<Вестниқврача, Самарканд
2013, № 3
-Doctor a%6orotnomasi, Samarqand
167
СОСТОЯНИЕ АКТИВНОСТИ ФЕРМЕНТОВ МИКРОСОМАЛЬНОГО
ОКИСЛЕНИЯ И НИТРООКСИДЕРГИЧЕСКОЙ СИСТЕМЫ В МИКРОСОМАХ
ГЕПАТОЦИТОВ ПРИ ДЕЙСТВИИ ИНДУКТОРОВ NO-СИСТЕМЫ У ЖИВОТНЫХ,
ПЕРЕНЕСШИХ ОСТРУЮ ГИПОКСИЮ ПЕЧЕНИ
Ташкентская Медицинская Академия, Самаркандский медицинский институт, Самаркандский
филиал РНЦЭМП
Резюме. В исследованиях на белых беспородных крысах-самцах массой тела 180-240г. установлено, что в группах после 1, 3 и 10
суток ишемии печени и ежедневного внутривенного введения эффективных доз индукторы нитрооксидазной системы (NOS):
нитропрусида натрия (0,03мг/кг), L-аргинина (50мг/кг), Гепа-Мерц (50мг/кг) и молсидомин (50мг/кг) оказывают неоднонаправленное
влияние выделенных из гепатоцитов в микросомах, на активность ферментов монооксигеназной системы (МОС); параметры
характеризующие уровень NO-системы - содержание оксида азота, активность эндотелиальной NOS, индуцибельной NOS и концентра-
цию пероксинитрита. Прямой индуктор NOS - нитропрусид натрия угнетает активность МОС, а непрямые L- аргинина, Гепа-Мерц и
молсидомин оказывают позитивный коррегируюший эффект, вплоть до восстановления отдельных параметров МОС и NOS до
контрольных значений.
Ключевые слова: ишемия печени, индукторы NO-системы, монооксигеназы, нитрооксигеназы.
Резюме. Тана вазни 180-240г. бўлган наслсиз эркак жинсига мансуб ок каламушларда ўтказилган тажриба- лар асосида
аниқландики, 1,3 ва 10 сутка жигар ишемиясидан сўнг, ҳамда хар кун и NOS индукторлари: натрия нитропрусид (0,03мг/кг), L-аргинин
(50мг/кг), Гепа-Мерц (50мг/кг) ва молсидомин (50мг/кг) самарали до- зада вена ичига юборилганда, гепатоцитлардан ажратиб олинган
микросомаларда монооксигеназ тизим фер- ментлари фаоллигига ва NO-тизим даражасини характерловчи параметрлар - азот оксид
микдори, эндотелиал NOS, индуцибел NOS фаоллиги ва пероксинитрит концентрациясига бир хил бўлмаган йўналишда таъсир
кўрсатади. NO- тизим билвосита индукторлари (Гепа-Мерц, L-аргинин, малсидомин) eNOS индукцияси, iNOS реакцияси тезлигини ва
ONO
2
’ концентрациясини пасайтириш оркали, NO миқдорини нормаллаштириб, монооксигеназ ферментлар фаоллигини оширади, NO
тизим бевосита индуктори (нитропрусид натрия) аксинча су- сайтиради.
Калит сузлар: жигар ишемияси, NO тизим индукторлари, монооксигеназалар, нитрооксигеназалар.
Resume. In researches on white not purebred rats males the mass of a div 180-240g. it is established that in groups after 1, 3 and 10 days
of ischemia of a liver and daily intravenous administration of effective doses inductors of nitrooksidazy system (NOS): nitroprusid Na (0,03mg/kg),
L-arginin (50mg/kg), Gepa-Mertz (50mg/kg) and molsido- min (50mg/kg) have not unidirectional impact allocated of gepatocite in microsomes,
on activity' of enzymes of monooxygenase system (MOS); parameters NO systems characterizing level - the content of oxide of nitrogen, activity
of endotelial NOS, indutsibel NOS and concentration ONOT. The direct inductor NOS - nitroprusid Na oppresses activity MOS, and indirect L-
arginin, Gepa-Mertz and molsidomin render positive corrective effect, up to restoration of separate parameters of MOS and NOS to control values.
Keywords: liver ischemia. NO system inductors, monooxygenase, nitrooxygenase.
Печень относиться к стресс-сенситивным органам,
способным к регенерации после повреждения, благодаря
клеточной кооперации, наличию молекулярных механизмов
реакции острой фазы и синтезу ряда молекул протекгивной
природы. Наиболее часто повреждение печени реализуется
через механизмы утраты способности монооксигеназных
ферментов гепатоцитов детоксициировать ксенобиотики.
Среди важных факторов ведущих к нарушению функций
монооксигеназных ферментов является гипо- ксия/ишемия.
Дисфункция эндотелия (ДЭ) является ключевым фактором
развития ишемических поражений печени при действии на неё
неблагоприятных факторов внешней и внутренней среды,
патологических состояниях организма [1]. Важной биологиче-
ской системой стоящей на пути дезинтеграционных процессов,
образования токсических продуктов обмена, поддержания
физико-химического гомеостаза в организме человека
являются
монооксигеназы,
главным
образом
сконцентрированные в микросомах различных органов, в
большинстве
случаев
до
90%
в
гепатоцитах
[2].
Гипоксия/ишемия
значительно
угнетают
активность
монооксигеназ печени [1,3]. В связи с этим для коррекции
ишемии реперфузии печени назначают гепатопротекторы,
антиоксиданты, антиги- поксанты [4,5]. В последние годы для
коррекции ДЭ при различной патологии органов и систем в
частности ишемии сердца, головного мозга широко приме-
няются специфические селективные и неселективные
индукторы NO-синтаз [6,7,14]. Вместе с тем в литературе
практически отсутствуют сведения о влиянии индукторов NO-
синтезирующего метаболизма на активность монооксигеназ
при ишемии/гипоксии печени.
Цель исследования
- изучить влияние индукторов NO-
синтезного метаболизма на активность монооксигеназной и
нитрооксигеназной систем в сравнительном аспекте в
микросомах печени в динамике после развития в ней острой
ишемии-реперфузии.
Материал и мет
оды. Исследования проведены на 96
крысах-самцах смешанной популяции массой 180- 220г.
Ишемию-реперфузию печени вызывали путем окклюзии в
ней в течение 180 мин сосудистой ножки левой боковой и
средней ее дали.
Исследуемые препараты вводили после восстановления
кровотока печени. Группами исследования были - животные
после 180 мин гипоксии -
реперфузии (1 гр.), животные,
которым после 180 мин гипоксии -реперфузии в течение
1, 3 и 10 сут внутривенно (хвостовую вену) в виде 1%
водных
растворов
вводили
эффективную
при
проведении монотерапии дозу: нитропрусида натрия
(НП) (0,03мг/кг) - 2гр, L- аргинина (L-АГ) (50мг/кг) - Згр,
Гепа-Мерц (Г-М) (50мг/кг) - 4гр, молсидомина (М)
(50мг/кг) - 5гр. Контролем для всех исследовательских
групп служили данные интактных животных. Каждая
группа состояла из 6-8 особей.
Печень перфузировали через нижнюю полую вену
охлажденным (0±4°С) 50 мМ Трис НС1 буфером, pH 7,4,
содержащим 0,05 М КС1 и 0,25 М сахарозы. После
отмывки печени от крови ее измельчали и гомогени-
зировали в таком же растворе (1:3). Из постмитохон-
дриальной фракции, которую получали путем цен-
трифугирования на VAC-602 (Германия) после 20 мин
откругки при 12 тыс. g, осаждали микросомы при 105
тыс. g в течение 60 мин. Все процедуры выполняли в
Сайфуллаева C.A.,
Ташкентбаев а Э.Н.,
Комарин A.C.
Фестниқ врача, Самарканд
<Dofaor аҳбогШпотая, Samarqancf
2013, № 3
168
холодильной камере КХС-12(Россия) при 0±4°С. В
микросомах, ресуспензированных в 100 мМ Трис - НО
буфера, pH 7,4, оценивали активность монооксигеназной
системы - по содержанию цитохромов Р-450, Р-420 и Ь5
классическим методом Т. Отита, R.Saio (1964),
активности НАДФН с-редуктазы (НАДФН- цит.с-ред.)
по
С.Н.Williams,
Н.
Karnin
(1961),
бенз(а)пиренгцдроксилазы (Б(а)ПГ) -по C.H.Yang,
L.
P.Kicha (1978), анилингидроксилазы (АГ) по
А.И.
Арчакову
и
соавт.(1975),
N-деметилазы
амидопирина (N-АП) по A. Bast, J. Nordhosck (1981),
глюкозо-6- фосфатазы (Г-6-Фазы) по N.S. Gnosh, N.C.
Кат (1983).
Нигрооксигеназную активность определяли по
содержанию стабильных метаболитов нитритов и
нитратов NO - NO
2
' и NO/ - по методу П.П. Голикова и
соавт.(2000), активное™ эндотелиальной NOS (eNOS)
по
В.В.
Сумбаевой,
И.М.
Ясинской
(2000),
индуцибельная NOS (iNOS) и концентрации перокси-
нитрита (ONO/) по М.Ю. Раваевой, Е.Н.Чуян (2011),
Содержание и активность монооксигеназной и окси-
доредуктаз нитрооксигеназной систем регистрировали
на компьютеризированном двухлучевом спектрофо-
тометре UV-2100 (Ltd, Китай). Содержание и активность
оксидоредуктаз рассчитывали в микросомах на
миллиграмм белка в 1 мл (мг/мл), который определяли
по методу О.Н. Lowry и соавт. (1951).
Полученные результаты были подвергнуты стати-
стической обработке с помощью пакета прикладных
программ Excel, Statistic for Windows V.6,0. Нормаль-
ность распределения количественных параметров
проверяли с помощью критериев Калмагорова -
Смирнова и Шапиро - Уилка. Вычисляли средне-
арифметическую (М), среднее квадратическое откло-
нение (о), ошибку средней арифметической (т), вы-
борочное стандартное отклонение (S). Распределение
выборок проводилось на основе критерия Стьюдента (t)
с вычислением вероятности ошибки (Р). Определение
зависимости между показателями осуществлялись с
помощью корреляционного анализа Пирсона (г). Данные
считались достоверными при р<0,05.
Результаты и обсуждение. Анализ полученных
данных показал, что в 1гр. после 1,3 и 10 сут. наблю-
дения в микросомах печени отмечается значительное
снижение по сравнению с контролем содержания ци-
тохромов Р-450 и bs, активности ферментов 1 и 11 типа
биотрансформации ксенобиотиков N-АП, Б(а)ПГ и АГ,
скорости реакций НАДФН-цит.с-ред. И Г-6-Фазы.
Содержание инактивированной конверсионной формы
цитохрома Р-450 - цитохрома Р-420, наоборот,
повышенно. С увеличением срока постишемии-
реперфузии печени отмечается определенная тенденция
к увеличению основных компонентов ферментов
микросомального окисления и снижения цитохрома Р-
420. Однако к 10 сут. опыта ферменты монооксиге-
назной системы еще существенно не достигали кон-
трольных значений, -в том числе содержания цитохрома
Р-450 и Ь
5
- на 53,6 и 60,3% (Р<0,001), активность
НАДФН-цит.с-ред, Б(а)ПГ, АГ, N-АП и Г-6- Фазы - на
80,3; 45,0; 53,4; 60,6 и 45,7% (Р<0,001) соответственно
(Табл.1).
При анализе показателей нитрооксигеназной си-
стемы у животных перенесших 180 мин гипоксию
печени в микросомах отмечается значительное угне-
тение активности eNOS, на фоне высокого уровня
концентрации NO, скорости реакции iNOS и содержания
ONO
2
'
ПО
сравнению с данными в контроле (Табл. 2). В
динамике срока постишемического периода в печени на
1, 3 и 10 сут. отмечается отчетливая тенденция динамики
возрастания активности eNOS, снижение экспрессии
NO, iNOS и ONO/. К 10 сут. их уровень по сравнению с
исходными данными (в 1 сут.) изменился - повысилась
активность eNOS - на 22,8% (Р<0,01), снизилась
содержание NO - на 11,6 % (Р>0,05), активность iNOS -
на 51,4% (Р<0,001), концентрация ONО/ - на 39,1 %
(Р<0,01).
Следовательно, угнетение основных ферментов
биотрансформации ксенобиотиков печени в поеггипо-
ксический период, ассоциируется дисбалансом в ак-
тивности компонентов составляющих нитрооксиге-
назную систему - угнетения eNOS и индукция NO,
активности iNOS и ONO
2
'.
L-аргинин является предшественником синтеза NO
с участием eNOS, активность которой в наших
исследованиях в микросомах печени значительно
снижена. Все это обосновывает необходимость вклю-
чения в схему коррекции нитрооксигеназной системы
индукторов NO. В наших исследованиях использованы
прямой индуктор NO - НП и непрямые L-аргинин, Г-М и
молсидомин [9]. НП при поступление в кровоток
распадается до NO (нигритов (NO2) и нитратов (N00, а
непрямые индукторы являются донаторами NO путем
повышения активности eNOS[8].
Результаты исследования показали, что НП суще-
ственно угнетает активность монооксигеназ в пости-
шемический период печени. К 10 сут. опыта наблюда-
ется максимальный уровень снижения цитохромов Р-
450 и bs, активности НАДФН-цит.с-ред, Б(а)ПГ, АГ, N-
АП и Г-6-Фазы. Одновременно установлено, что на этот
период в микросомах ишемизированной печени
наблюдается максимум угнетения активности eNOS и
гиперэкспрессии NO, iNOS и ONO
2
'. Вместе с тем, при
назначении
непрямых
индукторов
NO-сисгемы
установлено, что после 1, 3 и 10 сут. активность мо-
нооксигеназ по сравнению с данными у животных
аналогичных групп с ишемией-реперфузией печени,
которым препараты не вводили, повышается с увели-
чением срока постишемического периода в печени.
Максимальный эффект повышения монооксигеназ
выявлен на 10 сутки опыта у животных, которым вво-
дили Г-М. В этой группе на 10 сут. постишемического
периода в микросомах печени практически все (кроме Г-
6-Фазы)
изучаемые ферменты монооксигеназной
системы были в пределах контроля. Восстановления
<Вестни\врача, Самарканд
2013, № 3
<Dol(tor axborotnomasi, Samarqand
168
Т
абл
иц
а 1
Д
инам
ик
а у
ро
вня
ак
тив
но
ст
и м
оно
окс
иг
еназ
в м
икр
ос
ом
ах г
епа
то
цит
ов
р
аз
ли
ч
ны
х с
ро
ках
вв
ед
ен
ия
инд
укт
ор
ов
NO
-с
ис
те
м
ы
ж
ив
от
ны
м
по
сл
е 180
м
ин
гипо
кс
ии/
иш
ем
ии
пе
ч
ен
и, М
±ш
Г
ру
пп
а
Р-
450, н
м
/м
г
Р-
420, н
м
/м
г
bs
, н
м
/м
г
Н
АД
Ф
Н
-
ци
т.с
-
ре
д, н
м
/м
ин
/м
г
Б(
а)
Г
П
, н
м
/м
ин
/м
г
АГ, н
м
/м
ин
/м
г
N
-АП
, н
м
/м
ин
/м
г
Г
-6
-Ф
аз
а,
нм
/м
ин
/м
г
К
он
тро
ль
на
я
0,97±0
,031
0,036±0
,001
0,63±0,
026
106,9±3
,95
1,69±0,
078
0,88±0,
023
4,85±0,
151
79,8±3,
06
Г
ип
ок
си
я:
1 с
ут
О,ЗО
±О,О
18*
0,262±0
,009*
0,15±0,
006*
8,4±0,2
9*
0,65±0,
022*
0,30±0,
017*
1,57±0,
062*
24,7± 1,
03
3 с
ут
0,3
7±0,
015
*
0,1
91±0
,00
8*
0,2
0±0,
007
*
13,
7±0,
44*
0,8
9±0,
035*
0,3
7±0,
015
*
1,8
5±0,
061
*
39,5± 1,
65
10 с
ут
0,45±0,
018*
0,170±0
,006*
0,25±0,
008*
21,1 ±0,
87*
0,93±0,
042*
0,41 ±0,
018*
1,91±0,
067*
43,3± 1,
17
Г
ип
ок
си
я+
НП
:
1 с
ут
0,26±0,
021*
0,2
77
±0
,00
6*
д
0,15±0,
008*
7,2±0,4
5*
0,53±0,
039*
0,26±0,
016*
1,73±0,
062*
29,4± 1,
26
3 с
ут
0,30±0,
020*
0,2
70
±0
,00
7*
д
0,11±0,
006*
10,8±0,
53*
0,75±0,
042*
0,21±0,
020*
2,08±0,
083*
42,7± 1,
58
10
су
т
0,2
2±0,
023
*
д
0,28
1±
0,008
*
д
0,2
0±0,
009
*
л
15,
6±1,
57*
л
0,6
8±0,
059
*
д
0,3
5±0,
023
*
д
2,5
5±0,
122
*
л
50,2± 1,
62
I '
ип
ок
си
я+L
-A
T
:
1
су
т
0,46±0,
022*
д
0,1
61±0
,007*
л
0,22±0,
007*
л
13,3±0,
39*
д
0,92±0,
034*
л
0,45±0,
026*
2,14±0,
074*
д
36,8± 1,
37
3 с
ут
0,54±0,
024*
д
0,1
37
±0
,00
7*
д
0,30±0,
009*
л
39,7±1,
87*
л
1,30±0,
053*
л
0,58±0,
033*
л
3,20±0,
123*
д
40,9± 1,
25
10 с
ут
0,70±0,
028*
Л
0,1
04
±0
,00
5*
л
0,51 ±0,
011 *
д
64,8±2,
51*
л
1,52±0,
071*
д
0,79±0,
035*
д
4,28±0,
118*
д
61,9±2,
73
Г
ип
ок
си
я+
Г
-М:
1
С
УТ
0,49±0,
021 *
д
0,1
51
±0
,00
6*
д
0,25±0,
006*
д
14,3±0,
54*
д
0,95±0,
044*
д
0,49±0,
028*
д
2,29±0,
113*
д
37,5± 1,
30
3 с
ут
0,59±0,
022*
д
0.1
08
±0
,00
6*
д
0,39±0,
008*
л
43,7±2,
03*
д
1,42±0,
072*
д
0,61±0,
030*
д
3,59±0,
138*
д
52,1±1,
36
10 с
ут
0.81±0,
028
л
0,041 ±
0,005'
0.59±0,
013
л
97,5±3,
15
д
1,63±0,
063
л
0,83±0,
028
д
4,34±0,
126
д
68,5±2,
71
Г
ип
ок
си
я+
М
:
1 с
ут
0,40±0,
016*
0,1
72
±0
,00
7*
д
0,18±0,
007*
л
10,7±0,
59*
л
0,89±0,
039*
д
0,43±0,
019*
д
2,10±0,
081*
30,2±1,
12
3 с
ут
0,4
5±0,
019*
д
0,1
59
±0
,00
6*
д
0,26±0,
010*
л
31,3±1.
16*
л
1,20±0,
056*
д
0,51 ±0,
023 *
д
2,76±0,
096
41,7±1,
31
10 с
ут
0,59±0,
026*
л
0.1
13
±0
,006*
д
0,40±0,
013*
л
54,6±1,
82*
д
1,33±О
,О53*
д
0,63±0,
025*
д
3,32±0,
149
_52,5±2
,14
*
-
Р
<
0,
05
п
о
ср
ав
не
ни
ю
с
ко
н
тр
ол
ем
, А
-
Р
<
0,
05
н
о
ср
ав
не
ни
ю
с
г
и
по
кс
ие
й
со
от
ве
тс
тв
ую
щ
ег
о
ср
ок
у
на
бл
ю
де
ни
я
(Вестниқврача, Самарканд
2013,
%
Р
3
(Doctor axborotnomasi, Samarkand
.
Тблица 2
Динамика уровня активности NO-системы в микросомах гепатоцитов при различных сроках введения индукторов
eNOS животным после 180
мин гипоксии/ишемии печени, М±т
Группа
NO, мкМ/мг
eNOS, мкМ/мин/мг
iNOS, мкМ/мин/мг
ONO2-, мкМ/мг
Контрольная
5,5±0,16
17,4±0,62
0,10±0,002
0,08±0,002
Гипоксия: 1 сут
8,6±0,33*
7,9±0,29*
0,35±0,017*
0,23±0,010*
3 сут
8,1±0,27*
8,5±0,35*
0,23±0,009*
0,19±0,009*
10 сут
7,6±0,28*
9,7±0,42*
0,17±0,006*
0,14±0,007*
Г ипоксия+НП: 1 сут 9,7±0,25*
7,6±0,37*
0,39±0,010*
0,28±0,011*
3 сут
9,9±0,10*
д
6,7±0,44*
д
0,31±0,009*
А
0,25±0,007*
А—
10 сут
10,5±0,15*
А
7,2±0,56*
д
0,36±0,005*
д
0,42±0,00б*
д
Гипоксия^ L-АГ: 1
сут
6,6±0,16*
Л
10,1±0,47*
л
0,17±0,009*
д
0,15±0,007*
д
3 сут
6,1±0,15
л
12,5±0,60*^
0,14±0,006*
А
0,13±0,005*
А
10 сут
5,8±0,12
д
18,2±0,73
д
0,12±0,002*
л
0,09±0,003
д
Гипоксия+Г-М:
1 сут
6,5±0,17*
д
! 1,1 ±0,47 *
л
0,16±0,008*
л
0,16±0,008*
д
3 сут
5,9±0,14
л
13,8±0,62*
д
О,13±О,ОО5*
А
0,12±0,004*
д
10 сут
5,6±0,11
л
18,5±0,71
д
0,11±0,004
д
0,09±0,002
л
Гипоксия+М: 1 сут 7,3±0,33*
д
10,3±0,44*
л
0,19±0,009*
л
0,18±0,008*
л
3 сут
6,8±0,17*
д
11,6±0,41*
л
0,16±0,007*
л
0.14±0,006*
А
10 сут
6,1±0,14
д
16,8±0,68
д
0,13±0,004*
А
0,11 ±0,003 *
А
* - Р<0,05 по сравнению с контролем, Л- Р<0,05 но сравнению с гипоксией соответствующего сроку наблюдения
169
<Вестниқврача, Самарканд
2013, № 3
-Doctor a%6orotnomasi, Samarqand
170
активности монооксигеназ в микросомах печени в этой
группе животных, одновременно ассоциировалась,
нормализацией до контрольных величин показателей,
характеризующих
функциональное
состояние
нитрооксидазной системы. У животных в группах
которым вводили L-АГ и М, также адекватно повы-
шению активности монооксигеназ печени, улучшались
показатели нитрооксидазной системы. Однако эти
позитивные изменения были несколько ниже, чем у
животных в группе, которым вводили препарат Г-М.
Следует отметить, что все препараты непрямых ин-
дукторов NO-сисгемы оказывают высокий позитивный
эффект на активность монооксигеназ и нитрооксигеназ
микросом в печени уже после 1 сут. их введения и
динамично улучшаются после 3 и 10 сут. опыта.
Следовательно, полученные данные показывают, что
не все индукторы NO-синтазного метаболизма
оказывают позитивный эффект на активность моноок-
сигеназ печени у животных, перенесших острую гипо-
ксию - реперфузию в этом органе. Позитивный эффект
непрямых индукторов NO на активность монооксигеназ
в микросомах печени, по-видимому, связан с
увеличением пула L-аргинина, необходимого для
повышения синтеза и активности eNOS. В условиях
гипоксии уровень L-аргинина в печени существенно
снижается, что ведет к угнетению активности eNOS[10].
Это в свою очередь сопровождается повышением цикла
оксида азота, через механизм индукции индуцибелыюй
NOS (iNOS). При этом уровень NO может возрастать в
несколько
десятков
раз
больше,
чем
при
функционировании eNOS [11,12]. Компенсаторное
увеличение NO за пределы физиологической нормы
стимулирует вазоконстрикторные эффекгы и гипоксию,
с последующей инициацией свободнорадикальных
процекссов, образованием свободных радикалов, таких
как супероксидный анион кислорода (О
2
‘ ). На фоне
гипоксии и гиперэкспрессии NO и О
2
‘ в тканях
образуется пероксинитрит (ONO/), обладающий высокой
цитотоксичностью.
Большинство
исследователей
считают, что экспрессия ONO
;
‘ является основным
фактором развития дисметабслических изменений в
клетках запускающих апоптоз [13]. Возможно, что
введение животным, перенесших ост рую гипоксию
печени, препарата НП, наряду с тропным эффектом
повышающих
тонус
эндотелия,
увеличения
микроциркуляцию и проницаемость мембран сосудов,
еще в большей степени повышает уровень в циркули-
рующей синусоидальной крови печени NO, его до-
ступность к активным центрам цитохрома Р-450, что в
дальнейшем модулирует его активность. В связи с этим
можно полагать, что избыток NO и ONO
2
‘ являются
важным механизмом конверсии цитохрома Р-450 в
цитохром Р-420, угнетении активности микросомальных
ферментов - НАДФН-цит.с-ред, Б(а)ПГ, АГ, N-АП и Г-6-
Фазы как в постгипоксический период печени, так и на
этом фоне при введении НП. Важно подчеркнуть, что
негативный эффект гипоксии и при введении на этом
фоне НП, а также позитивное действия непрямых
индукторов NO обусловлен изменением уровня
цитохромов Р-450, Р420, Ь
5
, активности Б(а)ПГ, АГ, N-
АП через механизмы функциональной активности
НАДФН-цит.с-ред. - среднего звена НАДФН-цитохром
Р-450 редуктазы передачи электронов от субстрата
окисления до цитохрома Р- 450 и Г-6-Фаза - главного
компонента силовой энергетической системы микросом
участвующий в синтезе глюкозы, в ресингезе
аденозиндифосфата (АДФ) в аденозинтрифосфат.
Постгипоксический период и действие НП на этом фоне
снижают активность НАДФН-цит.с-редукгазы и Г-6-
Фазы, а непрямые индукторы NO повышают эти
ферменты в микросомах условиях постишемии-
реперфузии печени, тем самым создаются адекватные
этим
процессам
реакции
биотрансформации
ксенобиотиков с участием монооксигеназ печени.
Таким образом, установлено, что индукторы NO-
синтазного метаболизма оказывают неоднозначное
влияние на активность монооксигеназ в постишемиче-
ский период в печени - прямые индукторы угнетают, а
непрямые повышают активность основных микросо-
мальных ферментов. Различная степень изменения
активности мнооксигеназных ферментов при действии
индукторов NO-синтазного механизма, по-видимому
связано как с различной чувствительностью изоформ
цитохрома Р-450 к концентрации NO в гепатоцитах, так
и уровнем в них L-аргинина, а также активностью
ферментов, участвующих в синтезе NO - eNOS и iNOS,
концентрации NO и ONO/. Приведенные данные,
расширяют понимание важности использования ин-
дукторов NO - синтазного механизма как корректоров с
учетом их специфического действия на нарушенную
активность монооксигеназ после острых постишеми-
ческих-реперфузионных повреждений печени.
Литература
1.
Ляхович В.В., Вавилин В.А., Зенков И.К., Меньшикова Е.Б. Активированные кислородные метаболиты в монооксиге-
назных реакциях // Бюл. СО РАМН. - 2005. - №4. - С. 7-12.
2.
Арчаков А.И., Лисица А.В., Петушкова Н.А., Карузина И.И. Цитохромы Р-450, лекарственная болезнь и персонифици-
рованная медицина. Часть I// Клин.мед. -2008. -№ 2. -С. 4-8.
3.
Habib S., АН A. Biochemistry of Nitric Oxide//Ind. J. Clin. Biochcm. - 2011. - Vol. 26, №1. -P. 3-17.
4.
Моисеев C.B. Лекарственная гепатотоксичность// Клин, фармакол. и тер.-2005.-Том 14, №1.-С. 10-14.
5.
Villeneuve J. Pichette V. Cytochrome Р450 and liver diseases// Curr. Drug. Metab. -2004. - Vol.5(3). -P.273-282.
6.
Leiferd L., Fielenbach M., Dumolin F.L. et al. Inducible nitric oxide synthase (eNOS) expression in fulminant hepatic failure//
J.Hepatol. - 2002.-Vol.37.-P.613-619.
7.
Покровский M.B., Покровская Т.Г., Кочаров В.И., Артюшева Е.Б. Эндотелиопротективныс эффекты L-аргинина при
моделировании дефицита окиси азота// Эксп. и клин, фармакология. -2008. - Т.71,№2. - С.29-31.
8.
Mark G. Clemens. Nitric Oxide in Liver injury // Hepatology. - 2003. - Vol. 30. - P. 1-5.
9.
Hirst D.G., Robson T. Nitric oxide physiology and pathology// Methods. Mol. Biol. -2011. -Vol.704. -P. 1-13.
10.
Колосов Ю.А., Муляр А.Г., Гасанов M.T. и др. Экспериментальная оценка фармакологической активности новых доноров
оксида азота// Новгородский мед. жури. -2006. -№8. - С. 178-180.
11.
Покровский В.И., Виноградов Н.А. Оксид азота, его физиологические и патофизиологические свойства // Тер. арх. - 2005.-
№ 1.-С. 82-87.
12.
Сазонтова Г.1Архипенко Ю.В. Значение баланса прооксидантов антиоксидантов — равнозначных участников метабо-
лизма// Пат. физиол. и эксп. тер. - 2007. -№3. - С.2-18.
13.
Лукьянова Л.Д., Дудчснко А.М., Изыбина Т.А., Германова Э.Л. Регуляторная роль митохондриальной дисфункции при
гипоксии и ее взаимодействие с транскрипционной активностью// Вести. Рос.АМН. -2007. -№2. - С.3-15.
14.
B6ger R.H. The pharmacodynamics of L-arginine// J.Nutr. -2007. -Vol. 137. - P. 16505-16555.
