.Н.
Ташкентский педиатрический медицинский институт,
Ташкент, Республика Узбекистан
Якубов И.Т., Абдуллаева М.М.
Национальный университет Узбекистана имени Мирзо Улугбека,
Ташкент, Республика Узбекистан
Идентификация новых специфических генов в эпителиальных
клетках желудочно
-
кишечного тракта приведёт к новым методам лечения
заболеваний желудочно
-
кишечного тракта. Несмотря на то, что накоплено
много
экспериментальных
данных
о
функциях
некоторых
распространённых белков, экспрессированных в основных типах
эпителиальных клеток слизистой оболочки желудка, другие белки все ещё
не идентифицированы. Среди мало изученных ферментов особый интерес
представляют липолитические ферменты, класс ферментов, который
превращает липидные молекулы. Липазы, способные расщеплять
растительные масла и животные жиры в организме, используются в
производстве биотоплива. Фосфолипазы, участвующие в передаче сигнала
внутри клетки, также применяются в синтезе производных фосфолипидов
для пищевой промышленности и медицины. К настоящему времени
ферменты, участвующие в метаболизме сфингомиелина, остаются
подробно не изученными.
Результаты исследования
Ранее мы совместно с учеными из Калифорнийского университета
провели олигонуклеотидный микрочип
-
анализ экспрессии генов,
очищенных париетальных и энтерохромаффин
-
подобных клеток желудка
крысы. Этот метод анализа был назван «вычитающиеся гибридизацией» и
позволил идентифицировать специфические гены для париетальных и
энтерохромаффин
-
подобных клеток эпителия желудка. Профили
экспрессии генов предлагают белки, участвующие в новых функциях в
обоих типах клеток, которые могут быть дополнительно изучены с
помощью классических физиологических модельных систем.
На основе базы данных профилей генной экспрессии париетальных,
энтерохромаффин
-
подобных и общих желудочных клеток были проведены
поиск и скрининг следующих липолитических ферментов: липаз,
фосфолипаз
и
сфингомиелин
-
связанных
ферментов.
Значения
интенсивности экспрессии генов в микрочипах были усреднены. Для
каждого
гена было определено соотношение интенсивности экспрессии в
очищенных клетках по отношению к общим клеткам желудка крысы.
Республиканская научно
-
практическая конференция
с международным участием
«Современные аспекты развития фундаментальных
наук и вопросы их преподавания»
103
Нами обнаружены 84 различных липолитических ферментов,
которые экспрессируются в эпителиях желудка, для 7 из них значительно
обогащены мРНК в париетальных клетках (табл.1). Нами обнаружены
высокие уровни экспрессии липолитических ферментов в очищенных
париетальных клетках по сравнению с эпителием желудка.
Из таблицы видно, что соотношение мРНК в париетальных клетках к
мРНК общей клетки желудка для фосфолипазы С
-
подобной 1 (Plcl 1),
фосфатидилсерин
-
специфическая
фосфолипаза
А1
(Pspla
1),
гликофосфатидилинозитол фосфолипаза Д (Gpld 1), лизофосфолипаза
1 (Lypla 1), липопротеин липаза (Lpl), кислая сфингомиелиназа
-
подобная
фосфодиэстераза 3А (Smpld3a), сфингомиелин синтаза 2 (Sms2) составляли
в пределах 1,55 –
3,85.
Таблица 1
Экспрессия липолитических ферментов специфических для
париетальных клеток
Ген
Интенсивность
Соотношение
ЖК
ПК
ЭПК
ПК/ЖК
ЭПК/ЖК
ПК/ЭПК
PLC-like 1
1908,78
6963,99
2346,96
3,65
1,23
2,97
Pspla 1
17366,58 62591,89
13095,81
3,60
0,75
4,78
Gpld
4739,95
10405,47
4680,22
2,20
0,99
2,22
Lypla
3853,27
5974,80
4008,91
1,55
1,04
1,49
Lpl
6396,22
15270,38
7786,34
2,39
1,22
1,96
Smpdl3A
9624,64
37071,91
19381,83
3,85
2,01
1,91
Sms2
673,40
1710,44
686,87
2,54
1,02
2,49
*ЖК –
желудок, ПК –
Париетальные клетки, ЭПК –
энтерохромаффиноподобные клетки.
Заключение
С использованием базы данных Национального Института
Биотехнологической
Информации
(Pubmed)
были
определены
нуклеотидные
последовательности
генов,
предполагаемые
аминокислотные последовательности, домены и предполагаемые функции
7 вышеуказанных липолитических ферментов. Сравнение нуклеотидных
последовательностей генов фосфолипаз среди млекопитающих показало
некоторые различия между видами. На основании проведенных анализов
можно предположить, что 5 генов ферментов из 7 представляют
наибольшей интерес для функционирования париетальных клеток.
Фосфолипаза С
-
подобной 1 является инозитол 1,4,5
-
трифосфат
связывающим белком с молекулярной массой 130 кДа. ФС
-
специфическая
фосфолипаза А1 и GPI фосфолипаза Д, по
-
видимому, участвует в передачи
Республиканская научно
-
практическая конференция
с международным участием
«Современные аспекты развития фундаментальных
наук и вопросы их преподавания»
104
сигнала внутри клетки, а также в перемоделировании внутриклеточных
мембранных систем париетальных клеток. Сфингомиелин синтаза 2
катализирует ферментативный синтез молекул сфингомиелина из
молекулы фосфатидилхолина, что приводит к изменению свойств
апикальной мембраны париетальной клетки. Таким образом, поиск и
анализ транскриптов в очищенных париетальных клетках на
олигонуклеотид микрочипах
показали высокую и специфическую
экспрессию мРНК для липаз, фосфолипаз и сфинго
-
миелин
-
связанных
ферментов. Дальнейшие исследования с помощью современных методов
анализа, таких как ПЦР в реальном времени, двумерный электрофорез с
масс
-
спектрофотометрией, флуоросцентная микроскопия и другие
позволяют
определить
роль
специфических
ферментов
в
функционировании париетальных клеток желудка.
Библиографические ссылки:
1.
Бабаханова, З. А., and М. Х. Арипова. "Высокоогнеупорные
алюмопериклазоуглеродистые керамические материалы на шпинельной
связке." Новые огнеупоры 9 (2018): 23
-27.
2.
Хабибуллаев, С. М. "Оценка функционального состояния
тубулоинтестициальной системы почек у больных хроническим
пиелонефритом и сахарным диабетом." Новые подходы в науке и
образовании. 2018
.
3.
Дадаходжаева, М. Р. "ИННОВАЦИОННЫЕ ТЕНДЕНЦИИ В СФЕРЕ
ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБУЧЕНИЯ ХИМИИ В УЧЕБНЫХ ЗАВЕДЕНИЯХ
УЗБЕКИСТАНА." Вестник науки 1.4 (61) (2023): 152
-162.
