137
После консультации аллерголога всем
пациентам было назначено комплексное
лечение,
включавшее
антагонисты
лейкотриеновых
рецепторов
–
монтелукаст 10 мг по 1 таб. 1 раза в день
внутрь в течение 30 дней. У 13 больных с
интермиттирующей формой заболевания
наблюдалось
резкое
уменьшение
симптомов заболевания на 7-й день
лечения,
а
у
21
больного
с
персистирующей формой на 10-й день.
После проведенной терапии у всех
больных имело место выраженное
уменьшение симптомов заболевания,
которые не снижали качество их жизни.
У больных с интермиттирующей формой
аллергического ринита уровень IgE в
крови составил 300,4 пг/мл, у больных с
персистирующей формой – 345,6 пг/мл.
Выводы
1.
Проведение
специфического
аллергологического
исследования
поможет врачам-оториноларингологам в
диагностике
различных
форм
аллергического ринита и выборе тактики
лечения.
2. Применение антилейкотриеновых
препаратов
способствует
снижению
симптомов заболевания, нормализации
показателей IgE и улучшению качества
жизни больных.
Литература
1. ARIA. Аллергический ринит и
его влияние на бронхиальную астму //
Аллергология. – 2008 (Прил.). – №3. – С.
43-56.
2. Angier E., Willington J, Scadding
G, et al; Management of allergic and non-
allergic rhinitis: a primary care summary of
the Prim // Care Respir. J. – 2010. – Vol. 19,
№3. – P. 217-222.
3. Ciprandi G., Passalacqua G. Allergy
and the nose // Clin. Exp. Immunol. – 2011.
– Vol. 153, Suppl. 1. – P. 22-26.
4. European Position Paper on
Rhinosinusitis and Nasal Poliposis //
Rhinology. – 2013. – Vol. 20.
5. Min Y.G. The pathophysiology,
diagnosis and treatment of allergic rhinitis //
Allergy Asthma Immunol. Res. – 2010. –
Vol. 2, №2. – P. 65-76.
6. Treatment for seasonal allergic
rhinitis. Comparative effectiveness review. –
Chicago, 2013.
Резюме.
Обследованы 50 больных с
аллергическим ринитом, которые были
разделены
на
2
группы:
интермиттирующая
(34%)
и
персистирующая формы (66%). Всем
больным
назначено
комплексное
консервативное лечение, которое привело
к уменьшению симптомов и удлинению
ремиссии заболевания.
Summary
.A total of 50 patients who
were diagnosed with allergic rhinitis were
included in the study. Patients were
categorized into two groups: as having
intermittent (34%) and perennial (66%)
rhinitis. All patients were given conservative
treatment to facilitate symptom impairment
and prolonged remission.
Заболевания глотки и гортани
УДК: 616-006.31:575.164
ИЗУЧЕНИЕ ПОЛИМОРФИЗМА ГЕНА VEGF-A У БОЛЬНЫХ С
АНГИОФИБРОМАМИ НОСОГЛОТКИ
О.Б. Абдурахманов, К.Д. Джаббаров, М.А. Гафур-Ахунов
Ташкентский институт усовершенствования врачей
Фактор роста эндотелия сосудов
(VEGF) – семейство структурно близких
между собой белков, которые совместно
с
рецепторами
(VEGFR)
играют
существенную роль в развитии и
регуляции деятельности кровеносных и
лимфатических сосудов. VEGF-А влияет
на развитие новых (ангиогенез) и
138
выживание
незрелых
кровеносных
сосудов
(сосудистую
поддержку),
связываясь с двумя близкими по
строению
мембранными
тирозинкиназными
рецепторами
(VEGFR-1 и VEGFR-2) и активируя их
[5]. Кроме того, данные последних лет
свидетельствуют в пользу того, что
VEGF-A является не только главным
стимулятором
ангиогенеза,
но
и
лимфангиогенным фактором [3,4].
Несмотря на то, что идентичность
генома человека чрезвычайно высока, на
уровне
последовательностей
генов
отличия между двумя индивидуумами
составляют около 0,1% [2]. Наиболее
частой причиной различий в структуре
генов являются точечные мутации –
замены единичных нуклеотидов (SNP –
single-nucleotide
polymorphism).
Выявлено два класса высокоаффинных
VEGF-А-связывающих сайта на клетках
и высказано предположение, что такие
сайты необходимы моноцитам при
VEGF-зависимом хемотаксисе. Показано,
что подобные низкомолекулярные (120-
130 кДа) рецепторы существуют на
клетках опухоли и связывают VEGF-
А165, но не VEGF-А121. Таким образом,
определенный
тип
опухоли
и
эндотелиальные клетки экспрессируют
низкоаффинные
белки,
которые
избирательно связывают кодируемые
последовательности [1].
Цель
исследования
Изучение
встречаемости
у
пациентов с ангиофибромой носоглотки
наиболее характерных полиморфных
маркеров фактора VEGF-A: C963T,
G405C, -1154A.
Материал и методы
Для
определения
генетических
маркеров C963T, G405C, -1154A гена
VEGF-A
использовали
метод
пиросеквенирования. Методика детекции
генетических
полиморфизмов
генов
VEGF-A включала следующие этапы. 1.
Выделение
ДНК
из
клинического
материала. Проводилась стандартными
методами, нами использованы комплекты
реагентов
ДНК-сорб-B
производства
ФГУН
Центральный
НИИ
эпидемиологии Роспотребнадзора. 2.
ПЦР-амплификация
фрагмента,
содержащего полиморфный генетический
локус. При амплификации фрагмента
ДНК один из пары праймеров был связан
на 5’-конце с биотином; цепь ДНК,
которая
послужит
матрицей
для
пиросеквенирования, амплифицируется с
биотинилированым
праймером.
3.
Пробоподготовка
ПЦР-продукта.
Включала инкубацию ампликона с
частицами
сефарозы,
покрытыми
стрептавидином, денатурацию ампликона
и серию последовательных отмывок, в
результате
которых
образовывался
одноцепочечный
ПЦР-продукт,
фиксированный на частицах сефарозы. 4.
Иммобилизация
ПЦР-продукта
на
твердой
поверхности
и
отжиг
секвенирующего праймера в области
анализируемого генетического локуса. В
результате образовывался дуплекс между
ДНК-матрицей
и
секвенирующим
праймером, необходимый для проведения
реакции пиросеквенирующего синтеза. 5.
Секвенирование
ПЦР-продукта
–
проведение реакции пиросеквенирования
и анализ полученных результатов.
Для
проведения
реакции
пиросеквенирования
нами
были
использованы системы генетического
анализа Pyro Mark Q24. Поскольку
объектом
исследования
являлись
охарактеризованные
полиморфные
локусы в геноме человека, и положение
однонуклеотидного
полиморфизма
известно,
была
использована
возможность
для
автоматической
обработки
результата
программным
обеспечением используемых приборов.
На основании относительной высоты
пиков на пирограмме определялось гомо-
или
гетерозиготное
состояние
по
полиморфному локусу. Анализируемая
последовательность
для
анализа
генетических маркеров C963T, G405C, -
1154A
гена
VEGF-A
была
ACCA/GTGCTGGGT,
C/GGACAGGGGCAAAGTG,
139
GAA/GGGGCTGAGGC, соответственно
для каждого маркера.
Результаты
Результаты
генотипирования
VEGF-A у больных с ангиофибромой
носоглотки представлены в таблице 1.
Анализ данных показал, что у больных
при анализе генетического маркера
С963T встречается генотип СС, тогда как
у практически здоровых людей данный
генотип обнаружен не был. При
генотипировании маркера G405С гена
VEGF-A среди больных генотип CC
выявлялся у 40,0%, в контрольной группе
– у 15,0%. В случае исследования
полиморфизма G-1154A наблюдалось
снижение
(10,0%)
встречаемости
генотипа AA и увеличение обнаружения
генотипа GG (50,0%) в группе пациентов
с ангиофибромой по сравнению с
контролем (соответственно 30,0 и 10,0%).
Ожидаемая частота распределения
генотипов по равновесию Харди –
Вайберга (РХВ) в группе больных при
анализе генетического маркера С963T
гена VEGF-A составила: С/С=0,49;
С/Т=0,42; Т/Т=0,09; в контрольной
группе: С/С=0,56; С/Т=0,37; Т/Т=0,06.
Наблюдаемая частота распределения
генотипов по РХВ в группе больных
была: С/С=0,55; С/Т=0,30; Т/Т=0,15
(ч2=1,6; Р=0,2); в группе здоровых
доноров: С/С=0,50; С/Т=0,50; Т/Т=0,0
(ч2=0,1; Р=2,2).
При анализе генетического маркера
G405С гена VEGF-A ожидаемая частота
распределения генотипов по РХВ в
группе больных составила: G/G=0,06;
G/C=0,37; C/C=0,56; в группе контроля:
G/G=0,49;
G/C=0,42;
C/C=0,09.
Наблюдаемая частота распределения
генотипов в группе больных была:
G/G=0,05; G/C=0,40; C/C=0,55 (ч2=0,1;
Р=0.8); в группе здоровых доноров:
G/G=0,45; G/C=0,50; C/C=0,05 (ч2=0,7;
Р=0,4).
При анализе генетического маркера
G1154A гена VEGF-A ожидаемая частота
распределения генотипов по РХВ в
группе больных составила: G/G=0,49;
G/A=0,42; A/A=0,09; в контрольной
группе: G/G=0,09; G/A=0,42; A/A=0,49.
Наблюдаемая частота распределения
генотипов в группе больных была:
G/G=0,50; G/A=0,40; A/A=0,1 (ч2=0,05;
Р=0,8); в группе здоровых доноров:
G/G=0,05; G/A=0,50; A/A=0,45 (ч2=0,7;
Р=0,4).
В таблице 2 приведены результаты
определения различий между ожидаемой
и
наблюдаемой
частотами
гетерозиготности генетических маркеров
гена VEGF-A. Достоверных различий в
определении гетерозигот среди больных
различных групп не выявлено: как в
опытной, так и в контрольной группах
количество гетерозигот варьировало в
пределах 40-50%, наименьшее число
гетерозигот наблюдалось при анализе
генетического маркера C963T у больных
с ангиофибромой.
140
Таблица 1
Распределение частот генотипов гена VEGF-A у больных с ангиофибромой носоглотки, абс. (%)
Группа
Генотип VEGF-A
Аллели VEGF-A
C963T
G405C
-1154A
C963T
G405C
-1154A
C/T
T/T
C/C
G/C
G/G
C/C
A/G
A/A
G/G
C
T
G
C
Больные
6
(30,0
±7,2)
11
(55,0
±7,9)
3
(15,0
±5,7)*
7
(35,0
±7,5)
5
(25,0
±6,9)
8
(40,0
±7,8)*
8
(40,0
±7,8)
2
(10,0
±4,8)*
10
(50,0
±7,9)*
28
(70,0
±7,2)
12
(30,0
±7,2)
10
(25,0
±6,8)*
30
(75,0
±6,8)*
28
(70,0
±7,2)*
12
(30,0
±7,2)*
Контроль
10
(50,0
±7,9)
10
(50,0
±7,9)
0
10
(50,0
±7,9)
7
(35,0
±7,5)
3
(15,0
±5,7)
10
(50,0
±7,9)
6
(30,0
±7,3)
4
(20,0
±6,3)
30
(75,0
±6,8)
10
(25,0
±6,8)
28
(70,0
±7,2)
12
(30,0
±7,3)
30
(30,0
±7,2)
10
(70,0
±7,2)
* – p<0,05.
Таблица 2
Различия между ожидаемой (числитель) и наблюдаемой (знаменатель) частотами гетерозиготности генетических маркеров гена VEGF-
A
Группа
C963T
G405C
-1154A
гетерозиго
тность
D
гетерозиго
тность
D
гетерозиго
тность
D
Больные
0,42
0,3
0,4
0,37
0,4
-0,07
0,42
0,4
0,05
Контроль
0,37
0,50
-0,26
0,42
0,50
-0,16
0,42
0,50
-0,16
141
Обсуждение
Экспрессия VEGF стимулируется
множеством проангиогенных факторов,
включая
эпидермальный
ростовой
фактор,
основной
фибробластный
ростовой
фактор,
тромбоцитарный
ростовой фактор, интерлейкин 1в, и
факторами внешней среды, такими как
рН, давление и концентрация кислорода.
Подобное
влияние
заключается
в
опосредованной
через
VEGF
стимуляции важных для ангиогенеза и
лимфангиогенеза факторов, включая
антиапоптотические белки, молекулы
клеточной
адгезии
и
металлопротеиназы. Однако неоспорим
тот факт, что продукция VEGF в ответ
на стандартные стимулы варьирует,
причем в популяции встречаются
стабильные низкопродуцирующие и
высокопродуцирующие фенотипы при
неизменной структуре синтезируемого
белка[6].
Изучение частоты встречаемости
полиморфизм гена VEGF-A позволило
установить,
что
у
больных
с
ангиофибромой носоглотки наблюдается
генотип CC генетического маркера
С963T, увеличение частоты генотипа CC
до 40,0% при анализе маркера G405С,
снижение частоты генотипа AA до
10,0% и увеличение частоты генотипа
GG до 50,0% при анализе маркера G-
1154A. У больных и лиц контрольной
группы при анализе генетического
маркера
С963T
наблюдаемое
распределение частот генотипов по
данному полиморфизму не отклонялось
от РХВ, то есть соответствовало
ожидаемому (ч2=0,1; Р=2,2).
Выводы
1. Выявленный полиморфизм гена
VEGF-A позволяет предположить, что
однонуклеотидные замены в
промоторном регионе генов
индивидуальны и оказывают
определенное влияние на особенности
функционирования белков и на
экспрессию гена.
2. У больных ангиофибромой
носоглотки наблюдается генотип CC
генетического маркера С963T,
увеличение частоты генотипа CC до
40,0% при анализе маркера G405С,
снижение частоты генотипа AA до
10,0% и увеличение частоты генотипа
GG до 50,0% при анализе маркера G-
1154A.
Литература
1. Arbiser J.L. Beating the rap in
angiogenesis // Blood. – 2011. – Vol. 118,
№7. – P. 1719-1720.
2. Chen H., Zhang T., Gong B., Cao
X. Association between VEGF -634G/C
polymorphism
and
susceptibility
to
autoimmune diseases: A meta-analysis //
Gene. – 2015. Vol. 558, №2. – P. 181-186.
3. Dehghanian F., Hojati Z., Kay M.
New Insights into VEGF-A Alternative
Splicing: Key Regulatory Switching in the
Pathological Process // Avicenna J. Med.
Biotechnol. – 2014. – Vol. 6, №4. – P. 192-
199.
4. Itinteang T., Withers A.H., Davis
P.F., Tan S.T. Biology of infantile
hemangioma // Front. Surg. – 2014. – Vol.
25, №1. – P. 3811-3856.
5. Ngan B.Y., Forte V., Campisi P.
Molecular
angiogenic
signaling
in
angiofibromas
after
embolization:
implications
for
therapy
//
Arch.
Otolaryngol. Head Neck Surg. – 2008. –
Vol. 134, №11. – P. 1170-1176.
6. Xu S., Wu W., Sun H. Association
of the vascular endothelial growth factor
gene polymorphisms (-460C/T, +405G/C
and +936T/C) with endometriosis: a meta-
analysis // Ann. Hum. Genet. – 2012. –
Vol. 76, №6. – P. 464-471.
Изучена частота встречаемости у
пациентов с ангиофибромой носоглотки
наиболее характерных полиморфных
142
маркеров фактора роста эндотелия
сосудов VEGF-A: C963T, G405C, -
1154A. Выявленный полиморфизм гена
VEGF-A позволяет предположить, что
однонуклеотидные
замены
в
промоторном
регионе
генов
индивидуальны
и
оказывают
определенное влияние на особенности
функционирования белков и экспрессию
гена.
Summary:
The
study
of
frequency
of
occurrence
most
characteristic polymorphic markers of
vascular
endothelial
growth
factor
VEGF-Ain patients with nasopharyngeal
angiofibromas: C963T, G405C, -1154A.
Identified
gene
polymorphism
VEGF-A suggests that single nucleotide
substitutions in the promoter region of
genes are unique and have a definite
impact on features of functioning
proteins and gene expression.
УДК: 616.332:615. 837
БЛИЖАЙШИЕ И ОТДАЛЕННЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ ТОНЗИЛЛЭКТОМИИ У
БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ТОНЗИЛЛИТОМ
А.И. Алимов, О.Р. Хайитов, Э.И. Алимов
Андижанский государственный медицинский институт
Профилактика и лечение ангин и
хронического тонзиллита относятся к
одной из самых актуальных проблем
оториноларингологии,
однако
отдельные вопросы выходят далеко за
пределы этой дисциплины [2,4-6].
Хронический тонзиллит – форма
патологии, которая влечет за собой не
только временную нетрудоспособность.
Так
называемые
тонзиллогенные
заболевания
(ревматизм,
затяжной
септический эндокардит, инфекционный
полиартрит, острый и хронический
нефрит и др.) могут привести к
длительной нетрудоспособности и даже
инвалидности [1,3,7].
Цель исследования
Оценка отдаленных результатов
тонзиллэктомии у больных хроническим
тонзиллитом.
Материал и методы
Проанализировано 136 историй
болезни подвергшихся тонзиллэктомии
пациентов, из них 54 мужчины, 66
женщин и 16 детей в возрасте от 7 до 14
лет. Большинство больных страдали
хроническим тонзиллитом в течение от
3-х
до
7
лет.
Большинство
оперированных были лица молодого
возраста. В анамнезе почти у всех
пациентов
отмечались
частые
катаральные,
фолликулярные,
лакунарные или флегмонозные ангины
(перитонзиллиты) с перитонзиллярными
абсцессами, лишь у некоторых больных
были
слабо
выраженные
неясные
ангины.
В зависимости от тяжести течения
заболевания
все
пациенты
были
разделены на две группы. 1-ю группу
составили 76 больных, страдающих
компенсированной
формой
хронического
тонзиллита.
У
них
наблюдались
частые
ангины
без
метатонзиллярных осложнений, то есть
без
тонзиллогенного
поражения
внутренних
органов.
2-ю
группу
составили
60
больных
с
субкомпенсированной
и
декомпенсированной
формами
хронического тонзиллита. У всех у них
имели место различные заболевания
внутренних органов, возникшие в
результате
токсико-инфекционного
