20 Проблемы биологии и медицины, 2016, №1 (86)
УДК:
68.145-007.61-06:616-006-0567
КАРИОТИПИРОВАНИЕ ХРОМОСОМ ЛИМФОЦИТОВ КРОВИ У ПАЦИЕНТОВ С
ГИПЕРПЛАЗИЕЙ ЭНДОМЕТРИЯ
Л.З. БАЗЮТА, С.П. ПОЛЕВАЯ, В.П. ПОЛЕВОЙ
Винницкий национальный медицинский университет им. М.И. Пирогова, Украина, г. Винница
Буковинский государственный медицинский университет, Украина, г. Черновцы
ЭНДОМЕТРИЯ ГИПЕРПЛАЗИЯСИДА БЕМОРЛАР ҚОНИ ЛИМФОЦИТЛАРИ
ХРОМОСОМАЛАРИНИ КАРИОТИПЛАШ
Л.З. БАЗЮТА, С.П. ПОЛЕВАЯ, В.П. ПОЛЕВОЙ
М.И.Пирогов номидаги Винница миллий медицина университети, Украина, Винница
Буковина давлат медицина университети, Украина, Черновци
BLOOD LYMPHOCYTES CHROMOSOME KARYOTYPING IN PATIENTS WITH
ENDOMETRIAL HYPERPLASIA
L.Z. BAZYUTA, S.P. POLEVAYA, V.P. POLEVOY
Vinnitsa National Medical University
named after
M.I. Pirogov, Ukraine, Vinnytsia
Bukovina State Medical University, Ukraine, Chernivtsi
Мақолада эндометрия гиперплазияси ва эндомерия ракига шубҳа қилинган аёллар қони лим-
фоцитлари хромосомаларини цитогенетик тахлили натижалари келтирилган. Хромосомаларнинг фра-
гил сохаларини аниқлаш, мутант генларнинг дастлабки стадиядаги экспрессиясини, кўпроқ онкоген-
ларни аниқлаб бериб, бу онкологик касалликнинг бошланишини билдиради. Хромосомаларнинг но-
зик жойларида кўп ҳолларда қайта жойлашиш кузатилиб, кейинчалик шу хромосомалар ностабилли-
ги кузатилиш тасдиқланди. Аёлларда эндометрий гиперплазиясида генетик омилларни ҳисобга олиш
ва цитодиагностикани қўллаш бачадон ракининг дастлабки даврларида даволаш ва профилактикаси-
да катта аҳамиятга эга эканлиги кўрсатилди.
Калит сўзлар:
эндометрий гиперплазияси, цитодиагностика, генетика, профилактика.
The article presents data of cytogenetic analysis of chromosomes in blood lymphocytes of women
with endometrial hyperplasia and suspected endometrial cancer. By definition of fragile sections of
chromosomes were revealed initial stages of expression of mutant genes, often oncogenes, which may
indicate the beginning of cancer. It is found that the fragile sites of chromosomes often initiated by
chromosomal rearrangements, and later there is chromosomal instability. It is shown that taking into account
genetic factors and cytodiagnostics use in women with endometrial hyperplasia has high importance on
prognosis, prophylaxis and treatment of endometrial cancer in the early stages of its development.
Key
words:
endometrial hyperplasia, cytodiagnostics, genetics, prophylaxis.
Вступление
. Гиперпластические процессы
эндометрия (ГПЭ) составляют 15-40% в струк-
туре онкологической патологии, а при сочетании
с лейомиомой матки этот показатель повышает-
ся до 76% [1,2,4]. Рост заболеваемости гипер-
пластическими процессами эндометрия связы-
вают как с неблагоприятной экологической си-
туацией, так и с ростом уровня соматических
заболеваний и снижением иммунитета у жен-
щин. Около 10% случаев рака эндометрия счи-
тают наследственным, что, возможно, связано с
высоким пролиферативным потенциалом клеток,
или с повышенной вероятностью мутаций в про-
тоонкогенах и опухолевых супрессорах. Кроме
того, актуальность исследования гиперпластиче-
ских процессов эндометрия обусловлена высо-
ким риском злокачественной трансформации
[2,3,6,7].
Фрагильные или хрупкие сайты хромосом
представляют участки ДНК с тандемными ди-
или тринуклеотидными повторами, которые
формируют необычные структуры ДНК и вызы-
вают динамические мутации, метилирования.
Последние включаются в сестринские хрома-
тидные обмены, делеции и транслокации, где
происходят амплификации генов и интеграции
плазмид. Именно в хрупких участках хромосом,
которые особенно чувствительны, чаще всего
происходит разрыв хроматиды с дефектом и пе-
рестройкой хромосомы. Цитогенетическим фра-
гильный сайт представляется в виде неоднород-
ности в структуре хромосомы. В зависимости от
индукции фрагильные сайты делятся на: редкие
и общие. Общие - оказываются в популяции под
действием химических мутагенов. Редкие -
встречаются в менее 5% лиц и являются наслед-
ственными. Большинство редких фрагильных
сайтов индуцируются дефицитом фолатов, кото-
рые являются ко-факторами для синтеза пуринов
и пиримидинов, а дефицит последних приводит
к индукции гипометилирования геномной ДНК
[3,5,8,9]. Поэтому дефицит фолатов индуцирует
разрывы ДНК, ухудшает репарацию ДНК и при-
водит к различным мутациям. Редкие фолат-
Л.З. Базюта, С.П. Полевая, В.П. Полевой
Биология ва тиббиёт муаммолари, 2016, №1 (86) 21
чувствительные фрагильные сайты ассоцииро-
ванные с генами не транскриптируются, а от-
дельные общие фрагильные сайты могут при-
влекаться к экспрессии гена при возникновении
участков хромосомной нестабильности. Фолат-
чувствительные фрагильные сайты хромосом не
выявляются у здоровых людей.
Однако природа общих фрагильных сай-
тов еще до конца не изучена. Отдельные ученые
склонны считать общие фрагильные сайты ча-
стью нормальной ДНК, другие - обращают вни-
мание на большое количество динуклеотидних
повторов в локусах общих фрагильных сайтов,
которые приводят к нарушению репликации.
Некоторые фолат-чувствительные фрагильные
сайты были клонированы и содержали большое
количество тандемных CGG-микросателлитных
повторений, которые способны принимать нети-
пичную ДНК-структуру и могут нарушать элон-
гацию репликации [7,8,9]. Все это послужило
основанием для проведения генетического ис-
следования у пациенток, страдающих ГПЭ.
Цель.
Провести анализ возникновения
фрагильных сайтов хромосом у пациентов с ги-
перплазией эндометрия с целью прогнозирова-
ния и особенностей клинического ее течения.
Материал и методы
исследования.
Об-
следовано 260 пациенток репродуктивного воз-
раста с гистологически верифицированым ГПЭ,
которые разделены на четыре клинические
группы: I - 80 пациенток с железистой гиперпла-
зией эндометрия (простая гиперплазия), II - 70
женщин с железисто-кистозной ГПЭ (сложная
гиперплазия), ІІІ - 50 женщин с атипичной ГПЭ
(простой и сложной). Четвертую группу соста-
вили 30 пациенток с гистологически верифици-
рованным раком тела матки. Группу контроля
составили 30 практически здоровых женщин.
Культивирование лимфоцитов перифери-
ческой крови пациентов проводили с использо-
ванием полумикрометода за модификациями,
которые широко применяются в лаборатории
молекулярной генетики Одесского национально-
го медицинского университета. В шприц наби-
рали 0,1 мл стерильного раствора гепарина (5000
МЕ). Путем венэпункции локтевой вены забира-
ли 5 мл гепаринизированной стерильной крови.
Посадку крови на искусственные питательные
среды проводили в ламинар-боксе Jouane
MSC.12. на каждую пациентку по 3-4 флакона. В
каждый флакон добавляли 5 мл среды 199 или
Игла (Sigma), которые не содержат фолатов и
фолиевой кислоты, (что является важным для
выявления фрагильных сайтов хромосом), 75-
125 мкл фитогемаглютинина (ФГА) (Sigma), 0,5
мл эмбриональной телячьей сыворотки (Sigma),
0,5 мл цельной гепаринизированной крови.
Лимфоциты культивировали 72 ч в термостате
при температуре 37
0
С. Препараты окрашивали
по методике G-окраски. Использовали буфер
Соренсена (рН 6,8), для которого готовили два
раствора: 1/15М раствор двухзамещённого фос-
фата натрия (Sigma) и раствор однозамещённого
фосфата калия (Sigma), которые смешивали в
соотношении 1:1 по 5 мл и добавляли 15 капель
красителя Романовского. Продолжительность
окраски - 5 мин., после чего препараты промы-
вали трижды дистиллированной водой и высу-
шивали на воздухе.
Хромосомный анализ проводили на систе-
ме кариотипирования MetaSystems (Германия) с
использованием программы "Ikaros". Проанали-
зированы не менее 20 метафазных пластинок для
каждой пациентки. Анализ хромосом лимфоци-
тов содержал: подсчет числа хромосом в мета-
фазных пластинках, идентификацию хромосом,
установки частоты аберрантных клеток (в % к
общему числу исследуемых метафаз), характе-
ристику аберраций хромосом. Учитывали хро-
матидные и хромосомные аберрации, кариоти-
пово-аномальные клетки и фрагильные сайты
хромосом. Цифровой материал обрабатывали
статистически.
Результаты исследования и их обсужде-
ние.
У пациентов с патологией эндометрия
наблюдалась фрагильность хромосом (табл. 1).
Наименьшее количество фрагильных сайтов
хромосом выявляли у пациенток с железистой
гиперплазией эндометрия (1p3.3-3.4, 2q2.2-2.3,
2q3.3-3.5, 5q2.3-3.1, 4q2.8-3.1), которые имели
отягощенный семейный анамнез, так и без него.
С данной выборки пациенток с железистой ги-
перплазией эндометрия только в нескольких за-
мечены единичные фрагильные сайты хромосом.
В 30 здоровых женщин фрагильных сайтов не
обнаружено.
По атипичной гиперплазии эндометрия
количество фрагильных сайтов возрастала в не-
сколько раз, практически в каждой пациентки с
атипичной гиперплазией эндометрия. В одной
пациентки можно было обнаружить от пяти до
десяти различных хрупких сайтов в разных хро-
мосомах. У пациенток с атипичной гиперплазией
и аденокарциномой эндометрия с отягощенным
онкоанамнезом были обнаружены новые фра-
гильные сайты (17q2.2; 1q2.2; 1q1.4; 2p1.5-2.2),
которых не встречали у пациенток соответству-
ющих групп без отягощенного онкоанамнеза. У
пациенток с аденокарциномой эндометрия имело
место увеличение количества и спектра фра-
гильных сайтов, при этом наблюдались различия
в группах с отягощенным и без отягощенного
онкоанамнеза.
Кариотипирование хромосом лимфоцитов крови у пациентов с гиперплазией эндометрия
22 Проблемы биологии и медицины, 2016, №1 (86)
Значительное количество хрупких сайтов
совпадает или локализованы вблизи онкогенов и
протоонкогенов, участвующих в возникновении,
прогрессии рака эндометрия или способствуют
его появлению (табл.1). Мутации в генах репа-
рации PMS1, MSH6 / GTBP, MSH2, COCA,
LCFS2, NF1 выявляются при наследственных
формах рака эндометрия (синдромы Tuir-Morre,
Lynch, нейрофиброматоз 1). Именно в участках
расположения указанных генов обнаружены
фрагильные сайты хромосом у больных раком
эндометрия.
В развитии эстрогензависимых форм рака
эндометрия участвуют гены PTEN, CYP1B1,
CYP17, ER1, ER2 COX-1, СОХ2 и др. Размеще-
ние фрагильных сайтов у больных раком эндо-
метрия также совпадало с хромосомным распо-
ложением этих генов. В патогенезе эстрогенза-
висимого рака эндометрия большую роль игра-
ют факторы риска: ожирение, синдром полики-
стозных яичников, диабет, гипертония и т.д.
Оказалось, что хромосомная локализация неко-
торых из известных генов, ответственных за эти
заболевания, совпадает с локализацией фрагиль-
ных сайтов в обследованных нами пациенток
больных раком эндометрия.
Установлены гены, отвечающие за наслед-
ственные формы ожирения (HCHOLA3, CLF,
FHCA), гены синдрома поликистозных яичников
(HSD3B2, FSHR, GCCR, FST), диабета (SLC2A1
(GLUT1), SORBS1, GYS2, IRS2, HNF4A), гипер-
тонии (AGTR1, HYT4, CYP8). Хромосомная ло-
кализация этих генов также совпадала с выяв-
ленными фрагильными сайтами.
Таким образом, можно предположить, что
наследственная отягощенность по экстрагени-
тальным заболеваниям может играть большую
роль в развитии эстроген-зависимого рака эндо-
метрия. Учет наследственных факторов, указы-
вающих на предрасположенность к заболева-
нию, может иметь большое значение для профи-
лактики и лечения рака эндометрия на ранних
этапах его развития. Анализ полученных резуль-
татов позволяет предположить, что часть обсле-
дованных больных может иметь герминальные
мутации в генах репарации (MSH6 / GTBP,
MSH2, RAD1, PMS1). На поздних этапах разви-
тия опухоли могут проявляться соматические
мутации в генах, контролирующих клеточный
цикл (hCDC4), в гене рецептора-2 фактора роста
фибробластов, в генах интерлейкинов, участву-
ющих в патогенезе опухоли (IL10, IL8).
Рис.
1.
Кариотип лимфоцитов периферической крови больной раком эндометрия 47, ХХ, + mar; 11p-;
FRA1q3.2; хрупкий участок хромосомы показан стрелкой.
Л.З. Базюта, С.П. Полевая, В.П. Полевой
Биология ва тиббиёт муаммолари, 2016, №1 (86) 23
Таблица 1
.
Фрагильные сайты, которые встречаются в пациентов с патологией эндометрия и установленные
фрагильные сайты и гены из этих локусов
№
Фрагильный
сайт
Предсказываемый тип фрагильного сайта
Известные гены-кандидаты, принимающие
участие в развитии рака эндометрия
1.
1p2.1
FRA1D(1p22) амфидиколиновый, общий;
FRA1E (1p212) амфидиколиновый, общий;
2.
1q1.4
3.
1q2.2
FRA1F, (1q21) амфидиколиновый, общий;
4.
1q2.5-3.1
FRA1G(1q25.1), амфидиколиновый, общий;
FRA1K(1q31), амфидиколиновый, общий;
СОХ2 (ген циклооксигеназы-2)
IL10 (ген интерлейкина-10)
5.
1p3.3-3.4
FRA1B(1p32), амфидиколиновый, общий;
SLC2A1(GLUT1) (переносчик глюкозы 1)
TNFRSF1B (ген рецептора фактора некроза опу-
холей)
HCHOLA3 (ген гиперхолесте-ронлемии)
6.
1p1.2
HSD3B2 (ген 3β-гидроксистеро-
иддегидрогеназы); NRAS (онкоген)
7.
1q1.1
FRA1J(1q12), 5-азацитидиновий, общий;
8.
2q3.3-3.5
FRA2I (2q33) амфидиколиновый, общий;
9.
2q2.2-2.3
FRA2F(2q21.3) амфидиколиновый, общий;
FRA2K(2q22.3), фолат-чувствительный, редкий
10.
2q2.4-3.1
FRA2G(2q31), амфидиколиновый, общий;
PMS1 (ген мис-мач репарации)
COX-1 (ген циклооксигеназы 1)
GPD2 ( ген глицеролфосфат-дегидрогеназы)
11.
2p1.5-2.2
FRA2D(2p16.2), амфидиколиновый, общий;
MSH6/GTBP (ген мис-мач репарации);CYP1B1
(ген цитохром-оксидазы - 450)
COCA (ген, ответственный за синдром Линча)
NF1 (нейрофиброматоз, тип 1)
MSH2 (синдром Tuir-Morre)
FSHR (ген рецептора фоликулостимулирующего
гормона)
12.
3q2.6-27
FRA3C(3q27), амфидиколиновый, общий;
AGTR1(ген рецептора ангиотензина)
13.
4q1.5
FRA4A(4p16.1), амфидиколиновый, общий;
IL8 ( ген интерлейкина-8)
14.
4q2.8-3.1
FRA4D(4q31.1), амфидиколиновый, общий;
FRA4E(4q27), некласиффицируемый, общий
hCDC4 (ген циклин-зависимой киназы - 2)
15.
5q2.1
APC (ген аденоматозного полипоза толстой киш-
ки)
16.
5q2.3-3.2
FRA5C, амфидиколиновый, общий
GCCR (ген глюкокорти-коидного рецептора)
17.
5q1.6
FRA5D, амфидиколиновый, общий
RAD1 (белок контроля клеточного цикла, ДНК-
репарирующая экзонуклеаза)
FST (ген фолистатина, синдром поликистозных
яичников)
18.
5p1.4
FRA5E, амфидиколиновый, общий
ER1( ген эстрогенового рецеп-тора-1)
19.
6q2.6
FRA6E(6q26), амфидиколиновый, общий
DDM8 (ген инсулинзависимого діабета)
20.
7q3.1-3.2
FRA7G (7q31.2) амфидиколиновый, общий,
FRA7H (7q32.3) амфидиколиновый, общий
LEP, OB Leptin (ген, отвественный за развитие
ожирения)
21.
9q1.1
FRA9F(9q12),5-азацитидиновый, общий
FHCA (ген гиперхоланемии)
22.
10q1.1
FRA10G(10q11.2), амфидиколиновый, общий
23.
10q2.5-2.6
FRA10E(10q25.2), амфидиколиновый, общий
FRA10F(10q26.1), амфидиколиновый, общий
PTEN (гомолог фосфатазы и тензина)
CYP17 (ген цитохрома Р450)
SORBS1(ген гомолога сорбина человека, диабет)
FGFR2 (ген рецептора 2, способствующего росту
фибробластов)
24.
12q1.1
FRA12A (12q13.1) фолат-чувствительный, ред-
кий
GYS2 (ген гликогенсинтетазы, ожирение)
HYT4 (ген гипертонии)
25.
13q1.3
FRA13A (13q13.2) амфидиколиновый, общий
BRCA2 (ген рака груди)
26.
13q2.1-2.2
FRA13B(13q21), BrdU-тип, общий
FRA13C(13q21.1), амфидиколиновый, общий
CLF (ген холестерол-снижающего фактора)
27.
13q3.2
FRA13D(13q32), амфидиколиновый, общий
IRS2 (ген субстрата инсулинового рецептора)
28.
17q2.2
FRA17B (17q23.1) амфидиколиновый, общий
ERBB2(HER2/neu) (ген транс-мембранного ре-
цептора тирозинкиназы)
29.
18q1.1
FRA18A (18q12.2) амфидиколиновый, общий
LCFS2 (синдром Lynch 2)
30.
20p1.1
FRA20A(20p11), фолатчувствительный, редкий
HNF4A (ген нуклеарного фактора гепатоцитов,
инсулиннезависимый диабет); CYP8 (ген проста-
гландин-12-синтетазы, гипертония)
31.
Xq2.3-2.4
FRAХС(Хq22.1), амфидиколиновый, общий
Кариотипирование хромосом лимфоцитов крови у пациентов с гиперплазией эндометрия
24 Проблемы биологии и медицины, 2016, №1 (86)
Статистически большинство случаев рака
эндометрия (90%) являются спорадическими.
Значительная часть пациенток, принимавших
участие в исследованиях, имела разные формы
гиперплазии
эндометрия.
Анализ
данных
анамнеза пациенток с патологией эндометрия
показал, что заболеваемость диабетом, ожирени-
ем и гипертонией были значительно выше, чем в
контрольной группе. При анализе родословных
пациенток с различными формами гиперплазии
эндометрия чаще всего встречались рак желудка,
матки и рак молочной железы. Нередко встре-
чался рак печени, поджелудочной железы, рак
легких и опухоли головного мозга. Большинство
родословных можно было бы отнести к наслед-
ственному раковому синдрому Линча, главным
отличием которого является развитие опухолей
толстой кишки, эндометрия, желудка и др. в мо-
лодом возрасте, при котором жировые клетки
эндокринных желез секретируют различные
факторы (простагландин, ангиотензиноген, фак-
тор-α некроза опухолей, интерлейкина-1,6 и др.).
На данном этапе исследования результаты
показали,
что
своевременное
медико-
генетическое консультирование и профилакти-
ческое обследование членов семей с отягощен-
ным онкоанамнезом позволит диагностировать
опухолевую патологию на ранних стадиях ее
развития. Поскольку риск заболеть раком эндо-
метрия для женщин - носителей мутаций генов
мес-мАч репарации составляет от 30 до 60% (по
разным источникам). В связи с этим профилак-
тическое обследование таких женщин рекомен-
дуем начинать с 25-35 лет.
Ренин-ангиотензиновая система играет ос-
новную роль в контроле артериального давления
и гомеостазе ионов натрия. Мутации в некото-
рых генах, контролирующих эту систему, могут
вызывать наследственно-обусловленную гипер-
тензию. Как следствие, в организме пациенток,
страдающих этими заболеваниями, возникает
аномальный гормональный фон. В результате у
многих из обследованных пациенток возникают
кисты яичников, мастопатии, миоматоз матки и
др.
Существует прямая связь между инсулин-
зависимым диабетом и синдромом поликистоз-
ных яичников.
В табл.1 использована информация элек-
тронных баз данных OMIM (Online Mendelian
Inheritance on Men). Пролиферативная актив-
ность эстрадиола в ткани эндометрия проявляет-
ся повышением экскреции в ткани стромы инсу-
линзависимого фактора роста-1 (IGF-1). Инсу-
лин может вести себя как фактор роста (по дей-
ствию похож на IGF-1), также стимулировать
синтез андрогенов в яичниках и способствовать
избытку эстрогенов и дефициту прогестерона.
Кроме того, обращают на себя внимание данные
анамнеза пациенток о частоте спонтанных выки-
дышей и бесплодия. В группе пациенток с опу-
холевой патологией эндометрия с отягощенным
семейным онкоанамнезом, частота спонтанных
выкидышей и бесплодия выше (13,6%), чем в
группе пациенток без отягощенного семейного
онкоанамнеза (9,0%) и в контрольной группе
(3,7% и 3,2 %; 3,3% и 3,3%). Возможно, что гер-
минальные мутации в генах мес-мАч репарации
и аномальный гормональный фон могут стать
причиной таких последствий. В группе пациен-
ток с опухолевой патологией эндометрия с отя-
гощенным онкоанамнезом практически полови-
на (45,5%) обследованных имела контакт с мута-
генами, которые в подавляющем большинстве и
являются канцерогенами. Влияние мутаге-
нов/канцерогенов и слабость системы репарации
с большой долей вероятности может стать при-
чиной онкозаболевания. Для того, чтобы этого
можно было избежать, необходимо проводить
медико-генетическое консультирование в семьях
с онкологической предрасположенностью, разъ-
яснять
опасность
работы
с
мутагена-
ми/канцерогенами для людей. При цитогенети-
ческом исследовании лимфоцитов перифериче-
ской крови пациентов с патологией эндометрия
обнаружены фрагильные (хрупкие) сайты хро-
мосом, которые по локализации совпадают со
многими генами, участвующими в развитии рака
эндометрия. Среди них гены мес-мАч репарации
(MSH6 / GTBP, PMS1, MSH2), ERBB2 (HER2 /
neu), PTEN, NRAS. Гены семьи ras кодируют
семейства белков, работающих как переключа-
тели на сигнальных путях между рецепторами
клеточной оболочки и ядра и играют жизненно
важную роль в контроле клеточного роста и
дифференциации. PTEN блокирует вступление
клеток в S-фазу клеточного цикла через обрат-
ную регуляцию циклина D1 и активацию
апоптотических молекул. Ген HER2/neu кодиру-
ет трансмембранный рецептор тирозин-киназы,
похожий на рецептор фактора роста эпидермиса
(EGF-R), и играет важную роль в координации
сигнальной передачи комплекса ErbВ, а также
участвует в регуляции клеточного роста и диф-
ференциации.
В патогенезе эстроген-зависимого рака эн-
дометрия большую роль играют факторы риска:
ожирение, синдром поликистозных яичников,
диабет, гипертония. Как оказалось, хромосомная
локализация некоторых из известных генов, от-
ветственных за эти заболевания, совпадает с ло-
кализацией фрагильных сайтов в обследованных
нами больных раком эндометрия. Так, известны
гены, ответственные за наследственные формы
Л.З. Базюта, С.П. Полевая, В.П. Полевой
Биология ва тиббиёт муаммолари, 2016, №1 (86) 25
ожирения (HCHOLA3, CLF, FHCA), синдрома
поликистозных яичников (HSD3B2, FSHR,
GCCR, FST), диабета (SLC2A1 (GLUT1),
SORBS1, GYS2, IRS2, HNF4A), гипертонии
(AGTR1 , HYT4, CYP8). Хромосомная локализа-
ция этих генов также совпадала с выявленными
фрагильными сайтами.
Таким образом, мы можем наблюдать в
световой микроскоп следствие динамической
мутации (до нескольких сотен повторов нуклео-
тидов) в определенном хромосомном регионе в
виде ломкости хромосомы. Мы нашли специфи-
ческие фрагильной сайты хромосом у пациенток
с атипичной гиперплазией и аденокарциномой
эндометрия как с отягощенным семейным онко-
анамнезом, так и без него - 1q2.5-4.1; 2q2.4-31;
4q1.5; 5q1.4. Цитогенетический метод диагно-
стики фрагильных сайтов хромосом лимфоцитов
периферической крови с использованием фолат-
дефицитного среды может служить дополни-
тельным методом выявления группы высокого
риска развития как наследственного, так и спо-
радически рака эндометрия. Дефицит фолатов,
вызывая неправильное встраивания урацила в
ДНК- клетки человека, индуцирует хромосом-
ные повреждения, которые являются одной из
возможных причин возникновения рака. Была
выдвинута гипотеза о возможном механизме:
недостаток метилирования дУМФ к дТНФ и ча-
стичное встраивания урацила в ДНК с помощью
ДНК-полимеразы. Во время встраивания ура-
цила в ДНК формируются дефекты в компле-
ментарной цепи, а два противоположных дефек-
ты могут привести к фрагильности (ломки) хро-
мосомы. Дефицит фолиевой кислоты может вы-
звать нарушение соотношения предшественни-
ков нуклеотидов, ошибочные встраивания ура-
цила в ДНК и, в результате этого - дефекты в
хромосомах. Нарушение метаболизма фолатов и
мутация в гене метилентетрагидродефолатре-
дуктазы (МТГФР) могут быть факторами риска
развития онкозаболеваний. Недостаточность фо-
лата сопровождается патологическим преобра-
зованием гомоцистеина на метионин, на которое
влияет фолиевая кислота, что приводит к гипер-
метилированию ДНК и нарушению нормального
разделения хромосом. Многочисленные иссле-
дования подтверждают защитную роль фолиевой
кислоты на ранних стадиях рака груди, рака тол-
стой кишки, при лейкемии. Такие пациентки, как
правило, имеют мутации в генах ферментов ме-
таболизма фолиевой кислоты и им нужны более
высокие дозы фолиевой кислоты, чем обычно.
Но проблема дозы фолиевой кислоты, а также
сопутствующих витаминов (витамины В6, В12,
С) пока остается нерешенной и требует допол-
нительных исследований.
На основании проведенного нами исследо-
вания можно сделать вывод, что в группе паци-
енток с отягощенным онкоанамнезом частота
рака желудка (19,3%), рака матки (15,8%) и рака
молочной железы (15,6%) выше, чем частота
опухолевой патологии другой локализации. При
этом пациентки с опухолевой патологией эндо-
метрия из группы с отягощенным онкоанамне-
зом больше контактировали с мутагенами
(45,5%), чем пациентки с опухолевой патологией
без отягощенного онкоанамнеза (29,6%). У па-
циенток с отягощенным онкоанамнезом чаще
наблюдались нарушения репродуктивной функ-
ции: спонтанные выкидыши составили 13,6%
против 3,7% лиц и бесплодие - 9,0% против 3,2%
лиц без отягощенного анамнеза онкопатологии.
Выявлено, что уровень спонтанных хромосом-
ных аберраций у пациенток с железистой гипер-
плазией эндометрия достоверно ниже по сравне-
нию с группой женщин с отягощенным онко-
анамнезом, так и без такового (19,5 ± 2,0% и 7,1
± 2,5%), чем в пациенток с атипичной гиперпла-
зией (29,1 ± 6,5% и 29,9 ± 4,1%) и аденокарци-
номой эндометрия (36,4 ± 6,1% и 36,4 ± 6,1%).
Вместе с тем у больных с патологией эндомет-
рия выявлен 31 сайт фрагильности хромосом; 4
сайта фрагильности (1q2.5-4.1; 2q2.4-31; 4q1.5;
5q1.4) обнаружили у пациенток с атипичной ги-
перплазией и аденокарциномой эндометрия как с
отягощенным онкоанамнезом, так и без него. У
пациенток с отягощенным анамнезом онкопато-
логии обнаружены 4 фрагильные сайты (17q2.2;
1q2.2; 1q1.4; 2p1.5-2.2), которые не встречались
в таких без отягощенного онкоанамнезу.
Вывод
. Прогноз течения и лечения гипер-
плазии эндометрия у женщин репродуктивного
возраста должен базироваться на онкологиче-
ской отягощенности анамнеза пациенток с уче-
том групп генетического риска.
Перспективы научных исследований.
Генетическая предрасположенность к онкопато-
логии у женщин с гиперплазией эндометрия
обусловлена уровнем спонтанных хромосомных
аберраций, отдельные патогенные факторы ко-
торых углубленно изучаться в перспективе.
Литература:
1.
Акушерство та гінекологія: У 4 т.: національ-
ний підручник / Кол. авт.; за ред. акад. НАМН
України, проф. В.М. Запорожана. - Т.3: Неопера-
тивна гінекологія / К.: ВСВ «Медицина», 2014.-
С. 502- 526.
2.
Базюта Л.З. Роль спадковості у пацієнток з
гіперплазією ендометрія / Л.З. Базюта // Збірник
матер. міжнародної науково-практичної конфе-
ренції «Сучасний вимір медичної науки та прак-
тики»(м. Дніпропетровськ, 15-16 травня 2015р.) -
Кариотипирование хромосом лимфоцитов крови у пациентов с гиперплазией эндометрия
26 Проблемы биологии и медицины, 2016, №1 (86)
Дніпропетровськ: Організація наукових медич-
них досліджень «Salutem», 2015.- С.30- 35.
3.
Базюта Л.З. Діагностика порушень клітинно-
го імунітету у жінок із гіперплазією ендометрія /
Л.З. Базюта // Бук. мед. вісник - 2015.- Т.19, №
3 (75).- С.7-10.
4.
Пересунько О.П. Генетичні підходи до ранної
діагностики
гіперпластичних
процесів
та
профілактики раку ендометрія / О.П. Пересунь-
ко, С.А. Цинтар, Р.В. Сенютович //Х Конгрес
світової федерації українських лікарських това-
риств (Матер. науково-практичної конференції).
– м. Чернівці, 2004. -С 168-170.
5.
Пересунько О.П. Перспективи генетичних
підходів до профілактики та діагностики гіпер-
пластичних процесів та раку ендометрія / О.П.
Пересунько, С.А. Цинтар //Актуальні питання
променевої діагностики та лікування онко-
логічних
захворювань
(Матер.
науково-
практичної конференції). – м. Чернівці, 2004.-
С.125-127.
6.
Пересунько
О.П.
Генетико-математична
оцінка родоводів хворих на рак ендометрія /
О.П. Пересунько, Л.І. Бізер, С.А. Цинтар
//Актуальні питання променевої діагностики та
лікування онкологічних захворювань (Матер.
науково-практичної конференції). – м. Чернівці,
2004.- С.25-29.
7.
Цинтар С.А. Чинники апоптозу в жінок із
гіперплазіями ендометрія залежно від онко-
логічного спадкового анамнезу / С.А. Цинтар,
О.П. Пересунько // Буковинський медичний
вісник. – 2007.-№ 3. – С. 96-99.
8.
Peresunko А. The genetic in the peculiarities of
clinical development of endometrial cancer in
patients with aggrated oncopathology of clinico –
genetical anamnesis / А.Peresunko, Е. Oliynyk,
S.Tsintar // European Journal of Cancer. - 2004.-
Vol. 2., № 1. – P.8.
9.
Peresunko A.P. Peculiarities of endometrial
cancer development in patients with complicated
clinical-genealogical anamnesis / А. Peresunko, І.
Gushul, S.Tsyntar // Third International Scientific
Conference of Medical Students and Young
Doctors. Bialystok. 10-11 May 2007. – 10-11
P.106-107.
КАРИОТИПИРОВАНИЕ ХРОМОСОМ
ЛИМФОЦИТОВ КРОВИ У ПАЦИЕНТОВ С
ГИПЕРПЛАЗИЕЙ ЭНДОМЕТРИЯ
Л.З. БАЗЮТА, С.П. ПОЛЕВАЯ, В.П. ПОЛЕВОЙ
Винницкий национальный медицинский универ-
ситет им. М.И. Пирогова, Украина, г. Винница
Буковинский государственный медицинский
университет, Украина, г. Черновцы
В статье приведены данные цитогенетиче-
ского анализа хромосом лимфоцитов крови у
женщин с гиперплазией эндометрия и с подо-
зрением на рак эндометрия. По определению
фрагильных участков хромосом выявлены
начальные стадии экспрессии мутантных генов,
чаще всего онкогенов, которые могут указывать
на начало онкозаболевания. Установлено, что в
хрупких участках хромосом чаще инициируются
хромосомные перестройки, а в дальнейшем воз-
никает хромосомная нестабильность. Показано,
что учёт генетических факторов и применения
цитодиагностики у женщин при гиперплазии
эндометрия имеет большое значение для прогно-
за, профилактики и лечения рака эндометрия на
ранних этапах его развития.
Ключевые слова:
гиперплазия эндомет-
рия, цитодиагностика, генетика, профилакти-
ка.
