38
К ВОПРОСУ ОБ ИЗМЕНЕНИИ СТАНОВЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ
ЭНТЕРАЛЬНЫХ ФЕРМЕНТОВ КРЫСЯТ В УСЛОВИЯХ
ИММОБИЛИЗАЦИИ И ПУТИ КОРРЕКЦИИ ИХ ФЕНАЗЕПАМОМ
Аскарьянц В.П.
Ташкентский педиатрический медицинский институт
Аннотация:
Несмотря на большое количество работ, на сегодняшний
день все еще нет однозначного определения понятия «стресс». По мнению
одного из ведущих специалистов в этой области Т.Кокса (1981), любые
определения и описания стресса, существующие в настоящее время,
являются недоработанными и неполными, их следует считать лишь
поводом для дискуссий, а не принимать как нечто неопровержимое.
Ключевые слова:
стресс, транквилизатор, гомогенат, тонкая кишка,
ферменты, топография, активность
Все большее внимание привлекают вопросы о зависимости
протекания стресс
–
реакции от возраста (1,2,3), пола (4), индивидуальных
генетических (5,6), типологических (7), эмоциональных (8) и
поведенческих особенностей организма (9).
Известно, что в стрессорную реакцию организма почти всегда
вовлекаются органы пищеварения. Этот вопрос достаточно хорошо изучен
в онтогенетическом аспекте.
Однако в доступной литературе мы не нашли данных о состоянии
пищеварительной системы в норме и при стрессах у взрослых животных,
отличающихся между собой поведенческими характеристиками, например,
по степени агрессивности, и у их потомства, а также об особенностях
действия транквилизатора феназепама при стрессе у
этих особей. Следует
учесть, что результаты изучения агрессивного поведения животных и
душевнобольных позволяют говорить о принципиальном сходстве
механизмов агрессивного поведения млекопитающих.
Цель работы:
изучить активность и топографию энтеральных
ферментов у взрослых нелинейных крыс.
Материалы и методы:
В эксперименте использовали белых
нелинейных лабораторных крыс различного возраста. Опыты проводились
на взрослых крысах
-
самцах массой тела 180
-
200 г. Использовались три
группы взрослых крыс –
так называемая «смешанная» группа (животные не
проверялись на агрессивность), неагрессивная и агрессивная группы,
в которых животные тестировались на агрессивность, связанную с болью,
по методике А.Л.
Рылова.
39
Иммобилизационный стресс вызывали путем принудительной
иммобилизации в течение 24 часов.
Феназепам вводили перорально за 30 минут до стресса в дозе 2мг/кг.
В качестве контроля использовали крыс с соответствующей
поведенческой
характеристикой,
которым
перорально
вводили
эквивалентное количество дистиллированной воды.
После 24
-
часового голодания крыс умертвляли путем декапитации.
В гомогенате слизистой оболочки, снятой вдоль всей тонкой кишки, или
снятой отдельно с двенадцатиперстной кишки, с трех равных между собой
нижележащих участков, условно названных проксимальным, медиальным и
дистальным (для выяснения топографии ферментативных активностей) с
помощью фотоэлектроколориметрических методов определяли активности
энтеральных ферментов: моноглицеридлипазы –
методом А.М.
Уголева и
М.Ю.
Черняховской;
глицин
–
1-
лейциндипептидгидролазы
-
методом
А.М.
Уголева и Н.М.
Тимофеевой; амилазы –
методом
Smyth a. Roe
в
модификации А.М.
Уголева; сахаразы –
методом
Nelson
в модификации
А.М.Уголева; лактазы –
методом
Dahlquist.
Активность ферментов рассчитывали на единицу массы сырой ткани
слизистой оболочки тонкой кишки и выражали в мг/мин/г для амилазы и
мкмоль/мин/г для остальных ферментов.
Адгезия энтероцитов измерялась методом А.Г.
Меликянц и соавт.
Во всех опытах измерялись
масса тела крыс, масса слизистой
оболочки по участкам тонкой кишки, длина и диаметр кишки. Визуально с
помощью лупы определялось наличие язв, эрозий или кровоизлияний в
слизистой оболочке; их количество рассчитывалось на 1см
2
ее поверхности.
Статистическую обработку полученных результатов проводили
методом Стьюдента и Фишера с вычислением средних арифметических
величин М, их стандартных ошибок
m
, показателей достоверности
различий сравниваем
величин
t
и P. Величину Р≤0,05 рассматривали как
показатель достоверных различий.
В зависимости от поведенческих особенностей животных, имеются
вариации в активности и топографии ферментов и адгезии энтероцитов на
протяжении всей тонкой кишки. Эти параметры близки между собой у крыс
из смешанной и неагрессивной группы, у агрессивных же особей
отмечается картина, резко отличная от двух вышеописанных групп: масса
слизистой оболочки по участкам тонкой кишки у них больше, активность
энтеральных ферментов, кроме лактазы, в гомогенате слизистой оболочки,
снятой вдоль всей тонкой кишки, выше; топография ферментов иная,
адгезия энтероцитов
ниже.
Активность ферментов в гомогетате слизистой оболочки, снятой
вдоль всей тонкой кишки, у взрослых крыс из смешанной, неагрессивной и
агрессивной группы (М±
m, n=6)
40
Таблица 1
Фермент
Группа крыс
Смешанная
Неагрессивная
Агрессивная
Моноглице
ридлипаза
(мкмоль//мин/г)
5,8±0,2
5,8±0,3
Р≥0,1
9,6±0,3
Р≤0,01
Дипептид
гидролаза
(мкмоль/мин/г/)
10,9±0,2
12,0±1,1
Р≥0,05
19,7±0,9
Р≤0,01
Амилаза
(мг/мин/г)
204,6±7,8
208,1±7,4
Р≥0,1
307,3±6,4
Р≤0,05
Сахараза
(мкмоль/мин/г)
14,0±0,6
15,2±0,6
Р≥0,05
32,1±0,7
Р≤0,01
Лактаза
(мкмоль/мин/г)
О,42±0,03
0,49±0,04
Р≥0,05
0,44±0,04
Р≥0,1
Иммобилизационный
стресс по
-
разному влияет на функциональные
показатели тонкой кишки в зависимости от поведенческих особенностей у
взрослых крыс. Эти изменения похожи у крыс из смешанной и
неагрессивной группы. Так, стресс не вызывает гибели особей из этих
групп. У них происходят разнонаправленные сдвиги активностей
энтеральных ферментов в гомогенате слизистой оболочки, снятой вдоль
всей тонкой кишки: активность моноглицеридлипазы и амилазы
снижается, дипептидгидролазы и сахаразы –
повышается, лактазы –
не
изменяется. Топография всех ферментативных активностей изменяется, в
основном, за счет смещения их максимума в дистальный сегмент.
У взрослых агрессивных крыс иммобилизация вызывает гибель
20% особей, ингибирует активность всех ферментов, а распределение
ферментативных активностей становится равномерным по длине тонкой
кишки.
В неагрессивной и агрессивной группах эрозии появляются вдоль
всей кишки, но особенно много их в двенадцатиперстно кишке и
проксимальном отделе; в смешанной группе эрозии обнаруживаются
только в двенадцатиперстной кишке и
проксимальном отделе.
Общим для стресса у всех взрослых крыс, независимо от их
поведенческих особенностей, является снижение массы тела и массы
слизистой оболочки по участкам тонкой кишки, а также снижение адгезии
энтероцитов, особенно в двенадцатиперстной кишке и проксимальном
отделе.
Большинство нарушений функционального состояния тонкой кишки
после иммобилизации в трех изученных группах крыс не исчезают даже
через 48 часов, хотя в количественном отношении они несколько
уменьшаются к этому сроку.
41
На фоне профилактического введения феназепама в трех изученных
группах стрессорная реакция протекает по
-
иному, чем у крыс из тех же
групп, но без введения транквилизатора. Феназепам лучше коррегирует
нарушения в морфо
–
функциональном состоянии тонкой кишки при
стрессе у взрослых агрессивных крыс по сравнению с особями из
смешанной и неагрессивной группы, что проявляется, например, в более
быстрой нормализации исследованных показателей у крыс из
неагрессивной группы.
Выводы:
1.
В зависимости от поведенческих особенностей существует
собственная норма для активности и топографии энтеральных ферментов.
2.
У взрослых агрессивных особей масса слизистой больше,
активность ферментов, кроме лактазы, выше, адгезия энтероцитов ниже,
чем у крыс из смешанной и неагрессивной группы.
3.
Иммобилизационный стресс по
-
разному влияет на морфо
-
функциональные показатели тонкой кишки у взрослых крыс в зависимости
от их поведенческих характеристик:
а)
у агрессивных крыс стресс приводит к летальным исходам
в 20% случаев
;
б)
общим для стресса у взрослых крыс, независимо от их
поведенческих особенностей, является снижение массы тела и массы
слизистой оболочки по участкам тонкой кишки, снижение адгезии
энтероцитов и появление эрозий, особенно в оральных отделах;
4.
Феназепам лучше коррегирует нарушения в функциональном
состоянии тонкой кишки при иммобилизационном стрессе у взрослых
агрессивных крыс по сравнени с особями из смешанной и неагрессивной
группы.
5.
Профилактическое введение феназепама
практически не
оказывает протективного воздействия при иммобилизационном стрессе у
крысят в возрасте 21 дня, независимо о поведенческих особенностей их
родителей.
Протективное
действие
транквилизатора
начинает
проявляться у крысят в возрасте 30 дней, особенно, рожденных от
агрессивных родителей.
Библиографические
ссылки
:
1.
Ackermann H. Ubergand phosphororganischer insectizide in der Embrio-
Bildung der PO-Derivate und Auslosurig toxischer Symptome. Germany. 2005.
–
N 126.
–
PP. 23
–
29.
2.
Best, Taylor. Physiological Basis of Medical Practice.
–
USA, 2005.
3.
Chatterjee. Human physiology. Medical alied agency.
–
India
–
Calcutta, 2007.
4.
Stuart J.Fox. Human physiology. WCB and Oxford. -England, 1993.
42
5.
Textbook of Medical Physiology / A.C. Guyton.
–
M.D. Philadelphia-
London
–
Toronto
–
Tokyo, 2008.
6.
Физиология пищеварения/ Под ред.
А.В.
Соловьева.
–
СПб.: Наука, 2000.
7.
Физиология человека. В 2
-
х тт. / Под ред. В.М.
Покровского,
Г.Ф.
Коротько. –
М.: Медицина, 1997.
8.
Рянская
О.М., Ахраров
Х.Х. Влияние теплового стресса на
формирование функций органов пищеварения в онтогенезе//
Мат.II съезда
физиологов Средней Азии и Казахстана.
–
Душанбе, 2001. –
С.
23.
9.
Рянская
О.М., Аскарьянц
В.П., Ахроров
Х.Х. Становление функций
органов пищеварения в раннем постанальном онтогенезе в норме и при
стрессе
//
Тошкент болалар тиббиет олийгохининг 30 йиллигига
бағишланган илмий анжуманинг материаллари. –
Тошкент. 2002.
10.
Зияева
LU., Мирзаахмедова
К., Калдибаева
А., Акрамовна
М., &
Ахадова
3. (2016). Доклиническое изучение антиатеросклеротического
препарата фирутас на
патоморфологические изменения органов животных
при длительном введении, in Library, 76(3), 77
-
78. извлечено от
https://inlibrary.uz/index.php/archive/article/view/17315
11.
Каримов
Р., & Юнусов
А. (2021). Лекарственные поражения печени
и аспекты применения гепатопротекторов в практической медицине, in
Library, 27(1), 77-
82. извлечено от
https://inlibrary.uz/index.php/archive/
article/view/17305
12.
Мирзаахмедова
К.
(2022).
Изучение
Фитина
–
с
на
желчевыделительную функцию печени при остром токсическом гепатите,
in Library, 22(1), 121-
124. извлечено от
https://inlibrary.uz/index.php/
archive/article/view/17317
13.
Каримова
Г. (2020). Гепатопротективная активность дармонала
при токсическом гепатите, in
Library, 20(1), 86-
91. извлечено от
https://inlibrary.uz/index.php/archive/article/view/17377
14.
Каримов
Р., Зияева
LU., & Мирзаахмедова, К. (2020). Влияние
фитата кобальта, фитата магния и силибора на состав липидов сыворотки
крови при экспериментальном гепатите, in Library, 20(1'), 122–
127.
извлечено от https://inlibrary.uz/index.php/archive/article/view/17299
15.
Абзалова
LU.,
&
Калдибаева
А.
(2013).
Морфологические
изменения печени на ранних сроках церебрального ишемического
инсульта в эксперименте, in Librar
y, 2(2), 287-
293. извлечено от
https://inlibrary.uz/index.php/archive/article/view/17319
16.
Айходжаева
Д., & Ахраров
X. (2018). Особенности влияния
гипертермии на экзокринную секреция поджелудочной железы растущих
крыс, in Library, 18(3), 28
-
30. извлечено от
https://inlibrary.uz/index.php/
archive/article/view/17472