БИОМЕДИЦИНА ВА АМАЛИЁТ ЖУРНАЛИ
|
ЖУРНАЛ БИОМЕДИЦИНЫ И ПРАКТИКИ
|
JOURNAL OF BIOMEDICINE AND PRACTICE
№2 | 2021
206
Хирургия
Абдусаттор Абдумаликович ТУРСУМЕТОВ,
Алишер Абдикаримович САБИРМАТОВ,
Фарход Миржалилович ИСМАИЛОВ.
Ташкентский педиатрический медицинский институт
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ОБОСНОВАНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ
ФОТОДИНАМИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ ПРИ РАСПРОСТРАНЕННОМ ПЕРИТОНИТЕ
For citation:
A.A. Tursumetov, A.A. Sabirmatov, F.M. Ismailov EXPERIMENTAL
SUBSTANTIATION OF THE EFFECTIVENESS OF PHOTODYNAMIC THERAPY IN
MULTIPLE PERITONITIS Journal of Biomedicine and Practice. 2021, vol. 6, issue 2, pp.206-215
http://dx.doi.org/10.26739/2181-9300-2021-2-32
АННОТАЦИЯ
Представлены результаты применения фотодинамической санации брюшной полости с
использованием фотосенсибилизатора метиленовой сини в концентрации 0,05% при
распространенном перитоните в эксперименте. Установлено, что при использовании в
качестве источника светодиодного излучения аппарата «ФДУ-1» с длиной волны 640±20нм,
необходимы следующие параметры: время экспозиции 3-5 минут на каждую область
облучения, выходная мощность излучения в непрерывном режиме 100мВт/см
2
, плотность
энергии от 25 до 35 Дж/см
2
. Применение разработанного метода санации брюшной полости у
экспериментальных животных позволило уменьшить послеоперационную летальность с 25%
до 7,5%.
Ключевые слова:
перитонит, фотодинамическая терапия, метиленовая синь, хлоргексидин,
санация.
Abdusattor Abdumalikovich TURSUMETOV,
Alisher Abdikarimovich SABIRMATOV,
Farhod Mirjalilovich ISMAILOV
Tashkent Pediatric Medical Institute
EXPERIMENTAL SUBSTANTIATION OF THE EFFECTIVENESS OF
PHOTODYNAMIC THERAPY IN MULTIPLE PERITONITIS
ANNOTATION
The results of the application of photodynamic sanitation of the abdominal cavity with the use of the
photosensitizer methylene blue at a concentration of 0.05% with widespread peritonitis in the
experiment are presented. It was found that when using the "FDU-1" device with a wavelength of
БИОМЕДИЦИНА ВА АМАЛИЁТ ЖУРНАЛИ
|
ЖУРНАЛ БИОМЕДИЦИНЫ И ПРАКТИКИ
|
JOURNAL OF BIOMEDICINE AND PRACTICE
№2 | 2021
207
640 ± 20 nm as a source of LED radiation, the following parameters are required: exposure time 3-5
minutes for each irradiation area, output radiation power in continuous mode 100 mW / cm2, energy
density from 25 to 35 J / cm2. The use of the developed method of sanitation of the abdominal cavity
in experimental animals made it possible to reduce postoperative mortality from 25% to 7.5%.
Key words:
peritonitis, photodynamic therapy, methylene blue, chlorhexidine, sanitation.Key words:
Abdusattor Abdumalikovich TURSUMETOV,
Alisher Abdikarimovich SABIRMATOV,
Farhod Mirjalilovich ISMAILOV
Toshkent pediatriya tibbiyot institute
TARQALGAN PERITONITDA FOTODINAMIYA TERAPIYASINING
SAMARADORLIGINI EKSPERIMENTAL ASOSLASH
ANNOTATSIYA
Tajribada keng tarqalgan peritonit bilan 0,05% konsentratsiyali fotosensitizator metilenli ko'k
yordamida qorin bo'shlig'ini fotodinamik sanitariyasini qo'llash natijalari keltirilgan. 640 ± 20 nm
to'lqin uzunlikdagi "FDU-1" moslamasidan LED nurlanish manbai sifatida foydalanilganda quyidagi
parametrlar talab etilishi aniqlandi: har bir nurlanish maydoni uchun ta'sir qilish vaqti 3-5 minut,
uzluksiz chiqadigan nurlanish quvvati rejim 100 mVt / sm2, energiya zichligi 25 dan 35 J / sm2 gacha.
Eksperimental hayvonlarda qorin bo'shlig'ini ishlab chiqilgan sanitariya usulidan foydalanish
operatsiyadan keyingi o'limni 25% dan 7,5% gacha kamaytirishga imkon berdi.
Kalit so'zlar:
peritonit, fotodinamik terapiya, metilen ko'k, xlorheksidin, sanitariya.
Актуальность.
В настоящее время установлено, что положительный результат лечения
больного с распространенным перитонитом на 70% зависит от оптимальной хирургической
тактики, в первую очередь, от адекватной санации брюшной полости и лишь на 30% - от
антибактериальной и интенсивной терапии [7,9]. Установлено, что в большинстве случаев
неудовлетворительный
результат
при
проведения
лечения
определяет
фактор
антибиотикорезистентности присутствующих микроорганизмов [2].
Известно, что главными требованиями, предъявляемыми к санирующим растворам при
перитоните, являются высокая антимикробная активность, отсутствие формирования
устойчивости микроорганизмов, минимальное повреждающее действие на ткани организма,
низкая токсичность, низкая стоимость [6].
В качестве традиционных антисептиков для санации брюшной полости обычно
используют водные растворы хлоргексидина 0,02%, фурацилина 1:5000, диоксидина [9].
Вместе с тем, хлоргексидин способен оказать токсическое действие на организм и не обладает
детоксикационным действием, а растворы фурацилина оказывают низкий антибактериальный
эффект и отмечается быстрое развитие резистентности микроорганизмов к этому препарату
[4,6], а диоксидин обладающий бактерицидной активностью является токсичным и может
вызывать аллергические реакции, вследствие этого необходимо перед применением провести
пробу на индивидуальную чувствительность [9], а в ургентной хирургии не всегда это
возможно.
В последнее время для борьбы с хирургическими инфекциями широко применяется
антимикробная и противовоспалительная фотодинамическая терапия — ФДТ [3,7,8] с
использованием фотосенсибилизаторов. Так как ФС имеет способность селективно
накапливаться в микробных клетках и поврежденных тканях, которые являются объектом для
фотодинамического воздействия [1]. Среди фотосенсибилизаторов наиболее доступным,
менее токсичным является метиленовая синь (МС). Более того, известно, что МС применяют
как антидот при отравлениях цианидами, угарным газом и сероводородом путем
внутривенного введения. Такое свойство фотосенсибилизаторов позволило успешно
применять их в фотодинамической терапии при лечении онкологических заболеваний, в
БИОМЕДИЦИНА ВА АМАЛИЁТ ЖУРНАЛИ
|
ЖУРНАЛ БИОМЕДИЦИНЫ И ПРАКТИКИ
|
JOURNAL OF BIOMEDICINE AND PRACTICE
№2 | 2021
208
стоматологии и оториноларингологии [5].
Выше
представленные
факты,
дают
основания к изучению возможности применения ФДТ с МС в качестве мер санации брюшной
полости при лечении распространенного перитонита
Выше представленные факты, дают основания к изучению возможности применения
ФДТ с МС в качестве мер санации брюшной полости при лечении распространенного
перитонита.
Более того, до настоящего времени не разработан метод фотодинамической санации
брюшной полости при перитоните, так как недостаточно изучено влияние ФС на состояние
брюшины, нет сведений о влиянии различных ФС на состояние гомеостаза при их
внутрибрюшинном введении,
не
изучена
эффективность
использования ФДТ
с
использованием МС для лечения экспериментального перитонита. В связи с этим, проведение
экспериментального исследования, обосновывающего использование ФДТ в лечении
перитонита, входит в круг важных задач современной хирургии. Представленные факты
подталкивает исследователей к поиску новых и совершенствованию существующих методов,
направленных на преодоление сопротивляемости микроорганизмов [9, 10].
Исходя из этой концепции, мы сравнили эффективность санации брюшной полости
0,02% водным раствором хлоргексидина и фотодинамической санации с использованием
метиленовой сини.
Цель исследования:
разработка и применение способа фотодинамической санации
брюшной полости при распространенном перитоните с использованием фотосенсибилизатора
метиленовая синь в эксперименте.
Материалы и методы исследования.
Клинико - лабораторные исследования,
проведённые у больных с распространенным перитонитом, показали, что основными
виновниками послеоперационных гнойно-воспалительных осложнений являются несколько
микробов, среди которых приоритет по встречаемости составляют: Staphylococcus aureus –
28%; Staphylococcus epidermidis – 6%; Escherichia coli – 46%. С учетом этого, нами для
микробиологических исследований использовали музейные штаммы этих микробов,
полученных из национальной коллекции микроорганизмов инфекции человека НИИ ЭМИЗ
МЗ РУз с наличием паспортных данных. Для проведения этих исследований первоначально
нами приготовлены посевы трех взятых в опыт микробных культур при этом с учетом
методических рекомендаций нами подготовлены бульонные культуры микробов в
концентрации 5×105 КОЕ ∕мл используя стандарты мутности США.
Посевы микробных культур проведены методом «Газона» на специальную среду
Мюллер Хинтона - производства индийской фирмы HeiMidia.
Наши исследования в условиях in vitro показали, что фотосенсибилизатор МС в
концентрации 0,05% в комбинации с светодиодным излучением с длиной волны 630±20 нм,
при плотности мощности излучения 100 мВТ/см
2
, времени экспозиции 5-10 минут, при
плотности энергии 25-35 Дж/см
2
, в расстоянии от облучаемого объекта 10-15 см обладает
бактерицидным действием. При этом показатель зоны задержки роста микробов составляет в
среднем 20,3±0,5мм. Нами в экспериментальных исследованиях использован отечественный
аппарат «ФДУ-1», как источник светодиодного излучения в диапазоне 630 нм.
Результаты микробиологических исследований in vitro определили направление наших
следующих экспериментов в условиях in vivo.
Для создания модели острого экспериментального перитонита (ОЭП) нами применена
модифицированная методика Блинкова Ю.Ю. В.А. и соавт. [А/с: RU 2338265 от 10.11.2008 г.].
Цель первого этапа исследования (in vivo) заключалось в изучении повреждающего
действия химических веществ (МС и 0,02% раствора хлоргексидина) (18 крысы), ФС (18
крысы), светодиодного излучения и ФДТ (18 крысы) на интактную брюшину. Для этого в
брюшную область растворы хлоргексидина (контрольная группа) и МС (основная группа)
вводили пункционным методом в нижней части живота животного, а для изучения
воздействия МС и светодиодного излучения (фотодинамическое воздействие) в комбинации
выполняли лапаротомию под эфирным наркозом и в брюшную полость заливали 3 мл 0,05%
БИОМЕДИЦИНА ВА АМАЛИЁТ ЖУРНАЛИ
|
ЖУРНАЛ БИОМЕДИЦИНЫ И ПРАКТИКИ
|
JOURNAL OF BIOMEDICINE AND PRACTICE
№2 | 2021
209
раствора МС на 5 минут, затем брюшную полость обсушивали, затем брюшину облучали
аппаратом «ФДУ-1» в течение 3-5 минут. Все исследования были выполнены в одинаковых
условиях, в одно и то же время под общим обезболиванием животных.
Во втором этапе эксперименты in vivo выполнены на 68 животных с
экспериментальным РП, в контрольной группе животных было 28, у которых санацию
брюшной полости выполняли 0,02% раствором хлоргексидина, а в основной группе животных
было 40, в этой группе выполняли фотодинамическую санацию брюшной полости
метиленовой синью. До операции и на 3-5-7 сутки в динамике наблюдали за динамикой
лабораторных и биохимических анализов.
Результаты исследования и их обсуждение.
Наши исследования показали, 0,02% раствор
хлоргексидина вызывает
деструкцию в волоконных структурах, дезорганизацию и даже
поверхностный некроз париетальной брюшины
.
Полученные нами результаты показывают,
что при санации брюшной полости раствором хлоргексидина целесообразно брюшную
полость тщательноо промыть физиологическим раствором и осушить, т.к. длительный контакт
хлоргексидина с брюшиной может иметь не благоприятное действие (десквамация,
дезорганизация, некроз), а с другой стороны часть раствора всасывается в организм.
Нами установлено, что 0,05% раствор МС и светодиодное излучение с длиной волны
640±20 нм в отдельности, а также фотодинамическое воздействие с плотностью мощности 25-
35 нм с экспозицией 5 минут на париетальную и висцеральную брюшину вызывает
поверхностную десквамацию париетальной брюшины здоровых крыс
.
Полученные нами
результаты определили направление следующих этапов исследовательской работы в
условиях in vivo на модели ОЭП.
Морфологические изменения при ОЭП показали, что в основной и контрольной группе
животных во время лапаротомии макроскопический вид брюшины соответствовал картине
острого гнойного распространенного перитонита. После лапаротомии в основной группе
животных с ОЭП брюшную полость промывали физиологическим раствором в объеме 5-7 мл,
отсосом осуществляли эвакуацию содержимого, затем в брюшную полость вводили 3мл МС,
время экспозиции после введения МС в брюшную полость составил 5-10 минут, осушение
брюшной полости, затем ФДТ в дозе 25-35 Дж/см
2
в течение 5 минут.
Ушивание
лапаротомной раны. Через сутки после оперативного вмешательства в основной группе, где
проводилась ФДТ санация брюшной полости с 0,05% раствором МС животные дышат тяжело,
«чихают», малоподвижны, лежат, забившись в угол клетки, шерсть взъерошена, почти не едят,
обильно пьют воду.
Через 3-е суток после операции животные активные, аппетит нормальный, пареза
кишечника не наблюдается, при этом мы отмечается сохранение равномерной
слабовыраженной гиперемии брюшины с появлением обычного блеска последней. Объем
экссудата (прозрачного вида) составил 0,5 мл у 2-х из
6 животных
, у остальных
4-х животных
менее 0,5 мл. В эти сроки спаек между петлями брюшины мы также не наблюдали, как и
признаков термического поражения брюшины.
Через 5 суток
после операции поведение
животных не отличается от здоровых особей: парез разрешился, исчезала гиперемия
брюшины. Брюшина, приобрела гладкий, блестящий вид. В брюшной полости имелись
единичные рыхлые спайки, более выраженные в области послеоперационной раны, выпота не
отмечалось.
На 7-е сутки
, у отдельных животных выявляются отдельные нежные, невыраженные
спайки сальника с висцеральной поверхностью печени или петлями тонкой кишки и нижним
полюсом селезенки, легко отделяемые, у остальных спаечный процесс не наблюдался.
Брюшина гладкая, блестящая.
Макроскопическая картина на 7-е сутки брюшной полости не отличалась от
макроскопической картины здоровых животных. Микробная обсемененность первые сутки
составил 7,3х10
2
±0,25х10
1
КОЕ/мл, а на 5 сутки брюшная полость была стерильной у
выживших животных.
БИОМЕДИЦИНА ВА АМАЛИЁТ ЖУРНАЛИ
|
ЖУРНАЛ БИОМЕДИЦИНЫ И ПРАКТИКИ
|
JOURNAL OF BIOMEDICINE AND PRACTICE
№2 | 2021
210
В контрольной группе животных, брюшную полость промывали физиологическим
раствором 5-7 мл, затем санацию брюшины проводили введением в брюшную полость 3,0 мл
0,02% раствора хлоргексидина. Осушение брюшной полости. Ушивание лапаротомной раны.
В первые сутки
у крыс наблюдалась выраженная одышка, они малоподвижны,
животные «кучкуются» в одном углу клетки, не едят, обильно пьют воду. В брюшной полости
около 2-3мл мутного выпота, в 2 случаях с геморрагическим компонентом, на висцеральной
поверхности печени, между брюшинными листками серповидной складки и в складках
сальника определялись единичные вкрапления фибрина. Желудок вздут и наполнен массами.
Отмечается сегментарное вздутие и атония тонкой кишки, подвздошная кишка спавшаяся,
стенки ее отечны.
На 3 сутки
у животных появляется аппетит, но едят мало. В брюшной полости
сохраняется выпот до 1,5 мл без запаха, обнаруживались небольшие межпетлевые спайки, а
также спайки с передней брюшной стенкой более выраженные в области послеоперационной
раны, или с краями печени и нижнего полюса селезенки с большим сальником. Брюшина
тусклая, инъецирована, сохраняются признаки пареза кишечника, с тенденцией к разрешению.
На 5 сутки
в брюшной полости около 0,5-1 мл светлого выпота, отмечается гиперемия
брюшины, межпетлевые, а также шнуровые спайки, парез кишечника разрешился.
К 7 суткам
в брюшной полости незначительное количество выпота светлой окраски,
определяется у 2 особей, сохраняется слабовыраженная гиперемия брюшины с появлением
обычного блеска последней.
Макроскопическая картина брюшной полости после сеанса ФДТ в основной группе на
всех этапах исследования была существенно лучше, чем в группе сравнения.
У животных основной группы функция кишечника восстанавливалась спустя сутки от
начала кормления, а через 3-5 суток после операции поведение животных не отличалось от
здоровых животных, не участвовавших в эксперименте.
В контрольной группе животные были менее активны, слабо реагировали на внешние
раздражители, тянулись в основном к поильнику. Функция кишечника у них
восстанавливалась на 4-5 сутки после операции, но даже в эти сроки крысы были вялыми и
малоподвижными.
Микробная
обсемененность
первые
сутки
составил
8,0х10
4
±0,25х10
3
КОЕ/мл, на 3 сутки 6,1х10
3
±0,23х102 КОЕ/мл, а на 5 сутки 3,5х10
2
±0,16х10
1
КОЕ/мл, т.е. инфицированность сохранялась и на 5 сутки.
В послеоперационном периоде животные основной и контрольной группы получали
в/м с целью антибактериальной терапии раствор цефазолина в дозе 0,1.
В основной группе погибли 3 крыс из 40 (7,5%), животные погибли
на 3 (1) и 5 (2)
сутки, вследствие продолжающегося перитонита и нарастающей интоксикации. В
контрольной группе погибли 7
крыс из 28,
летальность составила 25 %. Одно животное
погибло через 1 сутки, 3 крысы на 3 сутки, 2 крысы на 4 сутки и 1 крыса на 5 сутки при
явлениях продолжающегося перитонита. При вскрытии у большинства животных в брюшной
полости содержалось от 0,5 до 2 мл гнойного или гнойно-геморрагического экссудата с
запахом. В послеоперационном периоде животные каждой группы выводились из
эксперимента на 1-е, 3-е, 5-е и 7-е сутки. У животных выполнялся забор крови на общий
анализ, биохимические анализы, экссудат брюшной полости для бактериологического
исследования и материал для гистологического заключения.
Оценку системного воспалительного процесса у экспериментальных животных мы
осуществляли по результатам общего и биохимического анализа крови.
Из показателей эритроцитарного
звена (табл.1) видно, что в первые сутки после
оперативного вмешательства в основной и контрольной группах показатели эритроцитов,
гемоглобина и гематокрита остаются низкими что свидетельствует о значительном угнетении
эритропоэза и сохраняющихся нарушениях метаболизма.
К седьмым суткам показатели эритроцитарного звена в основной группе приблизилась
к нормальным показателям, в контрольной группе, хотя имелась положительная динамика, все
БИОМЕДИЦИНА ВА АМАЛИЁТ ЖУРНАЛИ
|
ЖУРНАЛ БИОМЕДИЦИНЫ И ПРАКТИКИ
|
JOURNAL OF BIOMEDICINE AND PRACTICE
№2 | 2021
211
же концентрации эритроцитов, гемоглобина и гематокрита оставались ниже чем в
контрольной группе: 5,98±0,20, 129,0±3,2 и 37,6±1,3 соответственно (таблица 1).
Таблица 1
Динамика показателей эритроцитарного звена крови у крыс основной и контрольной
группе
Заборы проб крови (сутки)
Показатель
1
3
5
7
О
сн
ов
н
ая
груп
п
а
Эр (х10
12
/л)
(норма:6,59-8,15Х10
12
)
4,82±0,16
5,37±0,19
^
5,94±0,19
^^^
6,51±0,22
^^^
Hb (г/л) (норма:132-
154 г/л)
119,0±2,5
124,0±3,1
*
127,0±3,4
^
133,0±3,5
^^
Ht (%) (39,3-48,0%)
33,6±1,1
37,4±1,3
^
37,9±1,4^
48,1±1,7
***^^^
Кон
трол
ьн
ая
груп
п
а
Эр (х10
12
/л)
(норма:6,59-8,15Х10
12
)
4,83±0,18
5,11±0,18
5,57±0,18
^
5,98±0,20
^^^
Hb (г/л) (норма:132-
154 г/л)
117,0±3,8
115,0±3,0
123,0±3,1
129,0±3,2
^
Ht (%) (39,3-48,0%)
32,7±1,2
35,0±1,1
36,0±1,3
^
37,6±1,3
^
Эр (х10
12
/л)
Средние
показатели
7,37±0,31х10
12
Hb (г/л)
143,0±5,4 г/л
Ht (%)
43,7±1,6 %
Примечание: *- достоверно по сравнению с показателями контрольной группой (*-Р <0,05;
***-Р<0,001)
^-
достоверно по сравнению с показателями 1 сутки (^-Р <0,05; ^^-Р <0,01; ^^^-Р<0,001)
При сравнении уровня лейкоцитов в основной и контрольной группе (табл.2) к концу
первых суток отмечалось выраженное повышение лейкоцитов в основной и контрольной
группах на 30,9% и 31,7% по сравнению средними показателями, с достоверностью p <0,05.
На третьи и пятые сутки отмечалось более быстрое снижение лейкоцитов в основной группе
на 7,6% и 17,7% соответственно с достоверностью <0,05%, а в контрольной группе
соответственно на 1,3% и 3,8%. На 7 сутки послеоперационного периода содержания
лейкоцитов в периферической крови в основной группе нормализовалась (10,7±0,39), а в
контрольной группе оставалась высокой нормальных показателей (14,9±0,42), т.е. в
контрольной группе сохранялось умеренное повышение лейкоцитов
от нормы
с
достоверностью (р˂0,05).
Таблица 2
Динамика изменения лейкоцитов (x10
9
/л) у животных основной и контрольной групп
Группы
Сутки после оперативного вмешательства
1-е сутки
3-е сутки
5-е сутки
7-е сутки
основная
15,9±0,50
14,7±0,47
*
13,1±0,43
**^
10,7±0,39
***^
контрольная
16,1±0,53
15,9±0,48
15,5±0,46
14,9±0,42
Средние
показатели
Лейкоциты
11,0±0,41х10
9
/л
Примечание: *- достоверно по сравнению с показателями контрольной группой (*-Р <0,05; **-
Р <0,01; ***-Р<0,001)
^-
достоверно по сравнению с показателями 1 сутки (^-Р<0,001)
По мере стихания симптомов острого воспаления показатели ЛИИ (табл.3)
приближаются к нормальным значениям, т.е. интоксикация продолжает сохраняться.
Увеличение числа незрелых форм нейтрофилов мы рассматривали как проявление
напряжения компенсаторных механизмов, обеспечивающих инактивацию токсинов.
БИОМЕДИЦИНА ВА АМАЛИЁТ ЖУРНАЛИ
|
ЖУРНАЛ БИОМЕДИЦИНЫ И ПРАКТИКИ
|
JOURNAL OF BIOMEDICINE AND PRACTICE
№2 | 2021
212
Таблица 3
Динамика лейкоцитарного индекса интоксикации (ЛИИ, Ед.) периферической
крови
Группы
Сутки после оперативного вмешательства
1-е сутки
3-е сутки
5-е сутки
7-е сутки
Основная
4,43±0,15
*
3,91±0,13
***^
2,81±0,09
***^^^
1,40±0,05
***^^^
контрольная 5,1±0,17
4,7±0,14
^
3,9±0,11
^^^
2,7±0,09
^^^
Средние
показатели
ЛИИ
1,11±0,05
Примечание: *- достоверно по сравнению с показателями контрольной группой (*-Р <0,05;
***-Р<0,001)
^-
достоверно по сравнению с показателями 1 сутки (^-Р <0,05; ^^^-Р<0,001)
К 7 суткам после операции при использованием метода ФДТ величина ЛИИ
соответствовала почти нормальным цифрам
-
1,40±0,05 усл. ед., в то время как у животных
контрольной группы оставалась повышенной - 2,7±0,09 усл. ед. с достоверностью (р˂0,05).
При проведении стандартной санации брюшной полости отмечалась медленная
нормализация указанного показателя. Значение ЛИИ в основной группе уменьшалось быстрее
за счет уменьшения нейтрофильного сдвига и увеличения количества моноцитов, лимфоцитов
и эозинофилов. Применение метода ФДТ позволило быстро купировать периульнарные
воспалительные явления, перевести раневой процесс из альтеративно-экссудативной фазы в
репаративную, что нашло свое отражение и в динамике показателей ЛИИ, которые к 7 суткам
достигали пределов физиологических величин. В контрольной группе обмечалось двукратное
превышение контрольных показателей.
Биохимические показатели крови у обеих групп подопытных животных при развитии
ОЭП имели снижение общего белка, сохраняющееся на протяжении всего периода
наблюдения. В первые сутки у подопытных животных основной и контрольной группы
имеется равномерное снижение уровня общего белка плазмы крови (табл.4), приблизительно
составляемый 10 % (в основной -19,6%, в контрольной – 19,3%).
Таблица 4
Динамика изменения общего белка (г/л) животных основной и контрольной групп
после санации
Группы
Сутки после оперативного вмешательства
1-е сутки
3-е сутки
5-е сутки
7-е сутки
основная
82,9±2,8
84,7±3,0
91,3±3,0^^
99,7±3,3
^^^
контрольная
83,2±2,7
82,7±2,5
89,5±2,9
91,4±3,1
^
Средние
показатели
Общий белок
103,0±3,8 г/л
Примечание:
^-
достоверно по сравнению с показателями 1 сутки (^-Р <0,05; ^^-Р <0,01; ^^^-
Р<0,001)
Наиболее выраженная тенденция к повышению данного показателя имела место в
основной группе – к седьмым суткам, уровень общего белка повысился на 16,9% с
достоверностью (р˂0,05), по сравнению с контрольной группой (9%).
Содержание мочевины на момент оперативного вмешательства превышало норму на
50,7% (22,3±0,78 ммоль/л) (табл.5).
БИОМЕДИЦИНА ВА АМАЛИЁТ ЖУРНАЛИ
|
ЖУРНАЛ БИОМЕДИЦИНЫ И ПРАКТИКИ
|
JOURNAL OF BIOMEDICINE AND PRACTICE
№2 | 2021
213
Таблица 5
Динамика изменения мочевины (ммоль/л) у животных
основной и контрольной групп
Группы
Сутки после оперативного вмешательства
1-е сутки
3-е сутки
5-е сутки
7-е сутки
основная
19,21±0,63
*
18,92±0,66
15,9±0,57
*^^
11,7±0,45
***^^^
контрольная
21,63±0,75
20,47±0,64
17,52±0,56
^^^
16,94±0,53
^^^
Средние
показатели
Мочевина
11,0±0,45 ммоль/л
Примечание: *-достоверно по сравнению с показателями контрольной группой (*-Р<0,05; ***-
Р<0,001)
^-
достоверно по сравнению с показателями 1 сутки (^^-Р<0,01; ^^^-Р<0,001)
Первые сутки в основной группе имелась умеренная тенденция к снижению данного
показателя по отношению к исходному значению с 22,3±0,78 до 19,21±0,63 ммоль/л. В
контрольной группе содержание мочевины на первые сутки увеличилась с 19,11±0,65 до
21,63±0,75 ммоль/л т.е. на 11,7%, что свидетельствует о продолжении нарастания почечной
недостаточности, после проведения санации брюшной полости 0,02% раствором
хлоргексидина или его токсическим действием с достоверностью (р<0,05). К седьмым суткам
концентрация мочевины в крови приблизилась к норме и составил - 11,7±0,45ммоль/л. Данный
показатель в основной группе был ниже по сравнению с контрольной группой на протяжении
всего исследуемого интервала времени, что в первую очередь свидетельствует о более
быстром купировании воспалительного процесса в основной группе, где санация брюшной
полости проводилась методом фотодинамической терапии.
Показатель креатинина в плазме крови в обеих группах к концу первых суток имел
тенденцию к снижению, но более существенно это проявилось в основной группе – 10,1%
(14,9±0,54), а в контрольной группе на
7,9% (15,3±0,52) (табл.6).
Таблица 6
Динамика изменения креатинина у животных основной и контрольной групп
Группы
Сутки после оперативного вмешательства
1-е сутки
3-е сутки
5-е сутки
7-е сутки
основная
13,4±0,44
12,7±0,42
*
10,9±0,38
*^^^
7,9±0,30
*^^^
контрольная
14,1±0,52
16,7±0,60
^^
14,3±0,54
11,2±0,43
^^^
Средние
показатели
Креатинин
8,6±0,33 мкмоль/л
Примечание: *-достоверно по сравнению с показателями контрольной группой (*-Р<0,001)
^-
достоверно по сравнению с показателями 1 сутки (^^-Р<0,01; ^^^-Р<0,001)
К седьмым суткам показатели креатинина нормализовались и в контрольной группе
оставалась высокой с достоверностью (P<0,05).
К концу первых суток было отмечено, что показатель аспартатаминотрансферазы в
контрольной группе имел превышение активности данного фермента по сравнению с
основной группой на 25,1%, однако относительно данных показателя на момент операции,
активность фермента в контрольной группе повысился (показатель до операции -339,41± 4,5
Ед/л) на 4,5% с достоверностью (р<0,05) (табл. 7).
На третьи сутки показатель контрольной группы превышал основную на 11,4%. К
пятым суткам превышение фермента в контрольной группе превышала норму на 5,5%, в
основной группе АсАТ было в пределах нормы с достоверностью(р<0,05). В контрольной
БИОМЕДИЦИНА ВА АМАЛИЁТ ЖУРНАЛИ
|
ЖУРНАЛ БИОМЕДИЦИНЫ И ПРАКТИКИ
|
JOURNAL OF BIOMEDICINE AND PRACTICE
№2 | 2021
214
группе активность данного фермента к седьмым суткам послеоперационного периода
оставалась относительно высокой от нормы.
Таблица 7
Динамика изменения АсАТ (Ед/л) у животных основной и контрольной групп
Группы
Сутки после оперативного вмешательства
1-е сутки
3-е сутки
5-е сутки
7-е сутки
основная
266,2±8,2
***
212,4±7,3
*
^
161,7±6,0
**
^
165,3±6,2
^
контрольная
355,4±11,0
239,7±8,3
^
193,3±6,4
^
179,1±5,8
Средние
показатели
АсАТ
171,0±6,1 ед/л
Примечание: *-достоверно по сравнению с показателями контрольной группой (*-Р<0,05; **-
Р<0,01; ***-Р<0,001).
^-
достоверно по сравнению с показателями 1 сутки (^-Р<0,001)
К седьмым суткам концентрация АлАТ в основной группе нормализовалась, а в
контрольной оставалось умеренно повышенной с достоверностью (р<0,05).
Таблица 8
Динамика изменения АлАТ (Ед/л) у животных основной и контрольной групп
Группы
Сутки после оперативного вмешательства
1-е сутки
3-е сутки
5-е сутки
7-е сутки
основная
167,41±5,1
151,13±4,9
**^
147,11±4,6
^
138,2±4,2
^^^
контрольная
179,21±5,9
177,99±5,7
159,21±5,2
^
147,0±4,9
^^^
Средние
показатели
АлАТ
137,0±2,0 ед/л
Примечание: *-достоверно по сравнению с показателями контрольной группой (**-Р<0,01;
***-Р<0,001).
^-
достоверно по сравнению с показателями 1 сутки (^-Р <0,05; ^^^-Р<0,001)
Таким образом, изучение динамики гематологических и биохимических показателей
крови у животных с ОЭП позволило выявить, что использование метода ФДТ для санации
брюшной полости нормализует изучаемые биохимические показатели и не оказывает
патологических воздействий на гомеостаз животных с ОЭП и способствует активному
купированию острой полиорганной недостаточности.
Выводы:
1.
Водный раствор метиленовой сини в концентрации 0,05% при их внутрибрюшинном
введении на вызывает существенных изменений ультраструктурных элементов брюшины, а
0,02% раствор хлоргексидина сопровождается развитием выраженной десквамации и
очаговыми некрозами в висцеральной и париетальной брюшине лабораторных животных.
2.
Разработанный
метод
фотодинамической
санации
брюшной
полости
при
экспериментальном распространенном перитоните с использованием метиленовой сини в
концентрации 0,05% и светодиодного излучения в диапазоне 640±20 нм, при плотности
мощности 100 мВт/см
2
, плотности энергии 25-35 Дж/см
2
, время экспозиции 3-5 минут
позволяет улучшить результаты лечения ОЭП.
3.Полученные нами положительные результаты лечения в основной группе обусловлены
отсутствием повреждающего и наличием бактерицидного воздействия 0,05% водного
раствора метиленовой сини. При использовании для санации брюшной полости 0,02%
раствора хлоргексидина установлено, что раствор повреждает как висцеральную, так и
париетальную брюшину. С этим можно связать плохие результаты лечения ОЭП в
контрольной группе животных при использовании хлоргексидина.
4.Применение фотодинамической санации брюшной полости с использованием 0,05%
раствора метиленовой сини при ОЭП смягчает клинические проявления перитонита, ускоряет
выздоровление, повышает выживаемость экспериментальных животных, летальность
снижается более чем в 3 раза с 25 % до 7,5% в основной группе.
БИОМЕДИЦИНА ВА АМАЛИЁТ ЖУРНАЛИ
|
ЖУРНАЛ БИОМЕДИЦИНЫ И ПРАКТИКИ
|
JOURNAL OF BIOMEDICINE AND PRACTICE
№2 | 2021
215
5. Результаты экспериментальных исследований по применению ФДТ с МС позволяет
рекомендовать разработанный нами метод санации брюшной полости при перитоните в
клиническую практику.
Литература
1.
Исмаилов Г.М., Словоходов Е.К. Накопление фотосенсибилизатора второго поколения
грамположительными и грамотрицательными микроорганизмами в эксперименте.
Хирург. -2016.-4.-С.13-18.
2.
Косинец В.В. Идентификация и определение чувствительности к антибактериальным
препаратам основных возбудителей распространенного гнойного перитонита//Новости
хирургии. -Москва. - Том 20. - №5. -С.-62-69. - 2012.
3.
3.Куцевляк В.Ф., Пушкарь Л.Ю., Северин Л.В. Антибактериальная активность
фотодинамической терапии с применением различных фотосенсибилизаторов
(исследование in vitro) /Фотобиология и экспериментальная фотомедицина. - Харьков. -
2014.-№3,4.-С.78-83.
4.
Основные направления фотодинамической терапии в медицине / Р. М. Салмин [и др.] //
Новости хирургии. – 2008. – № 3. – С. 155-162.
5.
5.Песчаный В.Г. Влияние усовершенствованной методики фотодинамической терапии
на
клинико-иммунологические
проявления
при
хроническом
тонзиллите
у
детей/автореф. Дисс. канд.мед.наук…2011. -с.32.
6.
6.Пустий
С.А.
Клинико-экспериментальная
оценка
применения
монооксида-
содержащего газового потока в санации брюшной полости при распространенном
перитоните/ Автореф. Дисс…канд.мед.наук.-Ставрополь.-2018.-С.30
7.
Савельев В.С., Филимонов М.И., Ерюхин И.А. и др. // Хирургическое лечение
перитонита// Инфекции в хирургии 2007; №2. С. 7.
8.
Странадко, Е. Ф. Фотодинамическая терапия при гнойных заболеваниях мягких тканей /
Е. Ф. Странадко, У. М. Корабоев, М. П. Толстых // Хирургия.– 2000. – № 9. – C. 67-70.
9.
Черданцев Д.В., Первова О.В., Дятлов В.Ю. и др.//Современные возможности санации
брюшной полости при распространенном гнойном перитоните. Хирургия. -Москва. -
2013.-№10.-С.32-37.
10.
Чулиев
М.С.,
ТЕРЕБАЕВ
Б.А.
ЭРТА
ЁШДАГИ
БОЛАЛАРДА
ЮМШОҚ
ТЎҚИМАЛАРНИНГ
ЙИРИНГЛИ
ЯЛЛИҒЛАНИШ
КАСАЛЛИКЛАРИНИНГ
УЧРАШИ, ДИАГНОСТИКАСИ, ДАВОЛАШ ТАМОЙИЛЛАРИ ВА ПАРВАРИШИ
//ЖУРНАЛ БИОМЕДИЦИНЫ И ПРАКТИКИ. – 2021. – Т. 6. – №. 1.
