- 36 -
ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ РОТОВОЙ ЖИДКОСТИ У
ВИЧ-ИНФИЦИРОВАННЫХ ДЕТЕЙ ДО ПРОВЕДЕНИЯ
АНТИРЕТРОВИРУСНОЙ ТЕРАПИИ
А.С.Алимов, Н.В. Ким, У.А.Холматов, О. В. Ким
Ташкентский институт усовершенствования врачей
ВИЧ-инфекция является длительно
текущей
неизлечимой
инфекционной
болезнью, характеризующейся поражением
иммунной
системы
и
развитием
оппортунистических
заболеваний,
приводящих к гибели больного [11] . В связи
со значительным увеличение случаев ВИЧ-
инфекции вероятность контакта врача-
стоматолога с ВИЧ- инфицированными
пациентами
увеличивается.
Знание
стоматологических
симптомов
ВИЧ-
инфекции,
нередко
ранних,
способно
обеспечить
своевременную
диагностику
заболевания прежде всего врачами –
стоматологами [1,3,4,7,8].
ВИЧ-инфекция у детей приобретает
актуальность во многих странах мира в связи
с увеличением числа ВИЧ-инфицированных
женщин.
В
развивающихся
странах
перинатальное
инфицирование
является
ведущим [5].
Основными
проявлениями
ВИЧ-
инфекции у детей являются оральный
кандидоз,
герпетические
поражения,
линейная
эритема
десен,
увеличение
околоушных
слюнных
желез
и
рецидивирующие
язвенные
поражения.
Поражения полости рта, ассоциированные с
ВИЧ-инфекцией у взрослых, и значительно
реже регистрируемые у детей, включают
саркому Капоши, лимфому неХоджкина и
«волосистую» лейкоплакию [9,12].
В зарубежной литературе имеются
многочисленные публикации, отражающие
специфику стоматологических проявлений и
лечения ВИЧ- ассоциированных поражений
полости рта. Однако эта информация не
может
использоваться
отечественными
стоматологами, так как в ней не учтены
особенности эпидемического процесса в
Узбекистане. Кроме того, в литературных
источниках нами не найдено развернутой
картины иммунологических исследований
ротовой жидкости у детей, что очень важно,
так как на фоне иммунодефицита резко
снижается активность системы местного
иммунитета полости рта.
Цель
исследования
-
оценка
иммунологических
показателей
ротовой
жидкости у ВИЧ-инфицированных детей до
проведения антиретровирусной терапии.
Материал и методы
Под нашим наблюдением находились
20 ВИЧ- инфицированных детей, не
получающих антиретровирусную терапию
(основная
группа),
находящихся
на
стационарном лечении в отделении детей с
иммунодефицитными состояниями РСНПЦ
педиатрии. Среди пациентов было 7 девочек
и 13 мальчиков в возрасте от 1 до 6,5 лет.
Контрольную
группу
составили
20
неинфицированных детей без соматической
патологии.
У всех обследованных детей собирали
ротовую жидкость в стерильные пробирки
утром (в 9-10 часов), как правило, через 2
часа после приема пищи. Полученный
материал в течение 2-х часов доставляли в
лабораторию. В лаборатории определяли
концентрацию
секреторного
иммуноглобулина А (sIgA), концентрацию
лизоцима,
уровень
циркулирующих
иммунных
комплексов
(ЦИК),
среднемолекулярных пептидов (СМП)
ЦИК - показатель развития различных
воспалительных процессов в организме. Они
представляют собой комплексы, состоящие
из антител, антигена и компонентов
комплемента.
Образование
иммунных
комплексов – один из первичных актов
иммунной реакции организма, приводящий к
быстрому
удалению
эндогенных
и
экзогенных антигенов (вирусы, паразиты,
бактерии
и
др.)
через
ретикуло-
эндотелиальную систему. В норме иммунные
комплексы
подвергаются
фагоцитозу,
который усиливается в присутствии системы
- 37 -
комплемента. Иммунные комплексы влияют
на функцию лимфоцитов, макрофагов и,
таким образом, участвуют в регуляции
иммунного ответа. При инфицировании,
аллергии
происходит
повышенное
образование ЦИК и в ряде случаев
откладывание этих комплексов в корковом
слое почек с развитием воспаления.
Вследствие избыточного накопления ЦИК,
последующей активации комплемента и
лизосомальных ферментов в различных
тканях
происходят
воспалительные
процессы, сопровождающиеся поражением
органов [10].
СМП - универсальный биохимический
маркер,
отражающий
уровень
патологического белкового метаболизма.
Дисбаланс между активностью протеазной и
антипротеазной систем характерен для
многих видов патологии. В результате
активации
протеолиза
происходит
образование большого количества продуктов
деградации белков - среднемолекулярных
пептидов с мол. массой 300-5000 Д. Они
оказывают влияние на жизнедеятельность
всех систем и органов, так как по своему
строению близки к регуляторным пептидам.
СМП способны соединяться и блокировать
рецепторы любой клетки, неадекватно влияя
на ее метаболизм и функции [2].
Определение концентрации sIgA
проводили методом иммунотурбидиметрии
(Boehringer Mannheimm) с помощью набора
реагентов
этой
же
фирмы
-
моноспецифических
сывороток
к
секреторному компоненту и к тяжелым
цепям молекулы IgA, на приборе
иммуноферментного
анализатора
типа
Human (Австрия). В основе определения sIgA
лежит метод J. Mancini (1965).
К
онцентрацию лизоцима
определяли
спектрофотометрическим
методом
на
спектрофотометре
СФ-46
(Россия).
Использовали
стандартную
живую
суспензию M. Lygodeikticus (штамм 2665). К
0,4 мл фосфатного буфера (pH 6,2)
прибавляли
0,1
мл
слюны
больного
(предварительно очищенную от взвеси путем
центрифугирования при 3000 об/мин в
течение 10 мин) и 2 мл стандартизированной
взвеси микрококка. Смесь инкубировали 30
мин при 37°С, после чего измеряли
оптическую плотность на аппарате СФ-46
при длине волны 630 нм. Расчет проводили
по формуле:
А=E/V•K и выражали в мкг/мл, где: К
- калибровочный коэффициент лизоцима,
равный
5,46
3
.М
-1
.см
-1
.;
Е-
показатель
спектрофотометра; V- объем слюны.
У
ровень ЦИК
в слюне определяли по
методу Г.С. Камышникова, (2002) с
использованием тест-набора Ташкентского
малого предприятия Нихол. Метод основан
на нефелометрии различной растворимости
мономеров иммуноглобулинов в составе
иммунных комплексов при наличии в среде
полиэтиленгликоля (ПЭГ-6000). 0,1 мл
слюны инкубировали в термостате при 37°С
в течение 2 часов. После этого слюну
разводили в 3 раза буферным раствором (0,1
мл слюны + 0,4 мл боратного буфера с рН
7,4). В контрольную пробирку вносили 0,2 мл
разведенной слюны и 1,8 мл боратного
буфера, в опытную пробирку - 0,2 мл
разведенной слюны и 1,8 мл ПЭГ. Обе
пробирки выдерживали при комнатной
температуре 2 часа. Фотометрическим
методом на аппарате СФ-46 при длине волны
440 нм определяли процент пропускания,
используя кюветы объемом 3,0 мл. Расчет
вели, взяв пропускание контрольной пробы
за 100%.
Определение
молекул
средней
массы (МСМ
256
, МСМ
280
)
проводили по
методу Г.С. Камышникова (2002). Ход
опыта: к 0,1 мл слюны добавляли 0,25 мл
20% раствора трихлоруксусной кислоты.
После предварительного перемешивания
центрифугировали при 3000 об/мин в течение
30 мин. К полученному надосадку в
количестве 0,1 мл добавляли 10,0 мл
дистиллированной
воды,
перемешивали.
Спектрофотометрию растворов проводили
при длине волны 256 и 280 нм на
спектрофотометре СФ-46 (Россия) против
дистиллированной
воды.
Концентрации
МСМ выражали в условных единицах:
А= Δ(Еλисслед- ЕλН
2
О) и выражали в
Е
оп
.
Результаты и обсуждение
Местный иммунитет является первым
иммунологическим
барьером,
обеспечивающим защиту организма от
различных
антигенных
воздействий.
Заболевания слизистой оболочки полости рта
- 38 -
у ВИЧ-инфицированных развиваются на
фоне нарушения секреторного гомеостаза в
полости рта [8].
Иммунологические
исследования
показали
(табл1),
что
у
ВИЧ-
инфицированных детей, в отличие от
пациентов контрольной группы, имеет место
картина иммунодефицита. Так, концентрация
sIgA
у ВИЧ- инфицированных детей
составила 0,23±0,013 г/л (в контроле
0,345±0,014 г/л). Концентрация лизоцима
составила
1,84±0,10
мкг/мл
против
3,51±0,095 мкг/мл в контрольной группе.
Уровень СМП в основной группе резко
повышен до 0,378±0,016 ОП/мл (в контроле
0,174±0,002 ОП/мл). Наблюдается также
повышение
уровня
ЦИК
у
ВИЧ-
инфицированных детей до 158,99±4,09 Ед/мл
(в контроле 62,71±1,345 Ед/мл).
Снижение концентрации sIgA и
лизоцима у ВИЧ-инфицированных детей
говорит
о
достоверно
выраженном
иммунодефиците.
В
свою
очередь,
повышение
уровней
ЦИК
и
СМП
свидетельствует о наличии воспалительных
процессов в полости рта.
Таким образом, на основании результатов
иммунологических исследований, мы можем
с
высокой
степенью
достоверности
констатировать тот факт, что активность
системы местного иммунитета полости рта у
ВИЧ-инфицированных детей резко угнетена.
Кроме того, избыточное накопление СМП и
ЦИК оказывает токсическое действие на
организм в целом, и на слизистую оболочку
полости рта в частности.
Таблица
Иммунологические показатели ротовой
жидкости у обследованных детей
Показатель
Контрольная
группа
Основная
группа
Концентрация
sIgA, г/л
0,345±0,014
0,23±0,013
Концентрация
лизоцима,
мкг/мл
3,51±0,095
1,84±0,10
Уровень СМП,
ОП/мл
0,174±0,002
0,378±0,016
Уровень ЦИК,
Ед/мл
62,71±1,345
158,99±4,09
Примечание. Р<0,001 по сравнению с
контролем.
Выводы
Изучение
иммунологических
показателей ротовой жидкости таких как:
(концентрация sIgA, лизоцима, уровень СМП
и ЦИК) позволило нам установить, что у
ВИЧ-инфицированных детей имеет место
выраженный
иммунодефицит,
также
воспалительные процессы в полости рта.
Наши исследования должны учитываться при
оказании
этим
детям
лечебно-
профилактической
стоматологической
помощи.
Литература
1.Виноградова
А.Н.
Особенности
заболеваний слизистой оболочки рта у
больных
ВИЧ-инфекцией
на
фоне
антиретровирусной терапии: Автореф. дис.
… канд. мед.наук.-СПб, 2008.-С.3.
2.Карякина
Е.В.,
Белова
С.В.
Молекулы средней массы как интегральный
показатель
метаболических
нарушений
(обзор литературы) //Клин. лаб. диагностика.-
2004.-№3.-С.3-7.
3.Ким Н.В. Кандидоз полости рта у
детей с ВИЧ/СПИДом // Stomatologiya.-2009.-
№ 1-2 (39-40). - С.75-79.
4.Максимовская Л.Н., Шатохин А.И.,
Ермак
Т.Н.
Распространенность
и
интенсивность воспалительных заболеваний
пародонта у лиц с ВИЧ-инфекцией // Рос.
стоматол. журн. - 2005. - №2. - С.24-27.
5.Рахманова А.Г., Воронин Е.Е.,
Фомин Ю.А. ВИЧ-инфекция у детей.- СПб:
Питер, 2003.-С.19-27.
6.Сажина М. В. Организационно-
методические
основы
оказания
стоматологической
помощи
ВИЧ-
инфицированным
Пермского
региона:
Автореф. дис. … канд. мед. наук. - Пермь,
2003.-С. 3.
7.Шатохин
А.И.
Особенности
организации
амбулаторной
стоматологической помощи больным ВИЧ-
инфекцией: Автореф. дис. … канд. мед. наук.
– М, 2006. – 21 с.
8.Шатохин
А.
И.
Вопросы
последипломного образования врачей –
стоматологов по ВИЧ-инфекции // Рос. мед.
форум.-2007.-№ 2.-С.20-24.
- 39 -
9.Шатохин А.И. Стоматологическая
профилактика у ВИЧ- инфицированных
пациентов // Рос. стоматол. журн.-2008.-№4.-
С.37-39.
10. Шойбонов Б.Б., Буянова С.Н.,
Петрова В.Д. и др. Модифицированный
метод
определения
циркулирующих
иммунных комплексов в тесте связывания
комплемента ПЭГ-преципитатом// Клин. лаб.
диагностика.-2007.-№5.-С.29-35.
11. Ющук Н.Д., Венгеров Ю.А.,
Шахгильдян И.В. и др. Интенсивная и
паллиативная
терапия
больных
ВИЧ-
инфекцией// Лечащий врач.-2008.-№ 9.-С. 49-
53.
12.Coogan
M.,
Greenspan
J.,
Challacombe S. Oral lesions in infection with
human immunodeficiency virus // Bul. W.
Health Organ. – 2005. – Vol. 83, № 9. - Р.700-
706.
Резюме
Результаты
проведенных
исследований показали резкое угнетение
активности системы местного иммунитета
полости рта у ВИЧ- инфицированных детей
по сравнению со здоровыми детьми.
Summary
The results of investigations showed
abrupt oppression of activity of local immune
system of oral cavity in HIV-infected children as
compared
with
healthy
children.
РОЛЬ АНТИРЕТРОВИРУСНОЙ ТЕРАПИИ В ДИНАМИКЕ ЗАБОЛЕВАНИЙ
ПОЛОСТИ РТА У ВИЧ-ИНФИЦИРОВАННЫХ ДЕТЕЙ
Н.В. Ким, А С Алимов, Г.И. Худайбердиев, О.В. Ким
Ташкентский институт усовершенствования врачей
РСНПМЦ педиатрии
В настоящее время ВИЧ-инфекция у
детей является одной из актуальнейших
проблем во всем мире. Более 90% детской
ВИЧ-инфекции
является
результатом
перинатальной трансмиссии вируса [4, 6].
Основным
компонентом
лечения
больных
с
ВИЧ-инфекцией
является
антиретровирусная
терапия
(АРВТ),
с
помощью
которой
можно
добиться
контролируемого течения заболевания, то
есть состояния, при котором удается
остановить прогрессирование болезни. АРВТ
должна
проводиться
пожизненно
непрерывно. В процессе лечения проводятся
обследования (измеряется величина вирусной
нагрузки, количество CD4
+
Т-лимфоцитов),
цель которых - контроль его эффективности
и безопасности этого лечения. В настоящее
время применяются следующие группы
антиретровирусных препаратов.
1.Препараты, блокирующие процесс
обратной транскрипции (синтез вирусной
ДНК на матрице вирусной РНК), -
ингибиторы обратной транскриптазы. Среди
них выделяют две группы:
нуклеозидные ингибиторы обратной
транскриптазы (НИОТ) (измененные
молекулы
нуклеозидов),
встраивающиеся
в
синтезируемую
цепочку ДНК и прекращающие ее
дальнейшую сборку;
ненуклеозидные ингибиторы обратной
транскриптазы (ННИОТ), блокирующие
необходимый
для
осуществления
обратной
транскрипции
вирусный
фермент - обратную транскриптазу.
2.Препараты, блокирующие процесс
формирования полноценных протеинов ВИЧ
и, в конечном итоге, сборку новых вирусов -
ингибиторы протеазы (ИП) ВИЧ.
3.Препараты,
воздействующие
на
рецепторы, используемые вирусом для
проникновения ВИЧ в клетку хозяина,-
ингибиторы слияния.
Терапевтический комплекс должен
включать
комбинацию
не
менее
3
