$}естни\врача, 2011, № 4, Самарканд
43
СВОБОДНОРАДИКАЛЬНОЕ ОКИСЛЕНИЕ ЛИПИДОВ И СИСТЕМА
АНТИОКСИДАНТНОЙ ЗАЩИТЫ ОРГАНИЗМА ПРИ ГЛОМЕРУЛОНЕФРИТЕ У
ДЕТЕЙ В УСЛОВИЯХ ЖАРКОГО КЛИМАТА УЗБЕКИСТАНА
СамГосМИ (ректор - проф.Ша.мсиев А.М.)
Актуальность.
Широкая распространенность
гломерулонефрита в детском возрасте, склонность к
хронизации, трудности диагностики настоятельно
требуют выяснения патогенетической сущности
отдельных проявлений, поиска эффективных методов
лечения [5;11;]. В последние годы наряду с иммуноло-
гическими генетическими факторами в свете новых
достижений клинической мембраноло- гии внимание
клиницистов привлекли клеточные молекулярные
основы возникновения и течения гломерулонефрита у
детей [1]. Согласно данным представлениям,
реализация как иммунных, так и неиммунных
нефропатий у детей связана с реакциями клеточных
мембран нефрона [11,12]. Среди многочисленных
факторов, приводящих к структурнофункциональной
дестабилизации клеточных мембран, наибольшее
значение имеет чрезмерная активация реакций
перекисного окисления липидов (ПОЛ) и эндогенных
фосфолипаз (ФЛаз) [1,10]. Большое значение в
регуляции приспособительных реакций к стресс фак-
торам придают состоянию системы ПОЛ-АОЗ
(антиокислительная защита) организма [7]. Изучение
состояния ПОЛ и системы ДОЗ при заболеваниях
почек, в первую очередь, на фоне ХГН,
представляется важным направлением в современной
клинической нефрологии [2;11;12;13;14]. В процессе
прогрессирования ХГН у детей также имеют место
срыв и несовершенство адаптационных механизмов
поддержания стационарного уровня содержания ФЛ в
мембранах
клубочков.
В
них
проявляется
уменьшение содержания суммарного уровня ФЛ, а
также отдельных классов ФЛ - фосфа- тидилсерина
(ФС),
фосфатидилэтаноламина
(ФЭА).
а
в
дальнейшем
-
фосфатидилхолина
(ФХ)
и
сфингомиелина [1;4;12]. Снижение ФЛ, в свою
очередь, связано с активацией эндогенных ФЛаз, что
проявляется выраженным накоплением лизо-форм
ФЛ [13;14]. Таким образом, при ХГН, который в
первую очередь является иммунной нефропатией,
мембранные образования клубочка подвергаются
повреждающему воздействию иммунных комплексов
и антител к базальной мембране при участии
активированной системы комплимента, макрофагов,
нейтрофилов и мезангиальных клеток. Клетки
начинают интенсивно вырабатывать свободные
радикалы кислорода, происходит стимуляция ПОЛ,
экзогенных
ФЛаз
и
протеаз.
Высокая
и
пролонгированная активность ФЛаз и ПОЛ,
модификация липидной фазы клеточной мембраны
нефрона на фоне несостоятельности ДОС может быть
существенным фактором, определяющим тяжесть и
исход заболевания почек. Показано, что при гло-
мерулонефрите эти процессы могут проявлять
высокую степень активности и кореллировать с
клиническими проявлениями заболевания [4]. В то же
время, известна высокая метеочувствительность
гломерулонефрита [6]. Новые патогенетические
механизмы развития нефропатий, установленные в
последние годы, нацеливают на перспективность
проведения
соответствующих
лечебных
и
профилактических
мероприятий
в
зонах
с
возможными
экстремальными
воздействиями
факторов внешней среды, особенно в отношении
улучшения механизмов мембранной адаптации, что
создает реальные предпосылки для разработки
дифференцированных методов коррекции патологи-
ческих нарушений и принципов профилактики
нефропатий у детей с учетом региональных
особенностей климатогеографических условий.
Целью работы
явилось исследование состояния
стабильности клеточных мембран и антиоксидантной
защиты
организма
у
детей
больных
гломерулонефритом в климатических условиях
Узбекистана
и
оценка
эффективности
мембраностабилизирующего препарата эссенциале в
комплексной
терапии
хронического
гломерулонефрита.
Объём и методы исследования.
Среди
госпитализированных
в
специализированный
нефрологический стационар, где проводилась наша
работа, больные с гломерулонефритом составили
26,4%. Анализ 564 историй болезней больных
гломерулонефритом показал, что наибольшее число
поступивших больных с острым гломерулонефритом
(ОГН) приходилось на месяцы, переходные от зимы к
весне (февраль-март) и от лета к осени (август-
сентябрь), а больные с обострением хронического
гломерулонефрита (ХГН) чаще поступали в период с
июля по октябрь месяцы. Следовательно, на
основании
вышеуказанных
данных
можно
предположить отягощающее влияние длительной
тепловой
нагрузки
на
течение
и
исход
гломерулонефрита. Нельзя исключить возможную
роль возникающей при этом гипоксии и гипоксемии,
вследствие тепловой нагрузки, а также нарушение
баланса перекисного окисления липидов (ПОЛ) -
антиоксидантной системы (ДОС). В различные
сезоны года обследованы 69 детей с ОГН и 59 с ХГН.
Кровь и мочу для анализов у больных брали в период
активности ОГН и обострения ХГН, в первые дни
поступления в стационар. Об интенсивности ПОЛ
судили по содержанию в мембранах эритроцитов и
моче диеновых коньюгат (ДК) ненасыщенных
жирных кислот по методу И.Д. Стальной (1979).
Ахматов А.,
Каримова Н.А.,
Аралов М.Д,
Эргашев А.Х.,
Рахмонов Ю.А.,
Вестниқ,срача, 2011.
4, Самарканд
44
активность эритроцитов определялась по методу
X. Брокерхоф и Р. Джексен (1978). Для
характеристики состояния активности ФЛаз почечной
ткани мы определяли активность в моче ФЛазы А
2
мочи по С.А. Тужилиной и
A.
И. Салуэнья (1975) в модификации Ю.Н.
Кожевникова (1981). О структурном состоянии
цитомембран судили по фосфолипидному спектру
мембран эритроцитов, которые определяли методом
ТСХ на силикагеле (В.И. Крылов и соавт.,1975).
Состояние
АОЗ
оценивали
по
активности
супероксиддисмутазы
(СОД)
в
мембранах
эритроцитов (по методу
B.
Н. Чумакова и Л.Ф. Осинской, 1977), каталазы (по
методу' А. Баха и Н. Зубковой (1969) и пероксидазы
(по методу Симакова в модификации Т. Попова с
соавт. (1971) крови и по содержанию а-токоферола в
плазме крови (определяли методом ТСХ на окиси
алюминия (В.И. Крылов, Л.Д. Кондакова, 1978).
Полученные данные обрабатывались методом
вариационной статистики с применением критерия
Стьюдента и считались достоверными при р <0,05.
Коэффициент корреляции (г) высчитывался по И.Г.
Лавровой (1984).
Результаты и их обсуждение.
Полученные нами
данные свидетельствуют о достоверном увеличении в
эритроцитах и моче диеновых конъюгат (ДК) как у
больных ОГН, так при обострении ХГН в сравнении с
показателями здоровых. Установлено, что имеются
отчетливые сезонные колебания интенсивности ПОЛ
у обследованных больных (ДК крови - 10,85±0.76
нмоль/ 10’
2
эр., при норме 5,72±0,59; ДК мочи - 12,42
± 1,12, при норме - 4,71 ±0,3 8 мкмоль/сутки).
Проведенные
исследования
активности
фосфолипаз у больных показали значительное
возрастание фосфолипазной активности мочи и крови
по сравнению с контрольными показателями
(р<0.001), и особенно в период длительной тепловой
нагрузки, что по-видимому, связано с более
выраженным мембранолизом в этот период, в
результате
чего
повышается
проницаемость
клеточных мембран для цитоплазматических и
лизосомальных ферментов. Подтверждением этого
является
обнаруженные
нами
изменения
в
структурнофункциональной
организации
эритроцитарных мембран у обследуемых больных.
Установлено, что у больных гломерулонефритом
в мембранах красных клеток крови значительно
повышены уровень цитотоксических фракций
липидов - лизофосфатидилхо- лина (ЛФХ). Более
высокие показатели у обследованных больных
установлены
в
летний
период
(р<0,001).
Одновременно
отмечалось
снижение
уровня
фосфатидилхолина (ФХ) - основного структурного
компонента цитомембран и источника ЛФХ
(р<0,001). Накопление лизоформ фосфолипидов
изменяя текучесть и проницаемость клеточных
мембран,
неизбежно
приводит
к
снижению
резистентности и нарушению нормальной функции
клеток. Подтверждением этого положения служит,
установленные у обследуемых больных, достоверно
низкие показатели механической стойкости (р<0,001)
и деформируемости эритроцитов (р<0,001).
Выше изложенные свидетельствуют о зна-
чительном накоплении ЛФХ на фоне снижения
легкоокисляющихся форм фосфолипидов ФХ в
мембранах эритроцитов, приводящие к снижению их
резистентности. Вместе с тем. указанные процессы
имеют выраженную сезонную вариабельность и
усугубляются в период длительной тепловой
нагрузки. Данные изменения соответствовали
тяжести и динамике патологического процесса у
обследуемых больных.
Известно, что между мембранодеструктивными
процессами и резервом антиоксидантов в организме
существует тесная функциональная взаимосвязь. Как
показывают
наши
данные,
у
больных
гломерулонефритом
уровень
а-токоферола
и
активность супероксиддисмутазы (СОД), каталазы и
пероксидазы в крови снижены и значительно
колебались в зависимости от сезона года. Активность
СОД мембран эритроцитов достоверно снижена у
больных обеих групп по сравнению с показателями
здоровых, но более значительно у больных
обследованных в период длительной тепловой
нагрузки (24,1 ±2,1% - летом и 33,4±1,8% гемолиза -
зимой). Активность каталазы крови у больных (летом
- 5,6±0,21 ммоль/мл/мин, зимой -6,9±0,19 (р<0,001), в
то время как каталазная активность мочи была
повышенной как у детей с ОГН (р<0,001), так и у
больных ХГН (р<0,001).
Следовательно, у больных ОГН и ХГН от-
мечается снижение уровня эндогенного анти-
оксиданта - а-токоферола в сыворотке крови и
активности антиоксидантных и антиперекис- ных
ферментов в крови, при одновременном повышении
активности последних в моче. Данные изменения
усугубляются в период длительной тепловой
нагрузки. Совокупность данных о состоянии
цитомембран и антиоксидантной системы отражают
тяжесть и динамику патологического процесса у
больных гломерулонефритом. Подтверждением этого
служит установленная взаимосвязь структурно-
функциональных изменений клеточных мембран и
механизмов их повреждения с клиническими
проявлениями заболевания. При этом установлено,
что выраженность отечного синдрома коррелирует с
уровнем ДК мочи, ЛФХ эритроцитов. активностью
фосфолипазы
мочи(г=+0,8743;+0,9120;+
0,9346;
р<0,05), а протеинурия коррелирует с активностью
каталазы и пероксидазы мочи (г =+0,9366; + 0,9085; р
< 0.05), показатели гематурии коррелируют с
активностью СОД эритроцитов (г = - 0,9229; р< 0,05),
с уровнем ЛФХ эритроцитов (г =+0,8364; р < 0,05) и
деформируемостью эритроцитов (г = - 0,7992; р<
0,05).
У больных хроническим гломерулонефритом
обострения чаще наблюдались весной и осенью и
сопровождались значительным истощением резерва
антиоксидантной
защиты
по
сравнению
с
показателями у больных острым гломерулонефритом.
Установлено,
что
выявленные
нарушения
соответствует тяжести и динамике заболевания и
усугублялись
в
период
тепловой
нагрузки.
Следовательно, длительная тепловая нагрузка
приводит к стимуляции ПОЛ и повышенному расходу
антиоксидантов с последующим истощением их ре-
зерва у больных гломерулонефритом, что может
служить предрасполагающим фактором рецидивов
заболевания.
■Вестниқврача, 2011, № 4, Самарканд
45
Это послужило основанием для включения
препарата эссенциале в комплекс терапии гло-
мерулонефрита у детей. Оптимальный состав, куда
входят диглицеридэфир холинфосфорной кислоты
природного происхождения в комбинации с
ненасыщенными жирными кислотами, а также
витамины группы В и токоферол ацетат, и
положительное влияние на липидный обмен
подтверждало правильность выбора его для
включения в комплекс патогенетической терапии
больных гломерулонефритом.
Для решения вопроса об эффективности
эссенциале в комплексном лечении гломеру-
лонефрита исследованы 2 группы больных в возрасте
от 3 до 15 лет. Первую группу составили 21 больной
гломерулонефритом (6 детей - ОГН с нефротическим
синдромом и 15 ХГН нефротической формой),
которые в комплексе патогенетической терапии
получали ГК (контрольная группа). Вторую группу
составили 21 больной гломерулонефритом (6 - ОГН с
нефротическим синдромом и 15 - ХГН нефротической
формой), которые одновременно с указанной
терапией получали эссенциале. Сравнительная группа
детей были идентичны по возрасту, характеру и
давности заболевания, а также экстраренальны.м и
ренальным проявлениям патологии.
Эссенциале назначался в виде внутривенных
инъекций и внутрь из расчета 30-35 мг эссенциальных
фосфолипидов на кг массы тела ребенка в сутки в
течении 30-40 дней. Действие эссенциале начинало
проявляться с 10- 12 дня от начала лечения. В отличие
от контрольной группы, которая не получила эссен-
циале, у больных получавших препарат, быстрее
купировались отечный синдром, олигурия, мочевой
синдром, улучшилось общее состояние, аппетит,
нормализовались мышечный тонус и двигательная
активность, значительно уменьшились размеры
печени и! селезенки у больных с гепатолиенальным
синдромом,
также
установлены
отчётливое
улучшение азотовыделительной функции почек.
Включение эссенциале в комплексную терапию ХГН
нефротической формы показало положительное его
на гиперхолестеринемию, в результате чего в конце
цикла лечения холестерин плазмы значительно
(р<0,001) снижался в сравнении с исходным уровнем.
Обнаруженные данные, у больных гломе-
рулонефритом, получавших эссенциале в ком-
плексной терапии, показали ингибирующее влияние
его на интенсивность ПОЛ, активности ФЛаз,
состояние АОЗ и структуры эритроцитарных
мембран, которые существенно отличались по
сравнению с результатами у детей, находившихся
лишь на традиционном лечении. Так к концу лечения
у больных, получавших эссенциале, значительно
снижался уровень ДК в моче (р<0,01) и в мембранах
эритроцитов (р<0,001), а также отмечалось снижение
ФЛазной активности крови (р<0,001) и ФЛазы А2
мочи(р<0,001). Этому соответствовало значительное
повышение уровня СОД (р<0,001) в мембранах
эритроцитов и повышение катиалазной (р<0,001) и
пероксидазной (р<0,001) активности мочи у больных,
получавших эссенциале, в отличие от больных, не
получавших данный препарат.
Положительное влияние эссенциале на ак-
тивность ферментов АОЗ и ингибирующее влияние на
процессы ПОЛ и активность ФЛаз у больных
гломерулонефритом,
по-видимому,
связано
с
наличием в его составе ненасыщенных жирных
кислот
и
природных
антиоксидантов,
что
способствует повышению анти- окислительной
активности мембранных липидов. тем самым
стабилизации цитоме.мбран. Подтверждением этого
служило значительное повышение уровня ФХ
(р<0,001) в мембранах эритроцитов, на фоне
снижения уровня ЛФХ (р<0,001) и механической
стойкости (р<0,001) и деформируемости (р<0,001)
эритроцитов.
Установлено, что сочетанное применение ГК и
эссенциале в комплексной терапии нефротического
варианта гломерулонефрита у детей приводит к
значительному сокращению продолжительности
некоторых ренальных и экстраренальных проявлений
заболевания и способствуют ускорению развития
клиникобиохимической ремиссии. В основе положи-
тельного влияния данной терапии, по- видимому,
лежит улучшение метаболизма глюкокортикоидов в
печени и, с другой стороны, стабилизация структурно
- функционального состояния цитомембран.
Выводы
1.
Установлено, что у больных ОГН в стадии
разгара и ХГН при обострении повышается
активность ПОЛ клеточных мембран, активность
ФЛаз эритроцитов и ФЛазы А
2
мочи, снижается
уровень
СОД
эритроцитов,
каталазная
и
пероксидазная активность мочи, а также процентное
содержание ЛФХ в мембранах эритроцитов,
снижается
механическая
стойкость
и
деформирующая способность красных клеток крови.
2.
Установлено,
что
в
возникновении,
хронизации и прогрессировании гломерулонефрита
важную роль играет такой неи.ммун- ный компонент,
как «оксидативный стресс», который обуславливает
накопление продуктов ПОЛ на фоне снижения АОЗ
организма у детей.
3.
У больных ОГН в период разгара и при
обострении ХГН выявлена положительная
Фестниқврача. 2011, № 4, Самарканд
коррелятивная зависимость клиниколабораторных
проявлений
заболевания
(отечный
синдром,
протеинурия,
гематурия)
от
выраженности
дестабилизации клеточных мембран (г=+0.87;
+
0.93) и
отрицательная по отношению к активности СОД
эритроцитов(г=- 0,92).
4.
Применение эссенциале в составе ком-
плексной терапии нефротической формы гло-
мерулонефрита приводит к сокращению про-
должительности ренальных и экстраренальных
проявлений заболевания, ускорению наступления
клинико-лабораторной
ремиссии.
Клинической
эффективности
эссенциале
соответствует
уменьшение продуктов ПОЛ, снижение активности
ФЛаз крови и мочи, улучшения структурно-
функционального
состояния
эритроцитарных
мембран.
Литература
1.
Вельтищев Ю.Е. Проблемы мембранной патологии в педиатрии// Вопр.охр.мат.-1981.-№4.-С.З-9.
2.
Гринштейн Ю.И. Роль липопероксидации в прогрессировании гломерулонефрита и почечной недостаточности/'/
Нефрологический семинар.4-й; Сборник трудов.-СПб.;ТНА, 1996.-С. 132-133.
3.
Жмуров В.А. Мембрано- и иммунологические аспекты гломерулонефрита// Санкт-Петербургский нефрологический
семинар, 3-й: Сборник,- СПб.; THA.I995.-C. 178-181.
4.
Жмуров В.А.. Крылов В.И.. Петрушина А.Д. Влияние антиоксидантов и мсклерона на процессы дестабилизации
клеточных мембран при нефритах у детей//Вопр.мед.химии.-1987.-Т.ЗЗ,№1.-С.40-43.
5.
Игнатова М.С.,Вельтищев Ю.Е.Детская нефрология.-Л.,-1982,-528с.
6.
Ишкабулов Д., Ахматов А., Каримова Н.А., Тухватуллина Р.Р. Мембранные механизмы метеочувствительности
больных гломерулонефритом, их особенности у детей с отягощенным нефрологическим анамнезом// «Проблемы
детской нефрологии» 1У симпозиум педиатров - нефрологов соц. стран: Тезисы доклад,- Москва, -1986, -С. 45.
7.
Крылов В.И., Жмуров В.А.. Кожевников Ю.Н. и др. Антиоксидантная терапия диффузного гломерулонефрита у детей//
Вопр. охр.мат.-1981 .-4.-С.26-28.
8.
Пелещук А.П., Мельман Н.Я., Анищенко В.М. и др. Влияние эссенциале на липидный обмен у больных с хронической
почечной недостаточностью//Врач.дело.-1983.-№2.-С.24-26.
9.
Ржевская О.Н., Коровина Н.А. Клинико-диагностическое и патогенетическое значение процессов перекисного
окисления липидов при интерстициальном нефрите у детей/' Урол.и нефрол.-1984.-№6.-С.56- 61.
10.
Тугушева Ф.А., Зубина И.М., Митрофанова О.В. Оксидативный стресс и хроническая болезнь почек// Нефрология.-
2007.-Том 11,№3 .-С.23-47.
11.
Тугушева Ф.А. Процессы перекисного окисления липидов и защитная роль антиоксидантной системы в норме и у
больных с хроническим гломерулонефритом. ЧастьП// Нефрология.-2001.-Том5,№2.-С.20-31.
12.
Baran E.Ja., Nikulina J J., Korol L.V. The state of antioxidant system enzymes in terminal renal failure and after kidney al
lograft/Congress of the European Dialisis and Transplant Association - Eurpean Renal Association, XXXHl-rd; Abstracts.-
Amsterdam. 1996.-P. 173.
13.
Gwinner W„ Grone Н,- J. Role of reactive oxygen species in glomtrulonephritis// Nepyrol.Dial.Transplant.- 2000.-Vol.15.N8.-
P.! 127-1132.
14.
Richard M.J.. Fmaud J., Jurkouvitz C.et al. Trace elements and lipid peroxidation abnormalities in patients with chronic renal
failure//Nefron.-1991.-Vol.57,Nl.-P.10-15.
