142
ПРОБЛЕМЫ
БИОЛОГИИ
И
МЕДИЦИНЫ
1 (68) 2012
Проблема
выделения
и
внедрения
в
практику
новых
высокоактивных
штаммов
микроорга
-
низмов
-
продуцентов
целлюлозолитических
ферментов
весьма
актуальна
.
Одной
из
основных
сфер
практического
применения
целлюлозолитических
ферментов
является
кормопроизводст
-
во
.
Силос
из
отходов
растениеводства
с
использованием
ферментной
массы
,
позволяет
полу
-
чить
полноценный
корм
,
содержащий
в
достаточном
количестве
белки
,
витамины
,
аминокис
-
лоты
.
Имеющиеся
в
литературе
данные
показывают
,
что
наиболее
активные
продуценты
цел
-
люлозолитических
ферментов
встречаются
среди
грибов
.
Задача
наших
исследований
заключалась
в
выделении
из
природных
источников
новых
целлюлозолитических
активных
штаммов
,
определении
их
родовой
и
видовой
принадлежно
-
сти
и
изучении
их
цитоморфологических
особенностей
.
Грибы
продуценты
целлюлаз
выделяли
из
почвы
и
гниющих
растительных
остатков
.
Все
штаммы
подвергались
исследованию
после
проверки
их
целлюлозолитической
активности
.
При
определении
родовой
и
видовой
принадлежности
использовали
соответствующие
опреде
-
лители
.
Изучениекультуральных
свойств
исследуемых
грибов
проводили
в
динамике
гигант
-
ских
колониях
выращенных
на
среде
Чапека
и
сусло
-
агаре
при
температуре
28-30
градусов
.
Определение
целлюлозотической
активности
гриба
проводили
по
видоизменной
методике
Mandels.
Для
получения
целлюлозолитических
ферментов
микроорганизмы
-
продуценты
вы
-
ращивали
в
глубинных
и
поверхностных
условиях
.
В
глубинных
условиях
культивирования
грибы
выращивали
в
колбах
Эрленмейера
объемом
500
мл
со
100
мл
среды
Mandels
В
течение
3
суток
.
Поверхностное
культивирование
проводили
на
среде
,
состоящей
из
рав
-
ных
частей
соломы
и
отрубей
.
Активность
целлюлаз
определяли
в
10%
водной
вытяжке
2-
х
суточной
культуры
.
Из
исследованных
образцов
почвы
и
гниющих
растительных
остатков
было
выделено
250
культур
микроскопических
грибов
,
которые
анализировали
на
способность
образовывать
цел
-
люлозолитические
ферменты
.
Среди
выделенных
грибов
–
продуцентов
целлюлозолитических
ферментов
в
доминируюшим
количестве
обнаруживались
грибы
из
рода
Trichoderma.
Второе
места
по
количеству
активных
продуцентов
целлюлаз
занимали
грибы
родов
Aspergillus
и
Penicillium.
Грибы
родов
Fusarium
и
Chaetomium
проявляли
слабую
целлюлозо
литическую
активность
.
Наиболее
активные
штаммы
грибов
в
дальнейшем
детально
изучали
.
Как
показывают
данные
,
приведденные
в
таблице
1,
все
исследованные
грибы
рода
Tricho-
derma
обладали
целлюлозолитической
активностью
,
хотя
и
в
разной
степени
.
Наивысщая
целлюлозолитическая
активность
по
отношению
к
хлопковому
волокну
при
поверхностном
способе
культивирования
отмечена
у
Trichodermasp.-9
и
Trichodermasp.-52.
Trichodermasp.-76.
Аналогичные
результаты
биосинтеза
целлюлозолитических
ферментов
по
отношению
к
хлопковому
волокну
получены
при
глубинном
способе
выращивания
.
Наилучшая
активность
фермента
,
гидролизующего
NA-
КМЦ
при
поверхностном
выращивании
отмечалась
у
Tricho-
dermasp-112, Trichodermasp-9
и
Trichodermasp-205.
У
грибов
Trich
о
dermasp-7, Trichodermasp-
Хамидова
C.
Х
.,
Мустафаева
Ф
.
А
.,
Якубов
Ш
.
Н
.,
Ибодов
Б
.,
Мирахмедова
С
.
С
.
ИЗУЧЕНИЕ
КУЛЬТУРАЛЬНЫХ
ПРИЗНАКОВ
И
ЦЕЛЛЮЛАЗНОЙ
АКТИВНОСТИ
НЕКОТОРЫХ
ВИДОВ
ГРИБОВ
РОДА
TRICHODERMA
Бухарский
государственный
медицинский
институт
Штаммы
грибов
рода
Trichoderma
Поверхностное
культивирова
-
ние
Глубинное
культивирование
Активность
,
ед
/
г
N
а
-
КМЦ
хлопковое
волокно
N
а
-
КМЦхлопковое
волокно
Т
.sp. -9
68 120
6,2 12,3
Т
.sp.-52
56 105
6,0 9.8
Т
.sp.-7
50 28
5,2 3,6
Т
.sp.-76
55 32
4,5 3,0
Т
.sp.-112
70 46
6,6 4,3
Т
.sp.-205
65 85
6,7 4,4
Т
.sp.-40
55 80
6.4 7,6
143
ПРОБЛЕМЫ
БИОЛОГИИ
И
МЕДИЦИНЫ
1 (68) 2012
76, Trichodermasp-40
уровень
активности
NA-
КМЦ
был
значительно
ниже
.
Наиболее
высокой
активностью
ферментов
,
гидролизующих
NA-
КМЦ
при
глубинном
культивировании
обладали
Trichodermasp-205
и
Trichodermasp-112.
Значения
активности
целлюлаз
при
глубинном
способе
выращивания
были
ниже
,
чем
при
поверхностном
.
У
наиболее
активных
штаммов
грибов
рода
Trichoderma
изучались
–
культуральные
признаки
с
целью
установления
их
систематического
положения
.
Результаты
исследований
показали
,
что
грибы
рода
Trichoderma
отличаются
большой
из
-
менчивостью
культуральных
признаков
.
Например
,
по
скорости
роста
колоний
их
можно
раз
-
делить
на
3
группы
:
быстрорастущие
,
промежуточные
и
медленнорастущие
.
Так
,
из
7-
и
штам
-
мов
грибов
наиболее
высокой
скоростью
роста
отличались
рода
Trichodermasp-9,52,
промежу
-
точные
положение
занимали
штаммы
Trichodermasp-112
и
Trichodermasp-205,
а
грибы
Tricho-
dermasp-7
и
-76
росли
относительно
медленно
.
Детальное
изучение
указанных
характеристик
в
соответствии
с
системой
Rifai
позволило
-
отнести
выделенные
штаммы
Trichodermasp—9,52
к
Trichoderma Longibrachiatum, Trichoder-
masp -112, 205 – T.koningii, Trichodermasp - 40 – T.harzianum Trichodermasp -7,76 - T. aureo-
virde.
Таким
образом
,
выделены
и
определены
до
вида
активные
штаммы
целлюлозолитических
-
ферментов
,
установлена
способность
грибов
рода
Trichoderma
образовывать
целлюлозолити
-
ческие
ферменты
.
Культивирование
полученных
штаммов
как
при
глубинном
,
так
и
при
поверхностном
спо
-
собе
культивирования
показывает
что
,
новые
штаммы
вполне
технологичны
и
могут
быть
ис
-
пользованы
как
генетически
исходный
материал
для
получения
промышленных
линий
проду
-
центов
целлюлаз
.
Использованная
литература
:
1.
Султанова
И
.
Г
.,
Ташпулатов
Ж
.,
Турабова
Я
.
У
.,
Мирзарахимова
М
.
Выделение
и
отбор
микроорга
-
низмов
–
деструкторов
полимерных
материалов
.
Узбекский
биологический
журнал
,1998.
№
5.
С
.10-
13
2.
Ташпулатов
Ж
.,
Шульман
Т
.
С
.,
Байбаев
Б
.
Г
.
Онтогенез
гибридных
культур
Trichoderma harzianum-
продуцентов
целлюлаз
и
белка
.
Доклады
АН
РУ
,1999.
№
1.
С
. 50-52.
3.
Рудаков
О
.
Л
.
Микофильные
грибы
,
их
биология
и
практическое
значение
»,
М
., 1981.
С
.157.
4.
Салина
О
.
А
.
Ферментативная
активность
грибов
рода
Trichoderma Pers: Fr.
Науч
.
достиж
.
Микро
-
биол
.
Нар
.
Х
-
ву
.
Ч
. 1.
Вильнюс
, 1988.
С
. 105-108.
5. Rifai M.A. A revision of the genusTrichoderma» -
М
ycologia. Papers, 1969,
р
. 116.
Культуральные
признаки
грибов
рода
Trichodermasp.-9
Изучаемые
признаки
Trichodermasp.-
9,52
Trichodermasp.- 112 ,205
Trichodermasp.-7
и
-
76
Trichodermasp.-
40
Размер
ко
-
лонии
на
3
сутки
Диаметр
14
см
Диаметр
10-12
см
Диаметр
8-10
см
Диаметр
10-12
см
Окраска
колоний
Вначале
водяни
-
сто
-
белые
с
ко
-
нидиеобразовани
ем
изменяются
от
беловато
–
зеленого
к
олив
-
ково
-
зеленому
Вначале
водянисто
-
белые
с
конидиеобразо
-
ванием
.
Ярко
-
зеленые
,
затем
темно
-
зеленые
Вначале
грязно
-
белые
,
затем
пере
-
ходят
от
желто
-
зеленого
к
темно
зеленому
Окраска
коло
-
ний
изменяются
от
белого
до
светло
зеленого
к
темно
-
зеленому
Строение
колоний
Воздушный
ми
-
целий
сильно
развитий
,
рыхло
-
ватый
,
пушистый
Вначале
развивается
мощный
гладкий
,
раз
-
ветвленный
субстрат
-
ный
мицелий
,
Затем
от
субстратного
мицелия
поднимается
равномер
-
ный
ватообразный
,
воз
-
душный
мицелий
Колонии
со
скуд
-
ным
воздушным
мицелием
.
Середи
-
на
исчезающая
,
по
краям
плотная
.
Ми
-
целий
тонкий
ните
-
видный
,
прижатий
к
субстрату
Колонии
волок
-
нистые
.
Мицелий
сильно
разветвленный
,
образует
воз
-
душные
гифы
