ФАРМАКОЛОГИЯ
52
Эпизоотология Иммунобиология Фармакология Санитария
2/2022
УДК 619.616.61724.8.559.59
https://doi.org/10.47612/2224
-
168X
-
2022
-
2
-
52
-
57
Мамадуллаев Г.Х.,
доктор ветеринариных наук
Элмуродов Б.А.,
доктор ветеринариных наук
Джураев О.А.,
кандидат ветеринарных наук
Джуракулов О.К.,
докторант
Файзиев У.М.,
стажер
-
исследователь
Научно
-
исследовательский институт ветеринарии Республики Узбекистан, г. Самарканд
РИФИЗОСТРЕП –
НОВЫЙ КОМБИНИРОВАННЫЙ
ПРЕПАРАТ ПРОТИВ МИКОБАКТЕРИЙ ТУБЕРКУЛЁЗА
Резюме
В статье представлены результаты лабораторных испытаний нового противотуберкулёзного препа-
рата «Рифизостреп» в организме экспериментально зараженных микобактериями туберкулёза бычьего и че-
ловеческого видов у 27 морских свинок. Установлено, что препарат «Рифизостреп» в организме морских сви-
нок в дозе 10 мг/кг обладает достаточной бактерицидной активностью против микобактерий туберкулёза
видов M. bovis и M. tuberculosis.
Ключевые слова:
рифизостреп, препарат, антимикробный, микобактерия, туберкулёз, M. bovis,
M. tuberculosis, бактериологический, бактерицид, бактериостатик, штамм, резистентность, чувствитель-
ность.
Summary
The article presents the results of in vivo laboratory tests of a new «Rifizostrep» anti
-
TB drug. «Rifizostrep» in
the organism of experimentally infected 27 guinea pigs. It is obtained that the preparation «Rifizostrep» in organism of
guinea pigs at 10 мg/кg dose has sufficient antimicrobial activity against mycobacterium a tuberculosis of type M. bo-
vis and M. tuberculosis
Keywords:
rifizostrep, drug, against
-
microbes mycobacterium, tuberculosis, M. bovis, M. tuberculosis, bacte-
riological, bactericid, strain, resistance, sensivity.
Поступила в редакцию 11.11.2022 г.
ВВЕДЕНИЕ
Туберкулёз –
хроническое инфекци
-
онное антропозоонозное заболевание, по
-
ражающее более 55 видов сельскохозяй
-
ственных животных, диких и пушных зве
-
рей, 25 видов птицы. Туберкулёз распро
-
странен также среди людей. Виды
M. tu
-
berculosis
и
M. bovis
представляют наи
-
большую угрозу для здоровья человека.
Человек заражается туберкулёзом бычьего
вида
преимущественно
через
сырое
молоко и молочные продукты, а также при
постоянном контакте с больным скотом. В
зависимости от цивилизованности и раз
-
витости страны возбудителем туберкулёза
бычьего вида люди заражаются в до 35 %
случаев. По всему миру только от туберку
-
лёза крупного рогатого скота наносится
экономический ущерб в размере 2 миллио
-
нов долларов в год.
По данным Всемирной организа
-
ции здравоохранения (ВОЗ) в мире более
2 млрд населения инфицированы мико
-
бактериями туберкулёза. Ежегодно
8
–
10 млн человек заболевают туберку
-
лёзом, более 3 млн умирает от этой бо
-
лезни, в том числе 900000 женщин и
более 300000 детей. Подсчитано, что каж
-
дую неделю умирает от туберкулёза 57
тысяч человек. Согласно веб
-
сайтам ВОЗ,
туберкулёз в настоящее время является
самой смертельной болезнью в мире.
Только в 2017 году туберкулёзом зара
-
зились 10 млн человек и умерло 1,6 млн
человек (источник: https://mir 24.tv).
Действующими
рекомендациями
борьба с заболеванием ведется только
санитарным путем: положительно реаги-
рующий на туберкулин крупный рогатый
скот, независимо от породы, возраста,
ФАРМАКОЛОГИЯ
2/2022
Эпизоотология Иммунобиология Фармакология Санитария
53
плодовитости или продуктивности, отпра
-
вляют на убой. При каждой туберкулиниза-
ции повторяется выделение положительно
реагирующих на туберкулин животных, в
результате чего теряется большое количе
-
ство племенного и продуктивного скота.
Следовательно, можно сохранить по
-
головье скота в хозяйстве, применяя метод
химиопрофилактики для защиты условно
здорового поголовья скота. Инкубацион
-
ный период возбудителя туберкулёза сос
-
тавляет до 35 дней. В начальной стадии
заражения, т.е. в инкубационном или латен
-
тном периоде болезни, молодняк крупного
рогатого скота обычно не реагирует на
туберкулин. Организм таких животных на
-
чинает реагировать на аллерген после ро-
дов или в период лактации, поэтому свое
-
временное проведение химиопрофилакти
-
ки против туберкулёза служит важным
средством в сохранении большого количе
-
ства племенного, продуктивного убойного
скота [5], [6].
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
В лаборатории по изучению туберку
-
лёза Узбекского НИИ ветеринарии разра
-
ботан новый комбинированный препарат
«Рифизостреп» с целью совершенствования
методов и средств борьбы с туберкулёзом
животных. Разработан технологический
регламент производства препарата.
Компоненты препарата, входящие в
состав рифизострепа, пропорциональны
пролонгации (удлинению периода дейст
-
вия) и синергизму (усилению эффекта од
-
ного препарата другим). Это сочетание
придает туберкулостатическому препарату
новую характерную черту и повышает его
бактерицидную активность.
Действие препарата «Рифизостреп»
на микобактерии туберкулёза изучено на
организме 27 морских свинок, заражен
-
ных штаммами
М. bovis
и
M. tuberculosis.
Перед экспериментом всех животных
исследовали аллергически на туберкулёз. С
этой целью использовали диагностикум
«ППД туберкулин для аллергической диаг
-
ностики туберкулёза у млекопитающих»
(серия 3) производства «ВИТИБИОВЕТ»
(ГОСТ 28346332
-
01:2019).
Подопытных животных заразили под
кожу бедра штаммами
M. bovis
и
M. tuber
-
culosis
(таблица 1).
Для сравнения эффективности пре
-
парата по отношении к возбудителям ту
-
беркулёза
(M. tuberculosis
7880) после за
-
ражения трём морским свинкам в качестве
контроля вводили препарат «Изониазид»
перорально.
С учетом инкубационного периода
развития микобактерий в живом организ
-
ме через 25 дней после заражения подо
-
пытным животным вводили препарат «Ри
-
физостреп» подкожно 1 раз в каждые
5 дней в течении 65 дней.
После заражения морским свинкам
V группы изониазид применяли перораль
-
но в каждые 5 день 1 раз в дозе 10 мг/кг.
Контрольным группам животных препарат
не применяли.
Независимо от иньекции препарата
«Рифизостреп» один раз в месяц всех
морских свинок внутрикожно аллергиче
-
ски проверяли ППД
-
туберкулином в дозе
0,1 мл/25 ТБ. Опыты продолжались 90
дней, по окончании срока наблюдения
животных опытных и контрольных групп
умерщвляли с целью дальнейших патоло
-
гоанатомических
и
гистологических
исследований.
Индекс зараженности туберкулёзом
у экспериментальных животных (селезе
-
ночный индекс) определяли по методу
Р. Войтека (1967):
ИЗ = ( ЖМ х 100% ): МС,
где ИЗ –
индекс зараженности; МС –масса
селезенки; ЖМ –
живая масса
.
РЕЗУЛЬТАТЫ ССЛЕДОВАНИЙ
Для изучения специфической анти
-
бактериальной активности препарата «Ри
-
физостреп» против возбудителей микобак-
терий туберкулёза все морские свинки пе-
ред началом эксперимента подверглись
прижизненному тестированию на туберку-
лёз аллергическим способом. По результа-
там исследований ни у одного животного
не установлена положительная туберкули-
новая реакция.
Затем морских свинок всех опыт-
ных, контрольных и сравнительной групп
заразили вирулентными микобактериями
туберкулёза штаммов
M. bovis
8
–
03
и
M. tuberculosis
7880 подкожно в дозе
0,03 мг/кг (таблица 1).
ФАРМАКОЛОГИЯ
54
Эпизоотология Иммунобиология Фармакология Санитария
2/2022
Таблица 1. –
Схема испытаний и результаты экспериментов препарата «Рифизостреп»
Вид
животного
Группа
Кол
-
во
гол.
Название
штамма
Способ
введения
Результат
пат.
анатом.
исследования
Бакт.
исследование
Морские
свинки
I
опытная
9
М. bovis
8
–
03
рифизостреп,
парентерально
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
Морские
свинки
II
контрольная
3
М. bovis
8
–
03
контроль, без
препарата
+ + +
+ + +
Морские
свинки
III
опытная
9
M. tuberculosis
7880
рифизостреп
парентерально
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
Морские
свинки
IV
контрольная
3
M. tuberculosis
7880
контроль,
без препарата
+ + +
+ + +
Морские
свинки,
сравнительная
группа
V
сравнитель-
ная
3
M. tuberculosis
7880
изониазид,
Per os
-
-
+
-
-
+
Примечание –
«+» установлен туберкулёз; «
-
»
туберкулёз не выявлен
Через 25 дней после заражения I и III
опытным группам животных препарат
«Рифизостреп» вводили подкожно 1 раз в
сутки каждые 5 дней до завершения экс
-
перимента.
Морским свинкам II и IV контроль
-
ных групп по 3 головы препарат не приме
-
няли.
Для сравнения противотуберкулёз
ной эффективности препарата «Рифизо
-
стреп» на возбудителей туберкулёза морс
-
ким свинкам
V группы в количестве 3
голов применяли препарат «Изониазид»
(ГИНК) в дозе 10 мг/кг Per os, после
заражения штаммом
M. tuberculosis
7880.
После заражения всех животных,
независимо от применённых препаратов,
исследовали на туберкулёз аллергическим
методом. В результате на месте инъекции
туберкулина в коже у всех морских свинок
образовалась небольшая папула. Размер
папул был более выражен у морских сви
-
нок контрольных групп.
По окончании эксперимента все жи
-
вотные опытной и контрольной групп были
умерщвлены и патологоанатомически ис
-
следованы. Во внутренних органах экспе
-
риментальных животных выявлены следу
-
ющие патологические изменения: при
вскрытии I опытной группы морских
свинок из 9 голов, получавших рифизо
-
стреп, выявлено, что на месте заражения
образовался узел соедини
-
тельно
-
тканного
характера размером с горошину. На разрезе
узла гной не обнаружен. Легкие светло
-
красного цвета с хорошо сохранившейся
структурой, на одной из долей обнару
-
жены 4 мелких, размером с просо, очажка,
на разрезе которых также не были обна
-
ружены некротическая масса и гной.
Печень –
без изменений, желчный пузырь
заполнен жидкостью, объем селезенки не
-
значительно увеличен. Другие изменения
не установлены (рисунок 1).
В сердце, почках и желудочно
-
ки
-
шечном тракте патологические изменения
выявлены не были. Аналогичные изме
-
нения наблюдались и во внутренних орга
-
нах остальных морских свинок. Селезеноч
-
ный индекс (индекс зараженности) в сред
-
нем по группе составил 1,02 %.
При патологоанатомическом иссле
-
довании морских свинок II контрольной
группы, зараженных штаммом
М. bovis
8
–
03,
выявлена генерализованная форма
типичного туберкулёза (рисунок 2). Селезе
-
ночный индекс составил 3,5 %.
ФАРМАКОЛОГИЯ
2/2022
Эпизоотология Иммунобиология Фармакология Санитария
55
Рисунок 1.
–
Внутренние органы морских свинок опытной группы,
получавших рифизостреп после заражения туберкулёзом
Патологоанатомическое
вскрытие
животных III группы, получавших рифи
-
зостреп, через 25 дней после заражения
M. tuberculosis,
штамм
№ 7880,
выявило
следующее: в легких наблюдались очаго
-
вые кровоизлияния, других изменений нет.
Сердце и селезенка без изменений,
края хорошо начерчены; печень без
изменений; желчный пузырь переполнен
желчью; почки без изменений, капсула
незначительно отслоена, кровоточивость,
границы четкие.
Рисунок 2.
–
Легкие и печень морских
свинок контрольной группы (
M. bovis
),
не получавших препарат
Рисунок 3.
–
Селезенка морской
свинки контрольной группы
(
M. tuberculosis
),
не получавшей препарат
Патологоанатомические изменения в
желудочно
-
кишечном тракте не выявлены.
Аналогичные изменения наблюдались и во
внутренних органах остальных морских
свинок. Индекс пораженности составил
1,2 %.
У морских свинок IV контрольной
группы, зараженных штаммом
M. tubercu
-
losis
№ 7880,
при патологоанатомическом
вскрытии выявлены следующие измене
-
ния: на месте заражения образовался нек
-
ротический мешочек беловато
-
желтого цве
-
та размером
2
–
3
см. Легкие увеличены в
объеме, отечны, имеются множественные
очаги казеозного некроза размером с про
-
сяное зерно. Сердце увеличено в разме
-
рах, имеются очаги кровоизлияний, на
-
блюдается гиперемия. Печень темно
-
крас
-
ного цвета, объем увеличен в 3 раза,
отмечаются многочисленные кровоизли
-
яния, паренхима на поперечном разрезе
полностью покрыта очагами казеозно
-
нек
-
ротической массы, желчный пузырь пере
-
полнен. Поверхность селезенки выпуклая,
ФАРМАКОЛОГИЯ
56
Эпизоотология Иммунобиология Фармакология Санитария
2/2022
увеличена объеме в
4
–
5
раз (рисунок 3),
подвержена диффузному казеозному нек
-
розу. В почках и желудочно
-
кишечном
тракте патологический процесс не установ-
лен. Индекс пораженности составил 3,7 %.
При вскрытии морских свинок срав
-
нительной группы, получавших изониазид,
после заражения штаммом
М. tuberculosis
№ 7880
выявлено следующее: у первого
животного в легких, сердце, селезенке,
почках и желудочно
-
кишечном тракте па
-
тологические изменения не установили.
Печень темно
-
красного цвета, имеется
несколько очагов некроза желтовато
-
белого цвета размером с просяное зерно.
У второго животного объем легких
увеличен, левая доля геморрагически вос
-
палена, имеется затвердевший некротиче
-
ский очаг размером с просяное зерно, на
поперечном срезе обнаружена казеозная
масса. В остальных внутренних органах и
лимфатических узлах какие
-
либо патоло
-
гические процессы не выявлены.
У третьего животного в легких обра
-
зовался некротический очаг размером c
просяное зерно. Печень слегка увеличе
-
на, имеется несколько очагов некроза
размером с просяное зерно. Объем селе
-
зенки несколько увеличен (рисунок 4), в
остальных внутренних органах и тканях
патологические изменения не выявлены.
Индекс пораженности составил 1,7 %.
Таблица 2. –
Индекс пораженности селезенки у экспериментальных животных
Вид
животного
Группа
Кол
-
во
гол.
Доза
препарата,
мг/кг
Название
штамма
Индекс
селезенки,
%
Морские
свинки
I опытная
9
10
M. bovis
8
–
03
1,04
Морские
свинки
II контрольная
3
-
M. bovis
8
–
03
3,5
Морские
свинки
III опытная
9
10
M. tuberculosis
1,2
Морские
свинки
IV контрольная
3
-
M. tuberculosis
3,7
Морские
свинки
V –
сравниельная,
изониазид
3
10
M. tuberculosis
1,7
Таким образом, результаты экспери
-
мента, проведенного на морских свинках,
показывают, что животные, получавшие
препарат, не заболели туберкулёзом. Инфи
-
цирование и заболевание были установле-
ны при вскрытии животных контрольной
группы, не получавших препарат «Рифи
-
зостреп». У них обнаружена генерализо-
ванная форма туберкулёза с казеозным
распадом, были поражены паренхиматоз-
ные органы (легкие, печень, почки, селе-
зенка).
Рисунок 4.
–
Селезенка морской
свинки контрольной группы
(
M. tuberculosis
),
не получавшей препарат
ФАРМАКОЛОГИЯ
2/2022
Эпизоотология Иммунобиология Фармакология Санитария
57
ВЫВОДЫ
1. На основании испытания препара-
та «Рифизостреп» против возбудителей ми-
кобактерий туберкулёза установлено, что
препарат обладает высокой бактериостати-
ческой и бактерицидной активностью.
2. У зараженных туберкулёзом мор-
ских свинок после применения препарата
«Рифизостреп» установлено, что в организ-
ме животных туберкулёз не развивается.
3. В организме морских свинок кон-
трольной группы, зараженных возбудите
-
лями туберкулёза, но не получивших пре-
парат, наблюдалось выраженное развитие
типичного туберкулёза во внутренних ор-
ганах.
4. Показатели индекса пораженности
органов у контрольных групп была выше в
2
–
3
раза, чем в опытных группах, получав-
ших препарат.
5. При проведении эксперименталь-
ных исследований установлено, что препа-
рат «Рифизостреп», в сравнении с изони-
азидом, проявляет ярко выраженную анти-
микробную активность, что открывает
перспективы продолжения исследований в
данном направлении.
ЛИТЕРАТУРА
1. Закон Республики Узбекистан «О защите населения от туберкулёза» от 11.05.2001 г.
№ 215
–
11.
–
6
л.
2. Антибиотики, сульфаниламиды и нитрофураны в ветеринарии / В. Ф. Ковалев [и др.] /
М. : ВО «АГРОПРОМИЗДАТ», 1988. –
222
с.
3. Гарифуллин, З. Р. Материалы юбилейной сессии, посвященной 80
-
летию ЦНИИТ РАМН,
75
-
летию со дня рождения акад. РАМН А. Г. Хоменко. –
М., 2001. –
С
. 113
–
114.
4. Донченко, Х. А. Использование средств и методов диагностики и профилактики туберку-
лёза крупного рогатого скота : автореф. дис.
…
д
-
ра ветеринар. наук / Х. А. Донченко. –
Новоси-
бирск, 2008. –
36
с.
5. Донченко, Н. А. Роль туберкулостатических препаратов в системе противотуберкулез-
ных мероприятий / Н. А. Донченко, А. С. Донченко, А. А. Колосов // Современное состояние и акту-
альные проблемы развитие ветеринарной науки и практики : материалы Междунар. науч. практ.
конф., посв. 100
-
летию КазНИВИ. –
Алматы, 2005. –
С.
144
–
145.
6. Жумаш, А. С. Меры борьбы и профилактики туберкулёза КРС в мелкофермерских и кре-
стьянских хозяйствах // Роль ветеринарной науки в развитии животноводства : Материалы меж-
дунар. науч.
-
произв. конф. / КазНИВИ. –
Алматы, 2000. –
С.
103
–
104.
7. Лысенко, А. П. Разработка и внедрение новых методов диагностики и профилактики ту-
беркулёза в Республике Беларусь / А. П. Лысенко, А. Е. Высоцкий, Т. Н. Агеева // Ветеринарная пато-
логия. –
2004.
–
№ 1
–
2.
–
С.
41
–
43.
8. Лечение туберкулёза: рекомендации для национальных программ / ВОЗ –
Женева,
1998.
–
77
с.
9. Лысенко, А. П. Разработка и внедрение новых методов диагностики и профилактики ту-
беркулёза в Республике Беларусь / А. П. Лысенко, А. Е. Высоцкий, Т. Н. Агеева // Ветеринарная пато-
логия. –
2004.
–
№ 1
–
2.
–
С.
41
–
43.
10. Финкель, Э. А. Биологический метод исследования при туберкулёзе / Э. А. Финкель,
Л. В. Михайлова. –
Фрунзе : Кыргызстан,
1976.
–
С.
118
–
149.
11. Ященко, Т. Н. Руководство по лабораторным исследованиям по туберкулёзу /
Т. Н. Ященко, И. С. Мечева. –
М. : Медицина, 1973.
