(Вестник^врача, 2012, № 2, Самарканд
177
Хамраев А.К.
ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ ВЫЯВЛЕНИЯ ЛЕКАРСТВЕННОЙ
УСТОЙЧИВОСТИ МИКОБАКТЕРИЙ ТУБЕРКУЛЕЗА В
КАРАКАЛПАКСТАНЕ
Ташкентский институт усовершенствования врачей (ректор - проф. Сабиров Д.М.)
There was a comparative analysis of specificity and sensitivity of Hain test as compared to MGIT test (iden-
tification of drug resistance on liquid media within computerized system). Sensitivity of a test was - 98,6%.
Specificity was - 100%. The results of DST under Hain test can be obtained within five and half hours. It is very
important for the prevention of nosocomial transmission of MDR-TB as it allows within maximum early period
of time to identify drug resistant pattern of a patient.
Туберкулез все еще является значительной
проблемой общественного здравоохранения по
всему миру. Множественный лекарственно-
устойчивый туберкулез является серьезной
проблемой особенно в развивающихся странах,
таких как страны Азии, Балтийский регион.
Начиная с 1991 года, в результате эконо-
мического спада и ослабления внимания к
проблеме туберкулеза со стороны органов
здравоохранения показатели заболеваемости
туберкулезом возросли в большинстве республик
бывшего Советского Союза. Периодические
исследования показали, что более 10% новых
случаев туберкулеза в Латвии и в некоторых
регионах
России
являются
случаями
с
множественной
лекарственно-устойчивой
формой туберкулеза.
Ситуация с ростом лекарственноустойчивой
формы
туберкулеза
вызывает
большую
озабоченность и в Республике Узбекистан.
Проведенное
с
участием
международной
организации «Врачи без границ» (ВБГ)
исследование в Республике Каракалпакстан
показало, что, несмотря на систематические
усилия, при использовании стандартизированной
схемы лечения препаратами первого ряда
значительное количество больных туберкулезом
не излечивается. Причиной этого явления
наличие лекарственно-устойчивых форм ми-
кобактерий туберкулеза. Высокие показатели
МЛУ-ТБ были выявлены посредством иссле-
дования лекарственной чувствительности (ИЛЧ),
проведенного ВБГ (Операционный Центр
Амстердам) в регионе в 2001-2002 годах 14 из 106
(13%) новых случаев и 43 из 106 (40%) ранее
леченых случаев были инфицированы МЛУ-ТБ.
В Каракалпакстане МЛУ-ТБ был обозначен
как
серьезная
проблема
общественного
здравоохранения. На основании результатов
исследования, в 2003 году Министерство здра-
воохранения Республики Каракалпакстан со-
вместно с международной организацией «Врачи
без границ» начали внедрение пилотной
программы по лечению МЛУ-ТБ в г. Нукусе и
Чимбайском районе. Была организована бак-
териологическая лаборатория в г. Нукусе, для
оказания поддержки деятельности программы по
лечению МЛУ-ТБ в Нукусе.
В Республике Каракалпакстан за период
октябрь 2003 года и 30 апреля 2010 года были
диагностированы и госпитализированы сле-
дующие больные с установленной лекарственной
устойчивостью: 41 (3,27%) - монорези- стентные,
161 (12,85%) - полирезистентные, 1044 (83,32%)
- с множественной лекарственной устойчивостью
и
7
(0,56%)
случаев
с
чрезвычайной
лекарственной устойчивостью. Рост показателей
множественного
лекарственноустойчивого
туберкулеза
привел
к
неотложной
необходимости соответствующих методов бы-
строй диагностики, с использованием точных и
достоверных тестов на лекарственную чув-
ствительность к препаратам первого и второго
рядов. Для контроля заболевания также имеется
необходимость в быстром выявлении больных
активным легочным туберкулезом и, по
возможности, своевременном начале лечения.
Целью данного исследования
была оценка
выполнения HAIN теста и оценка возможностей
данного метода в сравнении со стандартными
методами при исследовании различных форм
лекарственной
устойчивости
микобактерий
туберкулеза в регионе Приаралья.
Материал и методы:
HAIN тест, который
позволяет с помощью молекулярно-генетических
методов определить микобактерии туберкулеза и
их
устойчивость
к
двум
основным
противотуберкулезным препаратам первого ряда,
Изониазиду (Н) и Рифампицину (R) не-
посредственно из мазок положительных об-
разцов.
При изучении лекарственной чувствитель-
ности в бактериологической лаборатории г.
Нукуса используется несколько мегодик. На
начальном этапе в основном использовался метод
получения чистой культуры на твердых средах
Lowenstein-Jensen,
с
последующим
ис-
следованием лекарственной чувствительности
выделенной культуры. С 2005 года начато ис-
!
следование лекарственной чувствительности
<Вестни^ерачл, 2012, '№ 2, Самарканд
на жидкой среде - автоматизированной системе
Bactec-460 и MGIT-960. Увеличение количества
больных с подозрением на устойчивый
туберкулез потребовало использование уско-
ренных методов исследования лекарственной
чувствительности. Одной из таких методик
является метод TLA (Thin Layer Agar), в котором
выделение
микобактерий
туберкулеза
осуществляется путем посева на тонкий слой
агара в чашки Петри. Существует и используется
метод MODS (Microscopic observation drug
susceptibility assay) - анализ лекарственной
чувствительности путем микроскопического
наблюдения роста на жидкой среде Мидлбрук
7Н9, который позволяет получить чистую
культуры МВТ и определить лекарственную
чувствительность за 7-10 дней. Самым быстрым
из тестов при определении лекарственной
чувствительности МВТ является
HAIN
тест, при
котором ИЛЧ проводится на тест полоске сразу
после центрифугирования и деконтаминации
мокроты пациента. В данном исследовании нами
целенаправленно
отобраны
только
мазок
положительные, вновь выявленные пациенты.
Сбор мокроты осуществлялся в амбулаторных
учреждениях при обращении к врачам и новых
больных принятых на ДОТС лечение, которые
сдали образцы мокроты в течение первых 3-х
недель после начала лечения. Три образца
мокроты были собраны у каждого больного, и
была проведена микроскопия мазка мокроты для
установления статуса мазка при микроскопии.
Результаты:
Для изучения лекарственной
чувствительности при помощи HAIN теста был
проведен сравнительный анализ специфичности
и чувствительности HA1N теста в сравнении с
MG1T тестом (определение лекарственной
устойчивости
на
жидкой
среде
в
ав-
томатизированной системе).
102 образца из 106 (96,2%), включенных в
исследование, интерпретировались на множе-
ственную лекарственную чувствительность с
одним гетеро устойчивым случаем. Четыре
случая показали не интерпретируемые нерегу-
лярные сегментные образцы и не были включены
в окончательный анализ. Положительность
мазков мокроты колебалась от 1+ до 3+ в
соответствии с руководствами ВОЗ. Положи-
тельное предполагаемое значение на Н и R было
100% и отрицательное предполагаемое значение
76,0% и 97,1%, соответственно.
Результаты HAIN теста показали, что в 67
образцах из 102 (65,7%) была определена ус-
тойчивость к обоим препаратам (Н и R), у 24
(23,5%) была определена чувствительность к Н и
R, в 10 образцах (9,8%) выявили устойчивость к
Н и чувствительность к R, а в 1 (0,98%) образце -
чувствительность к Н и устойчивость
K
R.
При сравнении исследований лекарственной
чувствительности проводимых с помощью HAIN
теста и MGIT установлено, что выявленная в 67
образцах устойчивость к Н и R, в 19-
чувствительность к Н и R, в 9 - устойчивость к Н
и чувствительность к R при HAIN тесте, были
аналогичны с образцами исследованными по
методике MGIT. Расхождения были в 6 образцах,
которые были чувствительны к Н при HAIN тесте
и устойчивы при MGIT и в 1 образце -
чувствительном к R при HAIN тесте и
устойчивом при MGIT.
Ниже в виде таблиц предоставляются ре-
зультаты сравнительного анализа.
Таблица 1
________ MGIT __________________HAIN________
рифампицин изониазид рифампицин изониазид
устойчивый
69
83
68
77
чувствительный
33
19
34
25
всего
102
102
102
10
2
Изониазид (Н)
MGIT - «Золотой стандарт»
HAIN
Положительный
(устойчивый)
Отрицательный (чувствительный)
Всего
Положительный (устой-
чивый)
77
0
77
Отрицательный (чувст-
вительный)
6
19
25
Всего
83
19
102
Таблица 2
Общее количество исследований
Результаты сравнения с «золотым стандартом» для изониазида
■Всстниқврача, 2012, № 2, Самарканд
179
Чувствительность теста - 92,8%. Специ-
предполагаемое значение равно 100%, отрица-
фичность - 100%. При этом положительное
тельное предполагаемое значение равно 76,0%.
Таблица 3
Результаты сравнения с «золотым стандартом» для рифампицина
Рифампицин (R)
MGIT - «Золотой стандарт»
HAIN
Положительный
(устойчивый)
Отрицательный
(чувствительный)
Всего
Положительный
Ч.-
68
0
68
(устойчивый)
Отрицательный
1
33
34
(чувствительный)
Всего
69
33
102-
Чувствительность теста составила - 98,6%.
Специфичность - 100%, при этом положительное
предполагаемое значение равно 100%, от-
рицательное предполагаемое значение равно
97,1%.
Исследование лекарственной чувствитель-
ности при помощи HAIN теста результаты по-
лучены в течение пяти с половиной часов, тем
самым, делая его более быстрым по сравнению с
10-12 днями для положительной культуры и
ИЛЧ на MG1T и 3-6 недель для положительной
культуры и ИЛЧ на Lowenstein-Jensen. Это очень
важно для профилактики внутрибольничного
распространения МЛУ-ТБ форм, так как
позволяет максимально в ранние сроки
определить профиль лекарственной устойчи-
вости пациента. Он будет играть важную роль в
соблюдении мер инфекционного контроля, если
учесть тот факт, что более 38% всех ди-
агностических случаев с подозрением на ТБ,
обследованных в Нукусской бактериологиче-
ской лаборатории, были выявлены как МЛУ в
2009 году. Раннее выявление МЛУ-ТБ случаев
способствует улучшению мер инфекционного
контроля посредством улучшения разделения
больных в различных отделениях и своевре-
менного лечения.
Тем не менее, для успешного использования
данного метода рутинно, имеются несколько
важных аспектов: необходимо соответствующее
обучение персонала лаборатории, точное
контролируемое качество в отношении золотого
стандарта, и самое важное это то, что анализ
должен выполняться под непосредственным
контролируемым окружением во избежание
контаминации и ошибок. Кроме обучения
лабораторного персонала, необходимо также
подготовить инженерно-технический персонал
для обслуживания и поддержания оборудования.
Выводы
1 .Специфичность и чувствительность HAIN
теста для быстрой диагностики лекарственной
чувствительности микобактерий туберкулеза к
основным противотуберкулезным препаратам
первого ряда (Изониазиду и Рифампицину)
очень высокая и при сравнении не уступает
золотому стандарту ИЛЧ при помощи MGIT.
2.
Результаты исследования показали воз-
можность включения HAIN теста как метода
выявления лекарственной устойчивости мико-
бактерии туберкулеза в условиях Каракалпак-
стана.
3.
Несмотря на высокую стоимость каждого
теста, возможность определения профиля ле-
карственной устойчивости пациента в ранние
сроки, позволяет начать лечение своевременно и
принять меры инфекционного контроля.
Литература
1.
Сох, H.S, Orozco, J.D, Mfle. R, Ruesch-Gerdes.S et al (2004). Multidrug-resistant tuberculosis in Central Asia
Emerging Infectious Diseases, vol. 10, No.5, May.Pp.*65-872.
2.
Anti-tuberculosis drug resistance in the world. Report no. 4 Geneva: World Health Organization, 2008. (Publication
no. WHO/ HTM/TB/2008.394.)
