105
УДК:616.211-008.8-006.5
ИЗМЕНЕНИЯ ЭНДОТЕЛИАЛЬНОГО ФАКТОРА РОСТА СОСУДОВ (VEGF) ПРИ
ПОЛИПОЗНОМ РИНОСИНУСИТЕ.
Авезов М.И., Джаббаров К.Д.
Ташкентский институт усовершенствования врачей
Хотя о существовании полипов носа
известно более 5000 лет и проявления
полипов носа обнаруживают в настоящее
время у 1-5% взрослого населения,
основные
аспекты
этой
патологии
(патофизиологические,
клинические,
диагностические,
лечебные,
хирургические) остаются нерешенными
[
3
].
В соответствии с нормативным
документом EP
3
OS, принятом в 2012 г.,
полипозный
риносинусит
(ПРС)
–
хроническое заболевание полости носа и
околоносовых пазух, характеризующееся
двумя
или
более
обязательно
присутствующими симптомами: блокада
(обструкция) носового дыхания и насморк
(ринорея), и сопутствующими симптомами
(боль или ощущение напряжения в области
лба и носа, потеря и снижение обоняния),
продолжающимися более 12 недель [6].
Согласно патогенетической теории
развития полипоза носа и околоносовых
пазух, предложенной С.В. Рязанцевым,
условиями для образования полипов
являются
нарушения
различных
биологических процессов приобретенного
или врожденного характера в организме на
клеточном или субклеточном уровнях и
значение факторов внешней среды [2].
Одним из маркеров нарушения
биологических процессов на клеточном
уровне является
VEGF.
VEGF (Vascular Endothelial Growth
Factor, эндотелиальный фактор роста
сосудов) - один из членов семейства
структурно близких между собой белков,
которые
являются
лигандами
для
семейства рецепторов VEGF. VEGF влияет
на развитие новых кровеносных сосудов
(ангиогенез) и выживание незрелых
кровеносных
сосудов
(сосудистая
поддержка), связываясь с двумя близкими
по
строению
мембранными
тирозинкиназными
рецепторами
(рецептором-1 VEGF и рецептором-2
VEGF) и активируя их. Эти рецепторы
экспрессируются
клетками
эндотелия
стенки
кровеносных
сосудов
[7].
Связывание VEGF с этими рецепторами
запускает сигнальный каскад, который в
конечном
итоге
стимулирует
рост
эндотелиальных
клеток
сосуда,
их
выживание и пролиферацию.
Эндотелиальные клетки участвуют
в таких разнообразных процессах, как
вазоконстрикция
и
вазодилатация,
презентация антигенов, а также служат
очень
важными
элементами
всех
кровеносных сосудов - как капилляров, так
и вен или артерий. Таким образом,
стимулируя эндотелиальные клетки, VEGF
играет центральную роль в процессе
ангиогенеза.
VEGF
стимулирует
проницаемость
мелких
кровеносных
сосудов.
Повышенная
проницаемость
ведет к “подтеканию” белков плазмы через
стенку
сосуда
и
формированию
экстравазального фибринового геля. Этот
гель представляет собой подходящую
среду для роста клеток эндотелия [5].
Экспрессия VEGF стимулируется
множеством проангиогенных факторов,
включая эпидермальный ростовой фактор,
основной
фибробластный
ростовой
фактор, тромбоцитарный ростовой фактор
и интерлейкин-1. Кроме того, уровень
VEGF
непосредственно
регулируется
такими факторами окружающей среды, как
рН, давление и концентрация кислорода.
Общее влияние этих различных факторов
заключается в опосредованной через
VEGF стимуляции важных для ангиогенеза
факторов, включая антиапоптотические
белки, молекулы клеточной адгезии и
металлопротеиназы.
Уровень
экспрессии
VEGF
прогрессивно
уменьшается
после
106
рождения и минимален в большинстве
тканей взрослых, за исключением мест
активного ангиогенеза, таких как яичники,
матка и кожа (рост волос) [7].
VEGF-А является частью системы,
которая восстанавливает подачу кислорода
к тканям, когда циркуляция крови
недостаточна.
Сывороточная
концентрация VEGF-А повышена при
бронхиальной астме и понижена при
сахарном диабете. Нормальные функции
VEGF-А
-
это
создание
новых
кровеносных сосудов в эмбриональном
развитии или после травмы, усиление
роста
мышц
после
физических
упражнений,
новых
сосудов
(коллатерального кровообращения) [7].
Учеными было доказано, что
крупные опухоли не могут вырасти
крупнее
некоторого
ограниченного
размера без адекватного кровоснабжения,
а опухоли, способные экспрессировать
VEGF, могут быстро расти [8].
За последние 15 лет стало известно,
что ключевым регулятором неоангиогенеза
является фактор роста эндотелия сосудов
(VEGF/VEGF-А/VPF)
[
1,
8],
белок,
индуцирующий активный рост клеток
эндотелия и формирование новых ка-
пилляров. Ряд фактов указывает на то, что
VEGF не только обладает проангиогенной
активностью, но и может непосредственно
участвовать в регуляции пролиферации
клеток опухоли. Об этом свидетельствуют,
в
частности,
результаты
работ,
продемонстрировавших участие VEGF в
регуляции выживаемости и пролиферации
некоторых
культивируемых
in
vitro
опухолевых
клеток
[
4,
9,
10].
Биологический
эффект
VEGF
опосредуется его рецепторами VEGFR-
1/Flt-1 и VEGFR-2/Flk-1/KDR, типичными
рецепторными
тирозинкиназами
(трансмембранные
гликопротеиды
с
молекулярной массой 170—235 кДa) [8].
Проанализировав вышеизложенное,
нами была поставлена
цель исследования
– оценить наличие или отсутствие
динамики
показателей
концентрации
VEGF-А и VEGFR-2 в полипозной ткани и
плазме крови до и после хирургического
удаления полипозной ткани при ПРС.
Материал и методы
В
ЛОР–клинике
Ташкентского
института усовершенствования врачей за
период 2010–2013гг. обследовано 122
больных ПРС в возрасте 27 – 34 лет,
средний возраст 29,1±0,7. Среди пациентов
женщин было 47 (39,5%), мужчин – 75
(61,5%).
Для
обследования
больных
использовался традиционный комплекс
оториноларингологического исследования,
начиная с изучения анамнеза и осмотра
полости носа. Проводились анализы крови,
мочи и общее обследование в соответствии
с требованиями к предоперационной
подготовке
в
клинике,
проводили
рентгенографию
и
компьютерную
томографию носа и ОНП.
Все больные были разделены на 4
группы в зависимости от длительности
течения ПРС:
I группа – 30 больных с
длительностью ПРС до 3 лет;
II группа – 31 больной с
длительностью ПРС 3-6 лет;
III
группа – 29 больных с
длительностью ПРС 6-10 лет;
IV
группа – 32 больных с
длительностью ПРС 10-15 лет.
Контрольную
группу
составили
26
практически
здоровых
людей
сопоставимой возрастной категории, не
имеющих
вредных
привычек
и
полипозных заболеваний в анамнезе.
Также больные были разделены на
3 группы по степени обтурации полости
носа полипозной тканью:
А группа – 1/3 просвета полости
носа;
Б группа – 2/3 просвета полости
носа;
В группа – полная обтурация
просвета полости носа.
В этих группах в сопоставимых
долях были представлены больные с
различной длительностью ПРС.
Образцы полипозной ткани были
взяты во время операции и немедленно
отправлены на иммуноферментный анализ.
107
Для
проведения
иммуноферментного
анализа образцы тканей лизировали в
соотношении 1:3 в буфере следующего
состава: 20 мМ трис-НСl (рН 7,5), 150 мМ
NaCl, 1 мМ ЭДТА, 1 мМ ЭГТА, 1% Тритон
X-100, 2,5 мМ пирофосфат натрия, 1 мМ р-
глицерофосфат, 1 мМ ортованадат натрия,
1 мкг/мл леупептина. Полученные лизаты
центрифугировали в течение 30 мин при
22 000 об/мин, 4°С (центрифуга OptimaTM
TLX, Beckman, США). Концентрацию
показателей выражали в расчете на 1 мг
общего белка, определенного по методу
Лоури.
Исследуемые показатели в лизатах
оценивали
с помощью
стандартных
наборов для прямого иммуноферментного
анализа в соответствии с инструкциями
производителей. Показатели измеряли на
автоматическом универсальном ридере для
микропланшет ELX800.
При
сравнении
показателей
использовали
t-критерий
Стьюдента,
критерий Манна-Уитни, медианный тест,
корреляционный тест Пирсона (r) и тест
корреляции
рангов
Спирмена
(R).
Статистическую
обработку
данных
осуществляли с помощью программных
пакетов «Statistica 6.0» (StatSoft Inc.) и «R-
2.15.0 for Windows» (R-project).
Результаты исследования после
статистической обработки представлены в
таблице 1.
Таблица 1.
Концентрация VEGF и VEGFR-2 (пг/мл)
Группы
В крови
В полипозной ткани
VEGF
VEGFR-2
VEGF
VEGFR-2
Контрольная группа
(n=26)
133,5±0,949
8,17±0,036
I гр,
(n=30)
До лечения
169,5±1,84*
10,9±0,16*
45,54±0,9*
1339,7±28,67*
1 неделя
после
лечения
157,3±1,44*^ 10,2±0,1*^
4 недели
после
лечения
142,5±1,34*
8,7±0,1*
II гр,
(n=31)
До лечения
176,2±1,91*
11,4±0,2*
49,42±0,9*
1342,4±25,57*
1 неделя
после
лечения
188,0±1,5*^
9,7±0,1*^
4 недели
после
лечения
151,3±1,84*
8,9±0,1*
III гр,
(n=29)
До лечения
187,7±1,86*
11,8±0,2*
54,17±0,9*
1348,7±27,75*
1 неделя
после
лечения
171,3±1,47*^ 9,97±0,1*^
4 недели
после
лечения
164,2±1,47*
9,2±0,1^
IV гр,
(n=32)
До лечения
193,8±1,89*
11,8±0,16*
60,64±0,9*
1352,5±26,61*
1 неделя
после
лечения
185,7±1,33^
10,18±0,11^
4 недели
168,5±1,54*^ 9,3±0,1*
108
после
лечения
*-Р<0,05 к контролю; ^- Р<0,05 к данным до лечения;
Нами обнаружено, что содержание
VEGF в плазме крови выше показателей
контрольной группы у 104 (85%) из 122
обследованных больных, при этом среднее
значение и медиана этого показателя также
достоверно возрастали в полипозной ткани
(p<0,05). Выявлено также достоверное
увеличение уровня VEGFR-2 (p< 0,05) в
полипозной ткани. Сравнивая уровни
VEGFR-2 в плазме крови по сравнению с
контрольной группой, мы обнаружили
увеличение его содержания полипе на 3-
87% у 82% больных.
Отмечена слабая, но достоверная
прямая корреляция между уровнями
VEGFR-2 и VEGF в полипозной ткани
(r=0,35; p<0,05). Определение уровня
VEGF выявило достоверное отличие
медианных значений этого показателя в
плазме крови, при этом медиана уровня
VEGF была в 1,5 раза выше при ПРС по
сравнению с контрольной группой.
Результаты
исследования
параметров VEGF и VEGFR-2 в группах А,
Б, В представлены в таблице 2.
Таблица 2.
Концентрация VEGF и VEGFR-2 (пг/мл)
Группы
В крови
В полипозной ткани
VEGF
VEGFR-2
VEGF
VEGFR-2
Контрольная
группа (n=26)
133,5±0,949
8,17±0,036
А
группа ,
(n=21)
До
лечения
159,5±1,84*
11,7±0,2*
49,42±0,9* 1342,4±25,57*
1 неделя
после
лечения
147,3±1,44*^ 9,2±0,1*^
4 недели
после
лечения
135,2±1,34*
8,2±0,1*
Б
группа,
(n=44)
До
лечения
186,2±1,91*
11,8±0,2*
54,17±0,9* 1348,7±27,75*
1 неделя
после
лечения
178,0±1,5*^
9,07±0,1*^
4 недели
после
лечения
147,3±1,84*
8,4±0,1^
В
группа,
(n=57)
До
лечения
187,7±1,86*
11,8±0,16*
60,64±0,9* 1352,5±26,61*
1 неделя
после
лечения
174,3±1,47*^ 10,18±0,11^
4 недели
после
лечения
161,2±1,47*
9,3±0,1*
* - Р<0,05 к контролю; ^ - Р<0,05 к данным до лечения
109
После проведенного хирургического
лечения
носовое
дыхание
восстанавливалось
у
всех
больных,
уровень VEGF и VEGFR-2 в плазме крови
нормализовался через 1,1±0,14 месяца в
группе А, через 2,8±0,17 месяцев в группе
Б, в группе В уровень VEGF и VEGFR-2
достигал нормальных величин через
4,9±0,17 месяца.
Выводы:
1.
Исследование концентрации
VEGF и VEGFR-2 у больных ПРС имеет
значение в диагностике заболевания и
контроля рецидивирования процесса.
2.
После
хирургического
удаления
полипозных
образований
концентрация VEGF и VEGFR-2 в
сыворотке крови снижается обратно
пропорционально
сроку
заболевания,
нормализуясь за 5 месяцев.
3.
Уровень VEGF и VEGFR-2 в
крови
является
значимым
прогностическим маркером ПРС.
Список литературы
1.
Герштейн Е.С., Кушлинский
Н.Е. Биологические маркеры рака молоч-
ной железы: методологические аспекты и
клинические рекомендации. Маммология
2005;(1): 65-9.
2.
Рязанцев С.В.
Современные
представления об этиологии и патогенезе
полипозных
риносинуситов.
Сборник
трудов. Л, 2006, с 127-134.
3.
Трофименко С.Л. Патогенез
и клиника полипозного риносинусита //
Вестник оториноларингологии, 2010., №
4., с. 94-97.
4.
Bachelder R.E., Wendt M.A.,
Mercurio A.M. Vascular endothelial growth
factor promotes breast carcinoma invasion in
an autocrine manner by regulating the
chemokine receptor CXCR4. Cancer Res
2004; 62 (24): 27-33.
5.
Dvorak
HF.
Vascular
permeability
factor/vascular
endothelial
growth factor: a critical cytokine in tumour
angiogenesis and a potential target for
diagnosis and therapy. J Clin Oncol 2004;
20:4368-80.
6.
EP
3
OS Primary Care
Guidelines: European Position Paper on the
Primary Care Diagnosis and Management of
Rhinosinusitis and Nasal Polyps 2012
–
a
summary. Prim Care Respir J 2012; 35: 3:
64
–
69.
7.
Ferrara N. Timeline: VEGF
and the quest for tumour angiogenesis factors.
Nat Rev Cancer 2003; 2:795-803.
8.
Ferrara N. The role of VEGF in
the
regulation
of
physiological
and
pathological angiogenesis. EXS 2005; 2(94):
29-34.
9.
Kerbel R, Folkman J. Clinical
translation of angiogenesis inhibitors. Nat
Rev Cancer 2003; 2:727-739.
10.
Price D.J., Miralem T., Jiang
S. et al. Role of vascular endothelial growth
factor in the stimulation of cellular invasion
and signaling of breast cancer cells. Cell
Growth Differ 2011; 12 (3): 129-135.
АННОТАЦИЯ
Хотя о существовании полипов носа
известно более 5000 лет и проявления
полипов носа обнаруживают в настоящее
время у 1-5% взрослого населения,
основные
аспекты
этой
патологии
(патофизиологические, диагностические,
лечебные,
хирургические)
остаются
нерешенными.
Результат исследования показывает,
что наиболее оптимальной тактикой
диагностики
рецидивирующего
ПРС
является
контроль
изменений
эндотелиального фактора роста сосудов
(VEGF)
и
(VGEFR-2)
после
хирургического
удаления
полипозных
тканей в сыворотке крови.
ABSTRACT
Although the existence of nasal polyps
are more than 5000 years and manifestations
of nasal polyps detected at present in 1-5% of
the adult population, the main aspects of this
pathology (pathophysiologic, diagnostic,
therapeutic, surgical) remain unresolved.
The research result shows that the
optimal tactics diagnosis of recurrent PRS is
change control vascular endothelial growth
110
factor (VEGF) and (VGEFR-2) after surgical
removal of tissue polyposis in serum.
АННОТАЦИЯ
Бурун полипларнинг аникланганига
5000 йил булган булса хам бугунги кунда
ахолининг 1-5% да учраши, касалликнинг
асосий патологиялари (патофизиологик,
ташхислаш,
жаррохлик
даволаш)
муаммоларининг
ечими
етарли
эмаслигидан далолат беради.
Бизнинг текширишлар тахлили шуни
курсатадики кайталанувчи полипоз
риносинуситларни
ташхислашда
жаррохлик амалиётида олинган полип
тукимаси ва кон зардобида текширилган
кон томир эндотелиал усиш фактори
ахамияти катта экани аникланди.
Конференции и съезды
ИНФОРМАЦИЯ О XI КОНГРЕССЕ СТОМАТОЛОГОВ СНГ «ИННОВАЦИИ В
СТОМАТОЛОГИИ» и СОВЕЩАНИЕ РАБОЧЕЙ ГРУППЫ "ИНТЕГРАЦИЯ" ERO-
FDI В КАЗАХСТАНЕ
Проф. Нигматов Р.Н.
Председатель ассоциации стоматологов Узбекистана
XI Конгрессе стоматологов СНГ
«Инновации в стоматологии» состоялся 15
- 16 мая 2013 года в г.Алматы, Республика
Казахстан.
По официальному приглашению
Президента Ассоциации стоматологов
Казахстана, Ректора стоматологического
института профессора Есембаевой Сауле,
Узбекистан был представлен на Конгрессе
делегацией
в
следующем
составе:
Президент стоматологической ассоциации
Узбекистана
–
проф.
Р.Н.Нигматов,
главный
редактор
журнала
«Стоматология»,
профессор
кафедры
ортопедической
стоматологии
и
ортодонтии Ташкентской медицинской
академии проф. Х.И.Ирсалиев, Вице-
президент
ассоциации
стоматологов
Узбекистана
У.М.Набиев,
главный
стоматологов РУз. заведующий кафедрой
детской
стоматологии
Ташкентского
института усовершенствования врачей
проф. С.Н.Максудов и член Президиума
Ассоциации стоматологов Узбекистана
(АСУ),
заведующий
кафедрой
хирургической стоматологии ТашИУВ
проф. А.А.Абдукадыров.
Пленарное заседание Казахстанской
стоматологической ассоциации (КСА) и XI
Конгресс стоматологов СНГ «Инновации в
стоматологии» открылось 16 мая 2013 года
в
большом
конференциальном
зале
Казахстанского
Национального
медицинского
университета
им.
С.Д.Асфандиярова.
