Микробиологические и иммунологические показатели эффективности лечении детей больных вирусным гепатитом «С»

134

ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТ

АТЬИ

Латексга нисбатан реакциялар кўпинча бо-

лалар ва катталардаги аллергик касалликлар-

нинг исталмаган клиник белгиларига сабаб

бўлади. Фақат пухта тўпланган анамнез ва за-

монавий in vitro ташхисот беморларда сезув-

чанликни аниқлай олади. Муҳим аллергенлар-

нинг ва оқсилларнинг ўзаро таъсир қилувчи

таркибий қисмлари компонент ташхисоти ёр-

дамида тиббиётда ютуқларга эришиш мумкин.

Даминова Ш.Б., Маткулиева С.Р., Назирова.С.Х., Абдиримова Г.И.

МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ И ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ

ЭФФЕКТИВНОСТИ ЛЕЧЕНИИ ДЕТЕЙ БОЛЬНЫХ ВИРУСНЫМ ГЕПАТИТОМ «С»

Ташкентский государственный стоматологический институт

Абдуллаева Д.Г., Абдуллаев М.А.

КОРОНАВИРУС COVID-19 ПАНДЕМИЯСИ ДАВРИДА ЛАТЕКСГА АЛЛЕРГИК

РЕАКЦИЯЛАР

Калит сўзлар

: латекс, озиқ - овқат маҳсулотлари, махсус иммуноглобулин Е (sIgE), молекуляр

ташхисот

The articles deals with study allergy detection

to latex among the patents with allergic diseases

by blotting panels (R-Biopharm, Germany)

allergens for in-vitro diagnosis to reveal risk

group workers of different branches, and, in

patients with symptoms of intolerance on some

vegetable food productions for the following

work-out of approaches in early diagnosis and

recommendations on prophylaxis of given

pathology.

Abdullaeva D.G., Abdullaev M.A.

ALLERGIC REACTIONS TO LATEX IN THE CONDITIONS OF THE COVID-19 CORONA-

VIRUS PANDEMIC

Key words:

latex, food products, specific immunoglobulins E (sIgE), molecular diagnosis

Цель исследования.

Изучить состояние микроэкологии и местных факторов защиты поло-

сти рта у детей больных вирусом гепатита «С».

Материал и методы.

Для решения поставленной цели, нами проведены микробиологиче-

ские и иммунологические исследования у 61 детей больных вирусным гепатитом «С». Все эти

дети были распределены в несколько групп. Все дети были разделены на 3 группы: 1-группу

составили 18 здоровых детей (контрольная группа); 2-группа 31 человек были дети с вирус-

ным гепатитом «С»; 3-группа состояла из детей с вирусным гепатитом «С» которым проводили

специальное лечение.

Результаты

. У детей больных вирусным гепатитом –«С» в полости рта, как правило проис-

ходит развитие дисбактериоза, характерной особенностью которого является достоверное сни-

жение анаэробной флоры и возрастание роста факультативной микрофлоры. Вирусы гепатита

«С» - оказывают влияние на состояние местных факторов защиты полости рта вызывая имму-

нодефицит, что и способствует развитию у больных детей вирусным гепатитом «С» синдрома

избыточного роста микробов.

Вирус гепатита «С» (HCV) входит в семей-

ство флавивирусов, это вирион, содержащий

оболочку геном с одноцепочной смысловой

РНК, и не имеющей верионной полимеразы.

Резервуаром HCV является человек. Пере-

дача происходит главным образом через кровь.

В настоящее время большинство возникаю-

щих болезней HCV связаны внутривенным

введением наркотиков.

Установлено, что НCV инфицирует в пер-

вую очередь гепатоциты, но нет данных под-

тверждающих, что вирус индуцирует цито-

патический эффект на клетки печени. Скорее

всего, гибель гепатоцитов происходит вслед-

ствие иммунной атаки цитотоксическими Т-

клетками (Levinson, 2015).

135

ORIGINAL

AR

TICLES

В клиническом течении HCV острые фор-

мы протекают легче чем при вирусном гепати-

те «В». Типичные для неё: лихорадка, потеря

аппетита, тошнота, рвота и желтуха, потемне-

ние мочи, обесцвечивание кала и повышение

уровня трансаминаз.

Для диагностики HCV производят опре-

деление присутствия антител при помощи

ELISA. Антигенам в анализе служит реком-

бинантный белок, сформированные из трёх

иммунологических стабильных HCV- белков

и не включает высоко вариабельные оболочеч-

ные белки.

Для лечения острого гепатита «С» аль-

фа-интерфеном значительно снижает число

пациентов, переходящих в состоянии хрони-

ческого носительства. Лечением выбора для

хронического гепатита в «С» служит комби-

нация печ-интерферона (Пегасис) и рибава-

рина. Печ- интерферон представляет собой

альфа-интерферон, коньюгированный с поли-

этиленглюколем. Вакцины и сыворотки нет и

не доступны.

Известно, что возникновению и прогрес-

сированию большинства заболеваний макро-

организма, и в том числе в полости рта, во

многом способствует патогенная флора, это

обстоятельство постоянно побуждает учёных

к поиску и разработке новых антибактери-

альных препаратов. Вместе с тем, широкое,

а подчас необоснованное и бесконтрольное

применение химиотерапевтических препара-

тов приводит к формированию резистентных

штаммов микробов к лекарственным препара-

там (Царев В. Н, 2016; Мухамедов И. М, 2017;

Ризаев Ж. А, 2015; Даминова Ш. А, 2010г).

Исходя из всего этого, можно полагать, что

дальнейшее исследование по созданию и ис-

пытанию эубиотиков (Бактолор, Flor biоlakt)

особенно с учётом детского организма и мест-

ного применения, несомненно является пер-

спективным направлением, так как позволяет

не только пролонгировать за счёт его длитель-

ного депонирования и антагонистического

воздействия на патогенную флору.

Дети на нашей планете составляют треть

населения, а в условиях Узбекистана- более

50% населения. От здоровья детей зависит

будущее страны, только здоровое поколение

с гармоничным развитием физических и ду-

ховных сил способно решать вопросы даль-

нейшего развития и укрепления общества,

обеспечить его процветания. В связи с чем,

охрана здоровья детей является не столько

медицинской, сколько социальной проблемой

любого государства.

Интересно отметить, что активный кон-

такт с внешней средой осуществляется нашим

организмом через полость рта, в частности

попадание самых разнообразных антигенов,

обуславливает то, что она является «театром»

действия различных аффекторных и эффек-

торных механизмов иммунной системы. Уста-

новлено, что на уровне слизистой оболочки,

подслизистого слоя полости рта и лимфоидно-

го аппарата челюстно-лицевой области в той

или иной степени реализуются все важнейшие

функции иммунной системы (Мухамедов И.

М, 2005).

Исходя из вышеизложенных мы поставили

перед собой цель, изучить состояние микроэ-

кологии и местных факторов защиты полости

рта у детей больных вирусом гепатита «С».

Материал и методы

Для решения поставленной цели, нами

проведены микробиологические и иммуно-

логические исследования у 61 детей больных

вирусным гепатитом «С». Все эти дети были

распределены в несколько групп:

1. Первую группу составили дети в коли-

честве 18 здоровых лиц, т.е. контрольная груп-

па;

2. Во вторую группу вошли дети больные

вирусным гепатитом «С» в количестве 31 че-

ловека.

3. Следующую группу составили дети

больные вирусным гепатитом «С», которым

проведено специальное лечение.

У всех этих детей, как правило забирали ро-

товую жидкость методом смыва со слизистой

оболочки полости рта (путем полоскания).

Для этого были подготовлены пробирки с 4,5

мл стерильного физиологического раствора

(Ефимович О.И, 2002). Полученный этим спо-

собом материал считали, как первое разведе-

ние (10’). Из этого материала в лаборатории

готовили ряд серийных разведений в после-

дующем из них определённый объем засевали

на поверхность дифференциально-диагности-

ческих питательных сред. Для этого нами ис-

пользованы высокоселективные питательные

среды производства индийской фирмы «Hei

Media», такие как: среда Эндо, желточно-соле-

вой агар, Сабуро-агар, Мрс-4 и др.

136

ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТ

АТЬИ

При этом, посевы на кровяном агаре, агаре

Эндо, молочно-солевом агаре и среде Сабуро

культивировали в обычных условиях 18-24

часа при температуре 37°С, культивирование

посевов для выделения анаэробов осущест-

вляли в анаэростате путем использования га-

зогенераторных пакетов (см. рисунок).

Анаэростат с газогенераторным пакетом

По истечении указанных сроков, все засе-

янные чашки вынимали из термостата, произ-

водили подсчет выросших колоний микробов,

определяли групповую и видовую принад-

лежность изолированных колоний на основе

данных микроскопии мазков окрашенных по

Граму, характера роста на селективных пита-

тельных средах и биохимических свойств.

При работе по модифицированной мето-

дике результат учитывали по последнему раз-

ведению в котором получен рост бактерии,

количество микроорганизмов подсчитывали

по следующей формуле: К= 200 × Р(КОЕ∕мл).

Количество микробов каждого вида выражали

в lg КОЕ∕мл.

Иммунологические исследования:

Параллельно с микробиологическими ис-

следованиями у одних и тех же детях во всех

клинических группах изучали местные факто-

ры защиты полости рта, такие как фагоцитар-

ную активность нейтрофилов, уровень лизо-

цима и титр иммуноглобулина А- секреторной

фракции (s Ig A).

Для определения фагоцитарной активности

нейтрофилов в ротовой жидкости проводили

по модифицированной методике Антонова

А.В. (1996г). Для этого отобранную ротовую

жидкость очищали, промывали забуферен-

ным раствором и центрифугировали при 1000

об∕ мин над осадочную жидкость сливали, а

к осадку добавляли 0,5 мл физиологического

раствора.

К 0,2 мл полученной взвеси в пробирке до-

бавляли 0,1 мл взвеси частиц латекса (5×108 в

1мл) диаметром 0,8 мкм. Смесь инкубировали

во влажной камере 30 мин при 37°С. В после-

дующем из этой смеси готовили мазки по типу

мазков крови, окрашивали по Романовскому-

Гимза. В мазках подсчитывали не менее 100

нейтрофилов с латексом и без него в каждом

препарате, определяли показатель фагоцитоза

и выражали в процентах.

Активность лизоцима в ротовой жидкости

определяли при помощи способа предложе-

ного Алиевым Ш.Р. (2004г), которая включала

в себя использование стерильных дисков из

фильтровальной бумаги. В этих целях брали

пинцетом бумажные диски (схожие с антибио-

тиковыми дисками) и тщательно пропитывали

их в ротовой жидкости. После чего эти диски

укладывали на поверхность питательного ага-

ра Мюллер Хинтона в чашках Петри, засеян-

ные газоном суточной культурой M. Luteus

штамп № 003596∕ 126 национальная коллекция

микроорганизмов инфекций человека НИИЭ-

МИЗ МЗ РУз, посевы инкубировали в термо-

стате при температуре 37°С, активность лизо-

цима в ротовой полости жидкости определяли

137

ORIGINAL

AR

TICLES

по методу диффузии в агаре.

Определение титра иммуноглобулина клас-

са А секреторной фракции (s Ig A). В основу

метода положен способ Манчини, который ос-

нован на измерении диаметра кольца преципи-

тации образующегося при внесении ротовой

жидкости в лунку, вырезанного в слое агара,

в котором предварительно диспергирована мо-

носпецифические сыворотки. В стационарных

условиях опыта диаметр кольца преципитации

прямо пропорционален концентрации имму-

ноглобулина. Часть исследования этого на-

правления осуществлена иммуноферментным

способом (ИФА).

Результаты и обсуждение

Известно, что неотъемлемой частью микро-

экосистемы полости рта является нормофлора,

обеспечивающаяся, также как в кишечнике

колонизационную резистентность (Ленцнер

А.А. и соавт, 1997; Горская Е.М. и соавт, 1992).

Микрофлора полости рта рассматривается

как первичная мишень для любого фактора,

который прямо или опосредованно влияет на

адгезию и колонизационную резистентность

резидентной, транзиторной и добавочной ми-

крофлоры (Шендеров Б.А, 1999; Воробьев

А.А. и соавт, 1999). При этом важнейшими

детерминантами, вызывающими обитание в

этом отделе пищеварительного тракта микро-

бов являются состояние зубочелюстной систе-

мы, пища, окислительно- восстановительный

потенциал, степень резистентности слизистых

оболочек полости рта.

Учитывая вышеизложенное, нами также

проведено изучение состояния колонизацион-

ной резистентности различных участков по-

лости рта: десна, поверхность языка, щеки и

неба, как у здоровых, так и у больных детей

страдающих хроническим вирусным гепати-

том – «С».

Для этого нами использованы гильзы из не-

ржавеющей стали с определенной глубиной и

поверхностью, которые после тщательной сте-

рилизации заливались питательными среда-

ми, помещались в стерильные чашки Петри и

хранились в холодильнике. При приеме детей

производили посев отпечатками, для этого эти

гильзы прикладывались к поверхности слизи-

стых оболочек десны, языка, щеки и неба на

2-3 сек, затем эти гильзы опять помещали в

чашки Петри и заносили в термостат при тем-

пературе 37˚С на 24-48 часов. По истечении

этих сроков, чашки вынимали, забирали гиль-

зы и делали подсчет выросших колоний (КОЕ ̸

см2), после чего у выросших колоний изучали

морфологию, культурные и тинкториальные,

биохимические свойства, тем самым устанав-

ливали вид выросшего микроба.

Исследование бактериальной колонизации

в полости рта у здоровых детей позволило

установить, что несмотря на значительный ди-

апазон вариации, микрофлора у детей, прожи-

вающих в условиях Узбекистана, характери-

зуется стабильным постоянством. По данных

этих исследований установлено, что плотность

микробной популяции в полости рта у здоро-

вых детей является основополагающий харак-

теристикой сообществ и во многом зависит от

топографии экологической ниши. Наибольшее

ее значение отмечено в десне (4,0±0,3 КОЕ ̸

см2), минимальное на слизистых оболочках

неба (1,30±0,1 КОЕ ̸ см2). При этом преобла-

дающей по численности и видовому составу

в биоценозе была грамположительная флора,

которая колонизировала 100% обследуемых.

Интересно отметить, что основную часть ми-

крофлоры полости рта у здоровых детей со-

ставили представители рода Streptococcus, при

этом доминирующим видом был Str. Salivaius.

Среди грамположительной кокковой флоры

значительное место в колонизации занимали

стафилококки, при этом их количество преоб-

ладало на поверхности языка и десне (2,30±0,1

и 3,60±0,2 КОЕ ̸ см2). Среди других изучаемых

групп микроорганизмов в вопросах колониза-

ции полости рта этим свойством очень слабо

обладали грамотрицательные палочки (эшери-

хии и клебсиеллы), а грибы рода Кандида об-

ладали способностью колонизировать только

слизистые оболочки языка и десны.

Интересно отметить, что общее количество

анаэробов и факультативной группы микробов

у здоровых детей почти одинаковы. При этом

в факультативной группе микробов домини-

рующие положение занимают стафилококки

и стрептококки, среди стрептококков наиболь-

шую картину составляют Str. Salivarius.

Наряду с этими исследованиями у одних и

тех же детей больных вирусным гепатитом –

«С» проведены количественные и качествен-

ные анализы микрофлоры ротовой жидкости.

Полученные данные при этих исследованиях

показали в микроэкологии полости рта у детей

больных хроническим вирусным гепатитом

–«С» наблюдаются существенные сдвиги в

микроэкологии полости рта как в анаэробной,

138

ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТ

АТЬИ

Литература

1. Levinson W. – Review of Medical Microbiology and Immunology. University of California,

2015:600.

2. Царев В.Н. Микробиология и иммунология полости рта. Учебное пособие, М., 2016:600.

3. Мухамедов И.М. Микробиология, вирусология ва иммунология, Дарслик, Т-2018:700.

4. Ризаев Ж.А. Стоматологияда клиник микробиология. Дарслик 2016:300.

5. Даминова Ш.Б. Микробиология, вирусология и иммунология, Учебник, 2011:800.

6. Ефимович О.И. Способ забора ротовой жидкости. ЖМЭИ, 2016:21-23.

7. Ленцнер А.А. Способ определения активности микроорганизмов. ЖМЭИ, 2009:24-28.

8. Горская Е.М. Адгезия микробов к эпителиальным клеткам.

9. Алиев Ш.Р. Способ определения биологической активности лизоцима в слюне, 2004, Т.,

клиник микробиология, учебное пособие.

так и в факультативной флоре. Так, в анаэ-

робной группе микробов отмечается их до-

стоверное снижение, особенно это выражено

у лактобактерии, их количество составило lg

3,10±0,1 КОЕ/мл, это более чем на 2 порядка

ниже контрольных показателей. В то же вре-

мя, наиболее выраженные достоверные сдвиги

происходят в факультативной группе микро-

бов.

Среди грамположительной кокковой фло-

ры наглядно видно снижение количества Str.

Salivarius, но на этом фоне идёт рост высева-

емости Str. Mutans и Mitis. Однако в кокковой

флоре настораживает другое, это появление

роста штаммов золотистого стафилококка

и пиогенного стрептококка, которые имеют

большой набор ферментов патогенности, кото-

рые и будут определять мониторинг состояния

полости рта. Среди грамотрицательной флоры

отмечено возрастание количества эшерихий и

протея.

Таким образом, проведенные микробиоло-

гические исследования свидетельствуют, что у

детей больных хроническим вирусным гепати-

том- «С» в полости рта наблюдается синдром

избыточного роста микробов. При этом если у

здоровых детей в полости рта доминирующее

положение занимают стрептококки и лактобак-

терии, то у больных детей картина полностью

меняется и превалирующими штаммами у них

становятся грибы рода Кандида и стафилокок-

ки, и на этом фоне достоверно уменьшаются

количества лактобактерий и стрептококков.

Наряду с количественным и качественным

анализами микроэкологии полости рта у детей

больных хроническим вирусным гепатитом

–«С». У этих же детей нами проведено изу-

чение состояния местных факторов защиты

ротовой жидкости. При этом в основном изу-

чали: титр лизоцима, показатель фагоцитоза и

уровень секреторного иммуноглобулина клас-

са А (s Ig A). Полученные данные при этих ис-

следованиях представлены в рисунке.

Из рисунка видно, что у больных детей ХВС

в полости рта отмечается иммунодефицит по

всем изучаемым параметрам. При этом титр

лизоцима у этих больных составил 13,7 ±0,5

мг/%, показатель фагоцитоза 42,9±1,4мг/%.

Уровень секреторного иммуноглобулина был

равен 1,2÷0,1 г/л. Основываясь на этих циф-

рах можно полагать, что среди всех изучаемых

параметров наибольший дефицит составля-

ет показатель фагоцитоза. По всей видимо-

сти, вирус гепатита-«С», также как и другие

патогенные вирусы человека оказывают им-

мунодепрессивное воздействие и вызывает

иммунодефицит не только в общей системе

иммунитета, но отражается и на местных фак-

торах защиты полости рта.

Вполне очевидно, что снижение в целом

всех показателей иммунитета, как клеточного,

так и гуморального и приводит в полости рта

у этих больных к синдрому избыточного роста

микробов.

Выводы

1. У детей больных вирусным гепатитом

–«С» в полости рта, как правило происходит

развитие дисбактериоза, характерной особен-

ностью которого является достоверное сни-

жение анаэробной флоры и возрастание роста

факультативной микрофлоры.

2. Вирусы гепатита «С» - оказывают вли-

яние на состояние местных факторов защиты

полости рта вызывая иммунодефицит, что и

способствует развитию у больных детей ви-

русным гепатитом –«С» синдрома избыточно-

го роста микробов.

139

ORIGINAL

AR

TICLES

Мақолада С вирусли гепатитибилан

оғриган 61 нафар боланинг микробиологик

ва иммунологик кўрсаткичлари ўрганилган.

Барча болалар 3 гуруҳга бўлинган: 1-гуруҳ 18

нафар соғлом боладан иборат бўлган (назорат

гуруҳи); 2-гуруҳни вирусли гепатити С га

чалинган 31 бола бола; 3-гуруҳни - вирусли

гепатит С билан оғриган ва махсус даво

усулида даволанган болалар ташкил қилди.

Даминова Ш.Б., Маткулиева С.Р., Назирова.С.Х., Абдиримова Г.И.

ВИРУСЛИ ГЕПАТИТ С БИЛАН ОҒРИГАН БОЛАЛАРНИ ДАВОЛАШ

САМАРАДОРЛИГИНИНГ МИКРОБИОЛОГИК ВА ИММУНОЛОГИК

КЎРСАТКИЧЛАРИ

Калит сўзлар:

вирусли гепатит C, микробиологик ва иммунологик кўрсаткичлар

The article deals with study microbiologic

and immunologic indices of 61 children with Vi-

rus Hepatitis C. All children were divided into 3

groups: 1-group had 18 healthy children (control

group); 2-group had 31 children with Virus Hepa-

titis C; 3-group were patients with Virus Hepatitis

C who were undergone to special treatment.

Daminova Sh.B., Matkulbeva S.R., Nazirova S.H., Abdirimova G.I.

MICROBIOLOGIC AND IMMUNOLOGIC INDICES OF TREATMENT EFFICACY FOR

PATIENTS WITH VIRUS HEPATITIS “C”

Key words

: Virus Hepatitis C, microbiologic and immunologic indices

Ниязова М. Т., Умарова М. Э.

РАЗВИТИЕ РЕЧИ У ДЕТЕЙ ДОШКОЛЬНОГО ВОЗРАСТА ПОСЛЕ КОХЛЕАРНОЙ

ИМПЛАНТАЦИИ

Ташкентский педиатрический медицинский институт

Цель исследования:

изучить особенности восприятия устной речи детьми дошкольного

возраста после операции по кохлеарной имплантации.

Материалы и методы.

Проводилось анкетирование родителей детей дошкольного возраста

с кохлеарным имплантом, а также проводилось исследование уровня восприятия устной речи

по следующим компонентам: выполнение поручений, сопровождение игровой деятельности ре-

чью, диалогическая речь, просодические компоненты речи (интонация).

Результаты.

Таким образом, кохлеарная имплантация - это, возможно, единственный

шанс для глухого малыша максимально приблизиться к нормально слышащим сверстникам,

пусть не сразу, через несколько лет, но так, чтобы практически ничем не отличаться от них.

Главное реализовать представившуюся возможность путем ежеминутного целенаправленного

общения с ребенком, ежедневных занятий. Этот путь труден, но возможен.

Кохлеарная имплантация – это комплексная

система мероприятий, направленная на

полноценную социальную адаптацию детей

и взрослых с глубокой потерей слуха. Она

включает отбор пациентов; хирургическое

вмешательство с целью восстановления

слухового ощущения путем электрической

стимуляции волокон слухового нерва.

И последний, а также «наиболее важный и

длительный этап после проведения кохлеарной

имплантации – это реабилитация, основными

задачами которой являются подключение

речевого процессора и педагогическая работа

с имплантированным в разных направлениях,

в том числе и по подготовке его к общению в

обществе слышащих» [2].

Кохлеарный имплант – это электронное

устройство,

выполняющее

функции