160 Проблемы биологии и медицины, 2016, №2 (87)
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
УДК: 616-005.1-08-089:541,6:539,23
ВЛИЯНИЕ ГЕМОСТАТИЧЕСКОГО ИМПЛАНТАТА «ГЕПРОЦЕЛ» НА ЗАЖИВЛЕНИЕ
РАНЫ ПЕЧЕНИ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ
М.М. АЛИМОВ, Б.М. МИРЗАХМЕДОВ, А.А. САРЫМСАКОВ, Б.А. ИСМАИЛОВ, О.В. КИМ
АО “Республиканский специализированный Центр хирургии им. акад. В.Вахидова”,
Республика Узбекистан, г. Ташкент
ЭКСПЕРИМЕНТ ШАРОИТИДА ЖИГАР ЖАРОҲАТИ БИТИШИГА “ГЕПРОЦЕЛ”
ГЕМОСТАТИК ИМПЛАНТАТИНИНГ ТАЪСИРИ
М.М. АЛИМОВ, Б.М. МИРЗАХМЕДОВ, А.А. САРЫМСАКОВ, Б.А. ИСМАИЛОВ, О.В. КИМ
АЖ “Акад. В.Вахидов номидаги Республика ихтисослаштирилган хирургия Маркази”,
Ўзбекистон Республикаси, Тошкент
THE INFLUENCE OF HEMOSTATIC IMPLANT GEPROCEL ON LIVER INJURY HEALING
UNDER EXPERIMENTAL CONDITIONS
M.M. ALIMOV, B.M. MIRZAHMEDOV, A.A. SARYMSAKOV, B.A. ISMAILOV, O.V. KIM
JSC "Republican Specialized Center of Surgery named acad. V.Vahidov", Republic of Uzbekistan, Tashkent
Олиб борилган изланишлар шуни кўрсатадики, ишлаб чиқарилган “Гепроцел” гемостатик
қопламаси турли хил паренхиматоз қон кетишларида турғун қон тўхтатувчи восита сифатида самара
беради. Тажриба ниҳоясида жигар тўқимасида, айниқса жарохат майдонида регенератор жараёнлар
кузатилди. Яллиғланиш жараёнини характерловчи ҳужайралар сони ва уларнинг тарқалишини
баҳоловчи кўрсаткичлар “Гепроцел” воситасини салбий таъсир кўрсатмайдиган агент деб баҳолашга
асос бўлади ва янги гемостатик материал сифатида жароҳатлар ва операция вақтида паренхиматоз
қон кетишини тўхтатишда қўллаш мумкинлигини кўрсатади.
Калит сўзлар:
яллигланиш, гемостаз, паренхиматоз кон кетиши, жигар, морфология.
This study showed strong hemostatic effect of hemostatic film "Geprocel" in various parenchymal
bleeding. By the end of experimental work we observed total regenerative processes in the liver parenchyma.
According the evaluative scale of inflammatory cell number and spreading Geprocel was determined as non-
irritating agent. New hemostatic implant as hemostatic film can be applied to stop bleeding in parenchymal
injury and operation performing.
Keywords:
inflammation, hemostasis, parenchymal bleeding, liver, morphology.
На сегодняшний день существуют различ-
ные виды морфологической оценки гемостати-
ческих имплантатов, а также их влияния на вос-
палительный ответ. Как правило, во время про-
цесса деградации может наблюдаться тканевая
реакция, но локальная гистологическая картина
должна вернуться к норме. Для оценки воспали-
тельной реакции ткани на имплантат в гистоло-
гических исследованиях применяется система
баллов, которая учитывает степень местной ре-
акции ткани по области ее распространения
[2,3].
Морфологическая оценка воспалительной
реакции ткани на имплантат включает в себя си-
стему баллов, в которой учитывается степень
местной инфильтрации ткани и ее распростране-
ния либо количественным или полуколиче-
ственным анализом [1].
Намисовместно с лабораторией НИЦ ХФП
при
НУУ
был
получен
новый
поликомпозиционный полимерный материал из
производных целлюлозы, которому было дано
название «Гепроцел».
Цель исследования:
Морфологическая
оценка влияния гемостатичекой пленки «Гепро-
цел» на заживление раны печени в эксперимен-
те.
Материалы и методы:
в отделе экспери-
ментальной хирургии АО «РСЦХ им. акад.
В.Вахидова» были проведены исследования в
соответствии с ГОСТ Р ИСО 10993-6-2011. В
качестве материала исследования использованы
крысы (50) обоего пола, весом 197,6±3,4 гр по-
роды «Vistar», у которых на 1,7,14 и 30-е сутки
после использования имплантата взяты биопта-
ты. В основной группе в качестве гемостатиче-
ского материала был использован «Гепроцел», в
контрольной группе была применена хлопчато-
бумажная марля.
Для морфологического исследования с
помощью световой микроскопии ткань фиксиро-
вали в 10-12% растворе формалина на фосфат-
ном буфере. Парафиновые срезы окрашивали
гематоксилин-эозином.
М.М. Алимов, Б.М. Мирзахмедов, А.А. Сарымсаков, Б.А. Исмаилов, О.В. Ким
Биология ва тиббиёт муаммолари, 2016, №2 (87) 161
Рис.1.
Моделированная рана печени
Рис.2.
Аппликация пленки «Гепроцел».
Рис. 3.
Промокание 2-хрядного марлевого
тампона кровью.
Рис. 4.
СМ. Гематоксилин-эозин.
Ув.×72.Вакуольная дистрофия гепатоцитов,
фиброзткани 120мкм.
Для оценки гистологических исследований
была применена система баллов согласно ГОСТ
Р ИСО 10993-6-2011, в которой учитывались
параметры полуколичественной оценки числа и
распределения клеток, характеризующих воспа-
лительный процесс в срезах ткани печени, таких
как полиморфно ядерные нейтрофилы, лимфо-
циты, плазматические клетки, макрофаги, эози-
нофилы и многоядерные клетки, число которых
в поле зрения при увеличении 400. При микро-
скопии оценивали динамику развития воспали-
тельной реакции, особенности регенерации па-
ренхимы печени.
После ингаляционного наркоза произво-
дилась верхнесрединная лапаротомия длиной
разреза до 3-4 см. В рану извлечена левая доля
печени. На поверхности печени с помощью
ограничителя и абразивного материала смодели-
ровано паренхиматозное кровотечение диамет-
ром до 1см, глубиной до 0,3 см (рис.1.). В ре-
зультате отмечалось активное паренхиматозное
кровотечение. На кровоточащую поверхность
печени методом аппликации наложены гемоста-
тические материалы.
Результаты исследования
. При апплика-
ции гемостатической пленки «Гепроцел» отме-
чался устойчивый гемостаз (рис.2.). После
наблюдения (10минут) возобновления кровоте-
чения не наблюдалось. В контрольной группе
после применения двухслойной марли отмеча-
лась просачивание крови (рис.3.).
В установленные сроки взяли биопсийный
материала из раны печени для оценки макроско-
пического состояния имплантата. Вовремя экс-
перимента анализировали макроскопическую
оценку изменений в брюшной полости при
вскрытии животных после эвтаназии.
В ранние сроки (1-е сутки) при наблюде-
нии основной группы в брюшной полости сво-
бодной жидкости, возобновления кровотечения
не отмечалось. Макроскопически визуализиро-
вался рыхлый спаечный процесс с вовлечением
большого сальника, выраженный фибриновый
налет на раневой поверхности печени.
Влияние гемостатического имплантата «гепроцел» на заживление раны печени в эксперименте
162 Проблемы биологии и медицины, 2016, №2 (87)
Рис.5.
СМ.Гематоксилин-эозин. Ув.Х72.Фиброз
ткани - 70 мкм.
Рис.6.
СМ.Гематоксилин-эозин.УвХ72. Умень-
шение фиброзной пленки до 20мкм
Микроскопически субкапсулярно отмеча-
ется вакуольная дистрофия гепатоцитов с рас-
ширением синусоидальных пространств. Коли-
чество элементов воспаления в поле зрения со-
ставило: полиморфно ядерные нейтрофилы – 28,
лимфоциты – 13, плазматические клетки – 3.
Отмечается вакуольно-зернистая дистрофия ге-
патоцитов, некротический слой ткани толщиной
до 120 мкм (рис.4.).
На 7-е сутки эксперимента в брюшной по-
лости сохраняется спаечный процесс. Отмечает-
ся уменьшение фибринового налета. Микроско-
пически отмечается фиброз капсулы печени с
уменьшением воспалительного инфильтрата,
выражающий в виде уменьшения количества
полиморфноядерных нейтрофилов до 5, лимфо-
цитов - 7, плазматических клеток – 2. Толщина
некротического слоя составила 70 мкм (рис.5.).
На 14-е сутки макроскопически не отмеча-
ется спаечного процесса в печени и брюшной
полости. Микроскопически отмечается усиление
регенераторных процессов в паренхиме, особен-
но в зоне повреждения, которые проявляются
восстановлением балочного строения печени,
исчезновением отека и полнокровия, уменьше-
ние толщины фиброзной пленки печени до 10 -
15 мкм. Отмечается умеренная лимфоидная ин-
фильтрация капсулы печени с уменьшением в
поле зрения количества полиморфноядерных
нейтрофилов до 2, лимфоцитов – 5, плазматиче-
ских клеток – 2 (рис.6.).
К концу эксперимента (30-е сутки) макро-
скопически наблюдается печень мягкой конси-
стенции с гладкой поверхностью, без признаков
воспаления.
Микроскопически на 30-е сутки, в ткани
печени выраженных патогистологических изме-
нений не обнаружено. Капсула печени не утол-
щена, содержит продольно ориентированные
пучки коллагеновых волокон. Междольковая
соединительная ткань развита слабо, признаки
воспалительной инфильтрации и фиброза печени
не обнаружены. Гепатоциты полигональной
формы, с центрально расположенным ядром,
нередко определяется ядрышко. Довольно часто
встречаются двухъядерные гепатоциты. Синусо-
идные капилляры обычных размеров. В просвете
определяются единичные эритроциты и лейко-
циты. В стенке синусоидных гемокапилляров и в
пространствах Диссе при больших увеличениях
выявляются единичные клетки Купфера, имею-
щие интактную структуру. В некоторых случаях
отмечено умеренное расширение и кровенапол-
нение синусоидных гемокапилляров, централь-
ных и под дольковых вен. Эндотелиальная вы-
стилка без деструктивных изменений, местами
отмечаются набухшие эндотелиоциты с гиперх-
ромными ядрами. Структура холангиол и меж-
дольковых желчных протоков без патологиче-
ских изменений. Все это указывает на то, что
изучаемый препарат не оказывает отрицательно-
го влияния на микроскопические структуры пе-
чени (рис.7.).
В группе контроля, у которых была при-
менена в виде гемостатического материала мар-
ля, отмечается кровоизлияние вокруг раны,
некроз гепатоцитов, отек синусоидов, полнокро-
вие сосудов. При макроскопическом и микро-
скопическом оценке на остальных сроках
наблюдения (1,7,14-е сутки) в контрольной
группе животных наблюдается постепенное
нарастание признаков воспаления, отмечается
плотный спаечный процесс, образование гной-
ного абсцесса. По сравнению с опытной груп-
пой, в контроле на 7-е сутки количество элемен-
тов воспаления повысились на 4 раза: поли-
морфно ядерных нейтрофилов – до 20, лимфоци-
тов – 27, плазматических клеток – 8.
На 30-е сутки наблюдается увеличение ко-
личества соединительной ткани в печени в виде
плотной соединительнотканной капсулы вокруг
фрагментов не рассосавшегося волокна марле-
вой салфетки (рис. 8).
М.М. Алимов, Б.М. Мирзахмедов, А.А. Сарымсаков, Б.А. Исмаилов, О.В. Ким
Биология ва тиббиёт муаммолари, 2016, №2 (87) 163
Рис.7.
СМ. УвХ72. Гематоксилин-эозин. Ткань
печени на 30-е сутки. Нормализация
ткани печени.
Рис.8.
СМ. Контроль на 30-сутки. Ув.Х72 .
Окраска гемотоксилин-эозин. Плотная соедини-
тельная капсула вокруг фрагмента.
При полуколичественной оценке числа и
распределении клеток на срезах ткани печени
определяются плотно упакованные полиморф-
ноядерные нейтрофилы, обильно инфильтриро-
ванные лимфоциты, большое количество плаз-
матических клеток и макрофагов, характеризу-
ющих воспалительный процесс. По итогам дан-
ного эксперимента марлевая салфетка является
раздражителем (более 15 баллов), а исследуемая
гемостатическая пленка «Гепроцел» - нераздра-
жающий агент(2 балла).
Заключение.
Таким образом, проведен-
ные исследования показали, что модифициро-
ванная гемостатическая плёнка «Гепроцел» при
различных паренхиматозных кровотечениях дает
стойкий гемостатический эффект. К концу экс-
периментального исследования наблюдаются
регенераторные процессы в паренхиме печени,
особенно в зоне повреждения, что свидетель-
ствует о восстановлении ткани печени после
применения предлагаемого гемостатического
материала. Приоценке системы баллов, в кото-
рой учитывались параметры полуколичествен-
ного определения числа и распределения клеток,
характеризующих
воспалительный
процесс,
«Гепроцел» был оценен как агент, не вызываю-
щий образование спаек и абсцессов.
Литература:
1. Смирнова Т.А., Юркштович Т.Л., Герасимо-
вич Г.Н. Капуцкий Н.Ф. /Современные препара-
ты на основе производных целлюлозы в клини-
ческой практике // Медицина 1996; 5(14). С. 39-
43.
2. Karashi Y., Toyoda K., Ohsawa N., Uchima
Т.,Tsuchiya Т., et. all. / Comparative Studies by
Cell Culture and in vivo Implantation Test on the
Toxicity of Natural Rubber Latex Materials, //J Bi-
omed Mater Res, 1992,26, pp.339-356.
3. Ikarasi Y., Tsuchiya Т., Toyoda K., Kobayashi
E., Doi H., and Hamanaka H., /Tissue Reactions and
Sensitivity to Iron Chromium Alloys,// Mater Trans,
2002,43, pp.3065-3071.
ВЛИЯНИЕ ГЕМОСТАТИЧЕСКОГО ИМ-
ПЛАНТАТА «ГЕПРОЦЕЛ» НА ЗАЖИВЛЕ-
НИЕ РАНЫ ПЕЧЕНИ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ
М.М. АЛИМОВ, Б.М. МИРЗАХМЕДОВ,
А.А. САРЫМСАКОВ, Б.А. ИСМАИЛОВ,
О.В. КИМ
АО “Республиканский специализированный
Центр хирургии им. акад. В.Вахидова”,
Республика Узбекистан, г. Ташкент
Проведенные исследования показали, что
разработанная нами гемостатическая плёнка -
«Гепроцел» при различных паренхиматозных
кровотечениях дает стойкий гемостатический
эффект. К концу экспериментального исследо-
вания наблюдаются регенераторные процессы в
паренхиме печени, особенно в зоне поврежде-
ния. Приоценке системы баллов, в которой учи-
тывались параметры полуколичественного опре-
деления числа и распределения клеток, характе-
ризующих воспалительный процесс, «Гепроцел»
был оценен как не раздражающий агент. Новый
гемостатический материал в виде гемостатиче-
ской пленки может быть применен для останов-
ки паренхиматозных кровотечений при травмах
и операционных кровопотерях.
Ключевые слова:
воспаление, гемостаз,
паренхиматозное кровотечение, печень, морфо-
логия.
