16
ПРОБЛЕМЫ
БИОЛОГИИ
И
МЕДИЦИНЫ
4 (67) 2011
Байкулов
А
.
К
.
ДИНАМИКА
РАЗВИТИЯ
ЭНДОГЕННОЙ
ИНТОКСИКАЦИИ
ПРИ
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ
ТЕРМИЧЕСКОМ
ОЖОГЕ
Ташкентская
медицинская
академия
При
ожогах
в
зоне
термического
поражения
происходит
образование
большого
количества
биологически
высокого
активных
веществ
,
медиаторов
,
которые
являются
пусковым
механизмом
для
развития
местных
сосудисто
-
мезинхемальных
изменений
,
являющийся
сутью
воспаления
.
Они
включают
биогенные
амины
(
гистамин
,
серотонин
),
кинины
,
оксиданты
,
метаболиты
арахи
-
доновой
кислоты
,
цитокины
и
др
.[1].
Известно
,
что
ожоговая
травма
закономерно
сопровождается
активацией
перекисного
окисле
-
ния
липидов
(
ПОЛ
)
в
различных
органах
и
тканях
.
В
патогенезе
глубоких
нарушений
клеточного
метаболизма
при
ожоговой
травме
значительная
роль
отводится
активации
ПОЛ
,
сопровождающе
-
гося
изменением
липидного
компонента
клеточных
мембран
,
а
следовательно
и
проницаемости
последних
[2].
Среди
оксидантов
важная
роль
принадлежит
кислородным
радикалам
–
нестабильным
метабо
-
литам
кислорода
,
имеющим
непарный
электрон
и
потому
обладающими
мощным
окислительным
потенциалом
.
Одним
из
основных
таких
радикалов
является
гидроксильный
анион
(-
ОН
-
).
Он
об
-
разуется
в
результате
ферментативных
реакций
.
Сразу
после
ожога
образование
(-
ОН
-
)
происходит
в
тканях
при
ишемии
и
ухудшении
их
перфузии
вследствие
нарушений
микроциркуляции
в
облас
-
ти
поражения
.
В
результате
действия
ксантиноксидазы
на
субстраты
ксантина
и
гипоксантина
в
присутствии
кислорода
происходит
образование
супероксида
кислорода
(
О
2
-
)
и
перекиси
водорода
(
Н
2
О
2
).[6]
Изучения
свойств
полиглюкозаминных
соединений
природного
происхождения
является
акту
-
альной
задачей
медицины
,
так
как
данные
вещества
обладают
широким
спектром
биологической
активности
.
В
частности
представляет
интерес
-
хитозан
и
его
производные
,
получаемых
из
раз
-
личных
природных
объектов
.
В
связи
вышеизложенным
,
цель
исследований
-
изучение
молеку
-
лярных
механизмов
антитоксического
действия
производных
хитозана
при
термической
травме
.
Материалы
и
методы
исследования
.
В
качестве
опытных
животных
использовали
белых
бес
-
породных
крыс
с
массой
тела
140-160
г
,
которым
под
эфирным
наркозом
воспроизводили
термиче
-
ский
ожог
на
депелированной
поверхности
тела
,
который
составлял
20%.
Через
1-
час
после
ожога
наносили
на
раны
препараты
хитозана
(
хитозан
+2%
уксус
кислота
+
глутаровый
альдегид
+
фурацилин
1-
опытная
группа
;
хитозан
+2%
уксус
кислота
+
глутаровый
аль
-
дегид
2-
опытная
группа
),
левомеколь
(3-
опытная
группа
),
физиологический
раствор
(4-
контрольная
группа
).
Препараты
наносили
однократно
во
весь
срок
эксперимента
.
На
1, 3, 7
и
10
день
эксперимента
крыс
с
каждой
группы
забивали
одномоментной
декапитаци
-
ей
в
холодной
комнате
при
температуре
0 - +2 °
С
.
Собирали
кожу
с
ожоговой
раной
и
кровь
.
На
моделях
кожи
проводились
морфологические
и
молекулярные
исследования
.
В
сыворотке
крови
определяли
интенсивность
ПОЛ
,
СМП
и
ССЭ
.
Методы
определения
интенсивности
ПОЛ
О
состоянии
ПОЛ
в
сыворотке
крови
и
гомогенате
тканях
судили
по
содержанию
малонового
диальдегида
(
МДА
).
Принцип
метода
основан
на
взаимодействии
тиобарбитуровой
кислоты
с
ма
-
лоновым
диальдегидом
,
образующимся
при
переокислении
ненасыщенных
жирных
кислот
,
имею
-
щих
2-3
диеновые
связи
.
Расчет
содержания
продуктов
,
реагирующих
с
тиобарбитуровой
кисло
-
той
проводили
с
учетом
молярной
экстинкции
малонового
диальдегида
,
равного
1,56·10
6
моль
см
-1
в
нмоль
МДА
/
мг
белка
[3]
Среднемолекулярные
петиды
(
СМП
)
определяли
по
методу
Н
.
И
.
Габриэляна
(1982
г
)
детекцией
надосадка
,
освобожденного
от
грубодисперсных
белков
,
который
осуществляли
после
предвари
-
тельного
разведения
,
прии
котором
к
0,5
мл
надосадочной
жидкости
добавляли
4,5
мл
дистиллиро
-
ванной
воды
.
Измерение
проводили
на
спектрофотометре
в
УФ
-
свете
при
длине
волны
254
нм
.
Уровень
СМП
выражали
в
единицах
,
количественно
равных
показателям
экстинции
[4].
Сорбционную
способность
эритроцитов
определяли
с
использованием
реактива
0,025%
мети
-
ниловый
синий
,
который
даёт
окрашенный
диазопродукт
с
максимумом
поглощения
при
630
нм
.
В
качестве
стандарта
использовали
физиологический
раствор
[5].
Обсуждения
результатов
.
Проведенные
эксперименты
показали
,
что
через
3
дня
термической
травмы
у
подопытных
животных
сопровождалось
серьезными
сдвигами
в
изучаемых
показателях
17
ПРОБЛЕМЫ
БИОЛОГИИ
И
МЕДИЦИНЫ
4 (67) 2011
сыворотки
крови
.
Так
,
содержание
ССЭ
в
сыворотке
крови
выросло
на
102,9%
по
сравнению
с
контрольной
группой
,
соответственно
.
Наименьшее
увеличение
из
исследуемых
показателей
на
-
блюдалось
со
стороны
СМП
.
На
7
сутки
,
эксперимента
,
изучаемые
показатели
продолжали
возрастать
,
превышая
значения
контрольных
крыс
на
113,7; 198,3
и
22,7%
соответственно
значениям
сорбционной
способностью
эритроцитов
,
средних
молекулярных
пептидов
.
Причем
,
в
большей
степени
это
проявлялось
в
со
-
держании
средних
молекулярных
пептидов
,
значения
которых
выросло
в
2,17
раза
по
сравнению
с
его
уровнем
на
3-
й
день
эксперимента
.
К
концу
10
дня
воспроизведения
термического
ожога
отмечалось
незначительное
увеличение
содержания
средних
молекулярных
пептидов
(
на
0,1%),
по
сравнению
с
уровнем
этих
показателей
,
наблюдаемых
на
7-
й
день
эксперимента
.
Наблюдались
изменения
со
стороны
уровня
сорбционной
способности
эритроцитов
в
сыворотке
крови
.
Однако
,
изучаемые
показатели
достоверно
превыша
-
ли
нормативные
значения
на
53,2; 60,2
и
472,9%,
соответственно
ССЭ
,
СМП
(
Таблица
1).
Таким
образом
,
экспериментальный
термический
ожог
проявляется
существенными
сдвигами
не
только
содержанием
молекулярных
пептидов
,
но
и
сорбционной
способностью
эритроцитов
.
В
наших
экспериментах
3 -
дневной
термический
ожог
приводило
к
увеличению
МДА
на
196,8%
соответственно
.
К
концу
седьмого
дня
эксперимента
термического
ожога
привело
к
увели
-
чению
содержания
МДА
в
сыворотке
крови
на
198,3%,
а
на
10-
сутки
содержания
МДА
возрос
на
205,1%
соответственно
со
сроком
семь
дней
(
Таблица
2).
Таким
образом
,
полученные
данные
подтверждают
,
что
экспериментальный
термический
ожог
сопровождается
накоплением
конечного
продукта
перекисного
окисления
липидов
в
сыворотке
крови
.
Наблюдаемая
активация
ПОЛ
свидетельствует
об
увеличении
образования
реакционно
-
способных
радикалов
.
Как
видно
из
представленных
результатов
в
таблице
3
на
1
сутки
эксперимента
и
после
при
3
дневного
лечения
в
первой
группе
содержание
ССЭ
уменьшается
на
0,89%
по
сравнению
с
живот
-
ными
контрольной
группы
после
3-
х
дневного
лечения
.
Отмечается
явная
тенденция
к
нормализа
-
ции
их
уровня
на
7-
ой
и
10-
й
день
лечения
.
Уровень
ССЭ
у
леченных
животных
1-
ой
группы
на
47,4
и
24,5%
превышает
таковой
у
контрольных
животных
.
При
лечении
в
течении
3-, 7-
и
10-
и
Таблица
– 1.
Изменение
показателей
ССЭ
,
СМП
и
тимоловой
пробы
у
животных
с
термиче
-
ским
ожогом
(M±m, n=10)
Показатели
ССЭ
СМП
контрольная
группа
46,7 ± 0,03
0,211 ± 0,004
3-
й
день
термического
ожога
99,78 ± 0,007
а
0,230 ± 0,006
7-
й
день
термического
ожога
99,78 ± 0,002
а
0,259 ± 0,002
10-
й
день
термического
ожога
99,86 ± 0,004
а
0,338 ± 0,003
а
Примечание
:
Достоверное
отличие
P<0,05:
а
–
от
контрольной
группы
,
б
,
в
–
от
показателей
3-, 7-
го
дня
соответственно
Таблица
– 2.
Изменение
малонового
диальдегида
у
животных
с
термическим
ожогом
(M±m,
n=10)
Показатели
МДА
Контрольная
группа
5,85 ± 0,49
3-
й
день
термического
ожога
17,36 ± 0,23
а
7-
й
день
термического
ожога
17,45 ± 0,71
а
Примечание
:
Достоверное
отличие
P<0,05:
а
–
от
контрольной
группы
Таблица
3.
Изменение
сорбционной
способности
эритроцитов
в
сыворотке
крови
при
коррек
-
ции
экспериментальной
термической
травмы
Показатель
3
дня
лечения
7
дней
лечения
10
дней
лечения
Интактная
группа
46,7±0,02
Конрольная
группа
99,97±0,005
а
99,84±0,12
а
99,78±0,007
а
1-
я
группа
89,12±0,02
а
,
б
68,84±0,02
а
,
б
58,14±0,01
а
,
б
2-
я
группа
91,8±0,06
а
,
б
,
в
,
г
85,81±0,01
а
,
б
,
в
,
г
66,89±0,01
а
,
б
,
в
,
г
3-
я
группа
96,88±0,02
а
,
б
,
в
,
г
90,87±0,02
а
,
б
,
в
,
г
77,79±0,01
а
,
б
,
в
,
г
Примечание
:
Достоверное
отличие
P<0,05:
а
–
от
интактной
группы
,
б
,
в
,
г
–
от
показателей
контрольной
, 1-, 2-,
3-
группы
соответственно
18
ПРОБЛЕМЫ
БИОЛОГИИ
И
МЕДИЦИНЫ
4 (67) 2011
дней
животных
второй
группы
,
показатель
ССЭ
был
ниже
показателей
контрольной
группы
на
8,1; 14,4
и
32,9%
соответственно
.
Этот
эффект
отличается
у
животных
группы
сравнения
–
левоме
-
коль
.
Снижение
ССЭ
под
действием
левомеколя
у
леченых
крыс
на
3-
е
сутки
лечения
составляет
2,9%.
В
тоже
время
сорбционная
способность
эритроцитов
у
крыс
леченных
левомеколем
превы
-
шает
уровень
контрольных
на
8,9
и
21,9%
на
7-
и
10-
е
сутки
лечения
соответственно
.
При
коррекции
экспериментальной
термической
травмы
в
1-
ой
группе
отмечалось
снижение
СМП
на
10,4; 41,3
и
57,4%
на
3-, 7-
и
10-
й
день
коррекции
,
в
то
время
под
действием
препарата
они
уменьшились
в
эти
же
сроки
на
2,1; 60,6
и
82,2%
соответственно
.
Менее
существенно
изменя
-
лось
содержание
СМП
у
2-
и
3-
ий
исследуемой
группы
.
Коррекция
препаратами
2-
и
3-
группы
на
3
-
й
день
лечения
было
ниже
показателей
контрольной
группы
в
1,09
и
1,05
раза
,
на
7-
е
сутки
в
1,85,
1,12,
на
10-
й
день
коррекции
в
13,0
и
5,7
раза
соответственно
(
Таблица
4).
В
результате
проведенных
экспериментов
установлено
,
что
впервой
опытной
группе
уже
через
3-
дня
снижается
конечный
продукт
ПОЛ
в
сыворотке
крови
на
41,6%,
и
составляло
10,14±1,61
нмоль
/
мл
,
а
через
7-
и
10
дней
лечения
его
снижение
составляло
60,2
и
64,4%
по
сравнению
с
кон
-
трольной
группой
.
Таким
образом
,
лечение
экспериментальной
термической
травмы
хитозаном
в
течение
10
дней
практически
нормализует
показатели
средних
молекулярных
пептидов
и
сорбционную
способ
-
ность
эритроцитов
,
тогда
как
под
действием
левомеколя
лишь
показатели
средних
молекулярных
пептидов
.
Эти
данные
свидетельствуют
,
что
эффективность
антитоксического
действия
хитозана
несколько
выраженное
,
чем
у
левомеколя
.
Наряду
с
этим
у
крыс
с
экспериментальной
термической
травмой
второй
опытной
группы
не
вызывает
выраженную
стимуляцию
содержания
продуктов
перекисного
окисления
липидов
.
На
3
день
его
применения
содержание
МДА
в
сыворотке
крови
снижается
на
55,3,
на
7-
сутки
на
38,6%,
а
через
10
дней
лечения
по
сравнению
с
контрольной
группы
понижен
на
40,0%.
Отмечалось
небольшое
снижение
содержания
МДА
на
3-
и
7-
дни
эксперимента
по
сравнению
с
контрольной
группой
.
Они
достигали
17,32±1,74
и
13,24±0,23
нмоль
/
мл
при
коррекции
левоме
-
колем
; 7,87±0,17
нмоль
/
мл
на
10-
й
день
коррекции
соответственно
.
Этот
показатель
у
животных
интактной
группы
составлял
5,85±0,49
нмоль
/
мл
,
а
у
контрольной
– 17,85±0,51
нмоль
/
мл
.
Снижение
уровня
МДА
под
действием
исследуемых
препаратов
как
на
3,
так
и
7-
и
10
день
применения
было
статистически
достоверным
по
отношению
к
контрольной
группе
.
Однако
сни
-
жение
уровня
МДА
под
действием
хитозана
было
более
существенно
по
сравнению
с
левомико
-
лом
и
эта
разница
была
также
статистически
достоверна
(
Таблица
5).
Таким
образом
,
проведенные
исследования
показывают
,
что
изучаемые
препараты
способству
-
ют
нормализации
нарушенных
воспроизведенной
экспериментальный
процесс
эндогенной
инток
-
Таблица
5.
Изменение
содержания
малонового
диальдегида
в
сыворотке
крови
при
коррек
-
ции
экспериментальной
термической
травмы
МДА
3
дня
лечения
7
дней
лечения
10
дней
лечения
Интактная
группа
5,85±0,49
Конрольная
группа
17,36±0,23
17,45±0,71
а
17,85±0,51
а
1-
я
группа
10,14±1,61
а
,
б
6,95±0,13
а
,
б
6,35±0,16
а
,
б
2-
я
группа
11,68±1,72
а
,
б
,
в
10,71±0,13
а
,
б
,
в
10,68±0,18
а
,
б
,
в
3-
я
группа
17,32±1,74
а
,
в
,
г
13,24±0,23
а
,
б
,
в
,
г
7,87±0,17
а
,
б
,
в
Примечание
:
Достоверное
отличие
P<0,05:
а
–
от
интактной
группы
,
б
,
в
,
г
–
от
показателей
контрольной
, 1-, 2-, 3-
группы
соответственно
Таблица
4.
Изменение
содержания
средних
молекулярных
пептидов
в
сыворотке
крови
при
коррекции
экспериментальной
термической
травмы
Показатель
3
дня
лечения
7
дней
лечения
10
дней
лечения
Интактная
группа
0,211±0,001
Конрольная
группа
0,230±0,006
0,259±0,002
а
0,338±0,003
а
1-
я
группа
0,206±0,006
а
0,152±0,005
а
,
б
0,144±0,006
а
,
б
2-
я
группа
0,210±0,002
а
0,140±0,014
а
,
б
,
г
0,026±0,008
а
,
б
,
в
,
г
3-
я
группа
0,220±0,005
0,238±0,047
г
0,059±0,002
а
,
б
,
в
,
г
Примечание
:
Достоверное
отличие
P<0,05:
а
–
от
интактной
группы
,
б
,
в
,
г
–
от
показателей
контрольной
, 1-, 2-, 3-
группы
соответственно
19
ПРОБЛЕМЫ
БИОЛОГИИ
И
МЕДИЦИНЫ
4 (67) 2011
сикации
содержания
МДА
.
Десятидневное
применение
хитозана
полностью
нормализует
содержа
-
ние
конечного
продукта
перекисного
окисления
липидов
–
малонового
диальдегида
в
сыворотке
крови
.
Эффективность
левомеколя
была
менее
выраженной
,
наблюдалась
и
полная
нормализация
малонового
диальдегида
лишь
на
10-
й
день
коррекции
.
Выводы
.
Полученные
результаты
показали
,
что
коррекция
экспериментального
термического
ожога
у
животных
исследуемыми
препаратами
в
течение
3-, 7-
и
,
особенно
, 10
дней
приводит
к
существенному
снижению
показателей
ССЭ
,
СМП
,
что
указывает
на
более
выраженный
антиток
-
сический
эффект
изучаемых
препаратов
.
Необходимо
отметить
,
что
коррекция
изучаемой
патологии
в
группах
применяющие
хитозан
наиболее
выражено
,
снижаются
изучаемые
показатели
по
сравнению
с
группой
сравнения
.
Из
вышеуказанных
показателей
следует
,
изучаемые
препараты
наиболее
эффективно
действу
-
ют
на
содержание
ССЭ
,
СМП
при
коррекции
в
течении
10
дней
.
Хитозан
превосходит
левомеколь
по
своему
действию
.
Полученные
данные
свидетельствуют
,
что
хитозан
и
левомеколь
на
ПОЛ
организма
действует
однонаправлено
,
но
хитозан
по
сравнению
с
левомиколом
,
оказывает
более
выраженное
антиток
-
сическое
действие
при
термическом
ожоге
,
особенно
при
лечении
в
течении
10
дней
его
введения
и
оно
выражалось
в
снижении
содержания
МДА
.
Использованная
литература
:
1.
Инчина
В
.
И
.,
Зорькина
А
.
В
.,
Ерофеева
М
.
В
.,
Морозов
М
.
Ю
.
Перспективы
применения
антиоксидантов
в
клинической
медицине
//
Наука
и
инновации
в
Республике
Мордовия
:
Материалы
IV
Республиканской
науч
.-
практич
.
конф
. (22 – 24
декабря
2004
г
.). –
Саранск
, 2005. –
С
. 367 – 370.
2.
Афанасьева
,
А
.
Н
.
Сравнительная
оценка
уровня
эндогенной
интоксикации
у
лиц
разных
возрастных
групп
А
.
Н
.
Афанасьева
Клин
.
лаб
.
диагн
. 2004.-
№
6.-
С
. 11-12.
3.
Коробейникова
Э
.
Н
.
модификация
определения
продуктов
перекисного
окисления
липидов
в
реакции
с
тиобарбитуровой
кислотой
.//
Лабораторное
дело
.-1989.-
С
.8-10.
4.
Арипов
А
.
Н
.,
Фесенко
Л
.
М
.
Клиническая
биохимия
.
Методы
//
Издательство
медицинской
литературы
имени
Абу
Али
ибн
Сино
. – 2000. –
с
. 59-61.
5.
Тугайбаев
Г
.
С
.
и
соавт
.
Метод
определения
сорбционной
способности
эритроцитов
//
Лабораторное
дело
.
– 1981. -
№
3. -
С
. 32-34.
6. Santos X., Castilla C., Martin M. et al. Role of leukotrienes in the physiopathology of the response to experimental
burn. Ann. of burns and fire disasters, v.XIV - n.2- p.90-93, June 2000.
