79
ПРОБЛЕМЫ
БИОЛОГИИ
И
МЕДИЦИНЫ
1 (68) 2012
Листериоз
–
малоизвестная
зоонозная
инфекция
,
которая
представляет
опасность
для
здо
-
ровья
людей
.
Широкое
распространение
листерий
в
природе
,
их
значительная
устойчивость
во
внешней
среде
,
трудность
клинического
диагноза
,
поражение
человека
ставят
листериоз
в
эпидемиологическом
плане
в
ряд
особо
опасных
болезней
.
У
человека
заболевание
вызывает
вид
Listeriamonocytogenes –
спонтанное
и
экспериментальное
заражение
сопровождается
мо
-
нонуклеарным
лейкоцитозом
.
У
человека
заболевание
протекает
в
большинстве
случаев
с
по
-
ражением
нервной
ткани
или
в
виде
ангинозно
-
септической
формы
.
Из
организма
больного
животного
возбудитель
выделяется
с
мочой
,
испражнениями
,
носовым
отделяемым
,
молоком
и
околоплодной
жидкостью
.
От
человека
возбудитель
выделяли
J. Dumont, L. Cotoni
из
спин
-
номозговой
жидкости
больного
менингитом
. E. Jungherr
выделяли
листерии
прилистериозном
энцефалите
.
П
.
П
.
Сахаров
,
Е
.
И
.
Гудкова
опубликовали
ряд
работ
по
выделению
листерий
из
организма
больных
людей
.
Нашей
задачей
было
изучить
в
сравнительном
аспекте
эффективность
ряда
питательных
сред
для
выделения
листерий
из
молока
.
Были
испытаны
следующие
питательные
среды
:
теллурит
-
флоримицин
-
хлоридная
среда
;
агар
Мартена
;
мясо
-
пептонныйагар
с
теллуритом
калия
;
мясо
-
пептонный
печеночный
агар
с
1%
глюкозы
и
2%
глицерина
;
мясо
-
пептонныйагар
;
индикаторная
среда
с
бромтимоловым
си
-
ним
,
для
приготовления
которой
к
1000
мл
МППА
добавляют
60
мл
индикатора
2%
водного
раствора
бромтимолового
синего
,
исходный
цвет
среды
темно
-
зеленый
,
возбудитель
листе
-
риоза
при
росте
изменяет
его
до
желтого
;
колонии
листерий
в
первые
24
ч
.
роста
дымчато
-
серого
цвета
,
а
через
36-48
ч
.
становятся
золотисто
-
желтыми
характерной
морфологии
;
инди
-
каторная
среда
с
бромкрезоловым
пурпуровым
индикатором
индикатором
(
на
1000
мл
МППА
добавляют
60
мл
2%
раствора
бромкрезолового
пурпурового
индикатора
);
мясо
-
пептонный
бульон
с
добавлением
8,5%
хлористого
натрия
;
МППБ
с
роданистым
калием
;
МПБ
.
Из
суточных
агаровых
культур
листерий
штаммов
9-72, 9-127, 2795/ 5
готовили
взвесь
,
со
-
держащую
1
млрд
.
микробных
клеток
.
в
1
мл
по
оптическому
стандарту
мутности
.
После
мик
-
роскопии
и
исследования
в
реакции
агглютинации
делали
разведения
ее
в
стерильном
и
в
све
-
жем
не
пастеризованном
молоке
от
1:100
до
1:100000.
По
0,1
мл
каждого
разведения
наносили
на
поверхность
среды
в
чашках
Петри
и
инкубировали
при
37
0
.
При
культивировании
на
жид
-
ких
питательных
средах
в
последующем
делали
пересев
на
плотные
среды
и
определяли
нали
-
чие
колоний
,
их
количество
,
морфологию
и
т
.
д
.
Посевы
на
плотных
средах
просматривали
в
проходящем
свете
,
используя
осветитель
типа
ОИ
-31
с
голубым
светофильтром
.
Колонии
листерий
в
проходящем
свете
в
отличие
от
коло
-
ний
других
микроорганизмов
имеют
голубую
окраску
с
зеленоватым
оттенком
и
мелкозерни
-
стую
структуру
,
имеют
запах
творога
или
молочной
сыворотки
,
обусловленный
накоплением
продуктов
углеводного
обмена
.
Кроме
того
,
готовили
мазки
и
окрашивали
их
по
Граму
.
Для
Мансурова
М
.
Х
.,
Саъдуллаева
Г
.
У
.,
Атоева
М
.
А
.,
Якубов
Ш
.
Н
,
Нуритов
А
.
И
.,
Орипова
Ф
.
Ш
.
СРАВНИТЕЛЬНАЯ
ОЦЕНКА
ЭФФЕКТИВНОСТИ
ПИТАТЕЛЬНЫХ
СРЕД
ДЛЯ
ВЫДЕЛЕНИЯ
ЛИСТЕРИЙ
ИЗ
МОЛОКА
Бухарский
государственный
медицинский
институт
Питательные
среды
Выросло
колоний
при
посеве
разных
разведений
1:100 1:1000
1:10000
1:100000
Теллурит
-
флоримицин
-
хлоридная
среда
740 ± 23,2
80 ± 5,2
12 ± 1,5
1
МППА
с
0,5%
глюкозы
и
1%
глицерина
420 ± 33,2
30 ± 12,9
3 ± 1,4
-
Агар
Мартена
640 ± 11,6
45 ± 1 5,8
7 ± 1,2
-
Среда
с
бромтимоловым
±
синим
650 ± 17,4
30 ± 2,9
8 ± 1,2
-
Среда
с
бромкрезоловымпурпуровым
400 ± 40,6
25 ± 1,7
7 ± 1,2
-
МПА
с
теллуритом
калия
800 ± 62,8
70 ± 5,8
10 ± 2,6
1
МППБ
с
роданистым
калием
500 ± 19,3
75 ± 2,9
10 ± 2,6
1
МПБ
с
8,5%
хлористого
натрия
600 ± 11,6
60 ±2,9
7 ± 1,1
1
МПБ
300 ± 11,6
40 ± 2,9
2 ± 5,8
-
МПА
410 ± 17,4
50 ± 1,7
3 ± 1,4
-
80
ПРОБЛЕМЫ
БИОЛОГИИ
И
МЕДИЦИНЫ
1 (68) 2012
контроля
используя
те
же
тесты
,
исследовали
чистые
культуры
листерий
.
Эффективность
среды
оценивали
по
времени
роста
листерий
и
количеству
колоний
с
уче
-
том
разведения
исследуемого
материала
.
Наиболее
эффективными
для
выделения
листерий
из
искусственно
-
инфицированного
мо
-
лока
оказались
:
из
плотных
–
теллурит
-
флоримицин
-
хлоридная
среда
,
МПА
с
теллуритом
ка
-
лия
;
из
жидких
–
МППБ
с
роданистым
калием
и
МПБ
с
8,5%
хлористого
натрия
(
см
.
табл
.)
На
теллурит
-
флоримицин
-
хлоридной
среде
в
первые
сутки
наблюдали
рост
в
виде
мельчай
-
ших
колоний
,
на
вторые
сутки
они
приобретали
черный
цвет
за
счет
восстановления
теллури
-
та
калия
до
металлического
теллура
.
На
жидких
средах
–
МППБ
с
роданистым
калием
и
МПБ
с
добавлением
8,5%
хлористого
натрия
–
рост
проявлялся
в
виде
едва
заметной
опалесценции
.
При
посеве
на
эти
среды
разве
-
дения
1:100000
листерии
вырастали
в
100%
случаев
,
при
использовании
с
этой
целью
осталь
-
ных
жидких
питательных
сред
рост
в
100%
случаев
имело
место
лишь
при
посеве
разведения
1:100000
и
менее
.
Заключение
.
Наиболее
эффективными
для
выделения
листерий
из
молока
оказались
из
плотных
питательных
сред
теллурит
-
флоримицин
-
хлоридная
среда
,
МПА
с
теллуритом
калия
;
МПБ
с
добавлением
8,5%
хлористого
натрия
.
Эффективность
выделения
листерий
из
пастеризованного
молока
при
использовании
ряда
плотных
и
жидких
питательных
сред
.
Использованная
литература
:
1.
Бакулов
И
.
А
.
Листериоз
человека
и
животных
.
М
.,
Колос
, 2000.
2.
Бутко
М
.
П
.
К
вопросу
специфичности
метода
флуоресцирующих
антител
.
М
.,
Колос
, 2001.
3.
Ганнушкин
М
.
С
.
и
др
.
Использование
метода
флуоресцирующих
антител
для
ускоренной
диагно
-
стики
бруцеллеза
и
листериоза
животных
.
М
.,
Колос
, 2003.
4. Dijkstra R/ Survival Listeria monocytogenes in variety biomaterials Am Veter Med. Assn.
